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PRV激活三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的探究

發(fā)布時(shí)間:2021-02-25 07:18
  偽狂犬。≒seudorabies,PR,又名Aujeszky’s disease,AD),是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的包括多種家畜和野生動(dòng)物共患的一種急性傳染病,該病是危害養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一,每年造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。偽狂犬病病毒(PRV)屬于皰疹病毒科中的α皰疹病毒亞科,在PRV的潛伏感染期,動(dòng)物體內(nèi)檢測(cè)不到病毒粒子,也不向外排毒,但在相應(yīng)應(yīng)激因素的刺激下,潛伏感染的PRV可被激活,可重新產(chǎn)生感染性病毒粒子,導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病,并向外排毒。關(guān)于PRV潛伏感染的建立、維持及激活機(jī)制尚不明確,控制和根除偽狂犬病所面臨的主要障礙是PRV的潛伏感染問(wèn)題,F(xiàn)有報(bào)道顯示,豬體外接種PRV可導(dǎo)致神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的激活,豬神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的活化主要表現(xiàn)為形態(tài)的變化、炎癥因子的分泌以及細(xì)胞的增殖,而NF-кB信號(hào)通路是病原感染引起神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分泌炎癥因子的關(guān)鍵信號(hào)通路,病毒激活NF-κB信號(hào)通路,NF-κB信號(hào)通路的活化會(huì)啟動(dòng)很多炎癥因子的表達(dá),繼而激活宿主的免疫系統(tǒng);細(xì)胞因子方面,病毒感染免疫細(xì)胞后造成細(xì)胞死亡,導(dǎo)致很多細(xì)胞因子的釋放,如IL-1、IL-6和IL-8以及TNF... 

【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 豬偽狂犬病概述
        1.1 豬偽狂犬病主要流行病學(xué)特征
        1.2 偽狂犬病毒致病機(jī)理研究進(jìn)展
        1.3 病毒對(duì)信號(hào)通路的影響在致病機(jī)理中的作用研究
        1.4 偽狂犬病毒感染細(xì)胞的信號(hào)通路研究
    2 偽狂犬病毒對(duì)NF-кB信號(hào)通路影響的研究進(jìn)展
        2.1 信號(hào)通路和NF-кB信號(hào)通路簡(jiǎn)介
        2.2 NF-κB通路活化途徑分類和正負(fù)調(diào)節(jié)
        2.3 病毒調(diào)節(jié)NF-кB信號(hào)通路的研究進(jìn)展
        2.4 PI3K/Akt/NF-кB信號(hào)通路與細(xì)胞凋亡的關(guān)系
        2.5 TLRs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與NF-кB信號(hào)通路的關(guān)系
        2.6 NF-кB信號(hào)通路在PRV激活三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中的作用有待揭示
        2.7 本研究的目的和意義
第二章 PRV感染小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的研究
    1 材料
        1.1 病料與細(xì)胞
        1.2 主要試劑
        1.3 主要溶液的配制
        1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 PRV增毒培養(yǎng)
        2.2 小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3 PRV感染小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的病變觀察
        2.4 細(xì)胞間接免疫熒光法檢測(cè)PRV在TG細(xì)胞內(nèi)的增殖情況
        2.5 小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞感染PRV以后的增殖情況
    3 結(jié)果
        3.1 PRV增毒培養(yǎng)結(jié)果
        3.2 成年小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的分離培養(yǎng)結(jié)果
        3.3 TG細(xì)胞接毒PRV后出現(xiàn)的CPE現(xiàn)象
        3.4 細(xì)胞間接免疫熒光法檢測(cè)PRV在TG細(xì)胞內(nèi)的增殖結(jié)果
        3.5 小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞感染PRV以后的增殖情況
    4 討論
    5 結(jié)論
第三章 PRV對(duì)三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞NF-кB通路影響的研究
    1 材料
        1.1 病料與細(xì)胞
        1.2 主要試劑
        1.3 主要溶液的配制
        1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 利用雙抗夾心法ELISA檢測(cè)樣本中IL-1的含量
        2.2 MyD88和TRIF基因沉默實(shí)驗(yàn)
    3 結(jié)果
        3.1 Vero細(xì)胞接PRV后IL-1含量檢測(cè)(濃度pg/mL)結(jié)果
        3.2 TG細(xì)胞接毒PRV后IL-1檢測(cè)(濃度pg/mL)結(jié)果
        3.3 TG細(xì)胞接毒PRV后IL-6檢測(cè)(濃度pg/mL)結(jié)果
        3.4 沉默MyD88和TRIF后IL-1檢測(cè)結(jié)果(濃度pg/mL)
    4 討論
    5 結(jié)論
第四章 PRV對(duì)細(xì)胞NF-КB通路影響研究的體內(nèi)驗(yàn)證
    1 材料
        1.1 病料與細(xì)胞
        1.2 主要試劑和配方
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 小鼠腦內(nèi)接毒PRV實(shí)驗(yàn)
        2.2 小鼠腦組織中IL-1含量檢測(cè)
        2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)p65轉(zhuǎn)錄因子
        2.4 Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p65表達(dá)蛋白量
    3 結(jié)果
        3.1 小鼠接毒PRV到腦組織后出現(xiàn)的瘙癢癥狀
        3.2 PRV接毒到小鼠腦組織后IL-1的含量檢測(cè)結(jié)果
        3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)NF-кB p65 轉(zhuǎn)錄因子含量的結(jié)果
        3.4 Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p65 表達(dá)蛋白量的結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
主要參考文獻(xiàn)
附錄一 研究生期間參與的課題
附錄二 攻讀碩士學(xué)位期間參與發(fā)表的論文
附錄三 本文用到的部分英文縮寫及含義說(shuō)明
致謝



本文編號(hào):3050637

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