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H9N2亞型禽流感病毒生物學特性分析及PR8八質(zhì)粒反向遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建與候選疫苗株的制備

發(fā)布時間:2021-02-22 11:09
  為研究H9N2亞型禽流感病毒(AIV)對哺乳動物的致病力,本研究選取了20092010年間從我國南方地區(qū)分離到的6株H9N2亞型AIV,測定分析了其基因組序列及在小鼠體內(nèi)的復(fù)制能力;蚪M序列分析顯示:6株病毒HA基因的裂解位點處均為-PSR(K)SSRGLF-,為低致病性分子特征,6株病毒均具有人樣受體結(jié)合位點Leu226,其他受體結(jié)合位點仍具有AIV的特征(Asn183、Ala190和Gly228)。6株病毒的PB2蛋白仍保持禽流感病毒低致病性分子特征(Glu627和Asp701)。全基因遺傳進化分析表明,部分病毒的內(nèi)部基因(如NS、M等)與其他亞型病毒在進化上較接近,可能成為其他亞型病毒的基因供體。BALB/c小鼠人工感染試驗結(jié)果顯示6株病毒對小鼠呈現(xiàn)為低致病性,病毒僅局限于小鼠呼吸道復(fù)制。八質(zhì)粒反向遺傳操作系統(tǒng)基于雙向轉(zhuǎn)錄載體,如pBD,pHW2000等,同時含有RNA聚合酶Ⅰ啟動子序列和方向與之相反的RNA聚合酶Ⅱ啟動子序列,能同時翻譯出聚合酶復(fù)合體并轉(zhuǎn)錄出病毒vRNA,并產(chǎn)生并釋放感染性病毒顆粒。該系統(tǒng)的建立能大大縮短構(gòu)建重組質(zhì)粒... 

【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】:48 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

H9N2亞型禽流感病毒生物學特性分析及PR8八質(zhì)粒反向遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建與候選疫苗株的制備


流感病毒蛋白上與致病性相關(guān)的關(guān)鍵氨基酸位點Fig1Keyaminoacidsinviralproteinsthatassociatewithinfluenzaviralpathogenicity

示意圖,肺臟,鼻甲,示意圖


圖 2-4 攻毒后小鼠體重變化示意圖Fig.2-4 Weight changes of mice after infection with 106EID50of H9N2 AIV.圖 2-5 鼻腔感染后 3 天小鼠鼻甲、肺臟中的病毒含量Fig 2-5 virus titers in turbinate and lung of mice 3 days post-infection 取小鼠臟器,臟器滴定結(jié)果表明 6 株病毒均能在小鼠鼻甲中復(fù)10 不能在肺臟中復(fù)制外,其余 5 株均能在肺臟復(fù)制,并且 CK/G

譜系,肺臟,鼻甲,鼻腔


圖 2-5 鼻腔感染后 3 天小鼠鼻甲、肺臟中的病毒含量Fig 2-5 virus titers in turbinate and lung of mice 3 days post-infection攻毒后第 3 d 取小鼠臟器,臟器滴定結(jié)果表明 6 株病毒均能在小鼠鼻甲中復(fù)制,6 株病CK/JS/C1158/10 不能在肺臟中復(fù)制外,其余 5 株均能在肺臟復(fù)制,并且 CK/GX/C2239/HuB/C1564/10 在肺臟的病毒滴度明顯高于其他毒株(圖 2-5)。在小鼠腦、腎、脾中均未毒。4 討論H9N2 亞型 AIV 主要感染禽類,水禽是其自然宿主,但隨著禽流感病毒的不斷遺傳變N2 AIV 已經(jīng)逐步獲得了感染甚至致死哺乳動物的能力。我國的 H9N2 亞型 AIV 流行情雜,存在不同的基因型。一般將 H9N2 亞型 AIV 分為兩大譜系,即北美譜系和歐洲譜中歐洲譜系又可細分為三類:以 A/quail/HongKong/G1/97 (HK-G1)為代表的 G1 系uck/HongKong/Y280/97 (HK-Y280)為代表的 Y280 系,以 A/Chicken/Beijing/1/94(BJ-94的 BJ94 系 , 以 A/Chicken/Hongkong/G9/97(HK-G9) 為 代 表 G9 系 hicken/Korea/38349-P96323/96 為代表的 Korea 系,及以 A/duck/Hongkong/Y439/97 (HK


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