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ANXA8基因調(diào)控豬子宮內(nèi)膜細胞增殖作用的機理研究

發(fā)布時間:2021-02-18 10:51
  胚胎附植期是豬早期妊娠胚胎丟失最敏感時期之一,受很多因子調(diào)控,但目前對豬胚胎附植的相關(guān)因子研究較少。在本實驗室先前的轉(zhuǎn)錄組和蛋白的測序數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)ANXA8基因在豬的胚胎附植期差異表達。ANXA8基因是膜聯(lián)蛋白家族的成員之一,編碼抗凝血蛋白參與凝血級聯(lián)并作為一種間接性的凝血酶特異性復(fù)合物。然而,目前在豬的胚胎附植以及豬的子宮內(nèi)膜細胞中ANXA8基因的功能均未見報道。為了了解ANXA8基因在豬的子宮內(nèi)膜中以及可能對豬胚胎附植產(chǎn)生的作用,本研究先檢測了豬妊娠早期的子宮內(nèi)膜組織中ANXA8基因的相對表達;然后將構(gòu)建的真核超表達載體pcDNA3.1(+)-ANXA8和ANXA8基因的干涉片段轉(zhuǎn)染到豬子宮內(nèi)膜細胞中,通過免疫熒光、實時熒光定量PCR、流式細胞術(shù)和western blot等技術(shù)研究ANXA8基因在豬子宮內(nèi)膜細胞中的調(diào)控作用;通過小鼠子宮角注射方法確定ANXA8基因?qū)ε咛ジ街驳挠绊憽V饕芯拷Y(jié)果:1.實時熒光定量PCR技術(shù)檢測豬妊娠9-15 d和18 d的子宮內(nèi)膜組織中ANXA8基因的表達情況,發(fā)現(xiàn)該基因在妊娠12 d的相對表達量最高。通過免疫熒光方法確定了ANXA8蛋白在豬子宮內(nèi)膜... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【圖文】:

ANXA8基因調(diào)控豬子宮內(nèi)膜細胞增殖作用的機理研究


胚胎附植過程中的關(guān)鍵因子(Zhangetal2013)

約克夏,梅山豬,子宮內(nèi)膜組織,基因


ANXA8 基因調(diào)控豬子宮內(nèi)膜細胞增殖作用的機理研究在人的 Hela 細胞中 ANXA8 基因與內(nèi)胚層的形成有關(guān),并且維持 EGF 誘導(dǎo)上ERK1/2 的激活 (Goebeler et al 2008);ANXA8 基因可以經(jīng)由 EGF-FOXO4 信號通參與膽管癌細胞的擴散和腫瘤的轉(zhuǎn)移 (Lee et al 2009)。ANXA8 基因?qū)?CD63 細來說是關(guān)鍵因子,因為可以通過 CD63 細胞的表面來調(diào)控白細胞的聚集 (Poeter et2014)。然而,在豬中 ANXA8 基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜細胞的生物學(xué)功能尚不清。此外,實驗室先前的測序數(shù)據(jù)表明在豬的胚胎附植期中 ANXA8 基因和蛋白在子宮內(nèi)膜織中差異表達(圖 1-2,1-3)。進而推測 ANXA8 基因可能對豬的子宮內(nèi)膜的功能生影響,進而對豬的胚胎附植產(chǎn)生影響。

蛋白,比值,附植,豬胚胎


1-3ANXA8 蛋白在大白豬妊娠七個時期(10 d、11 d、12 d、13 d、14 d、15 d、18 d)相妊娠第 9 d 的表達比值ig. 1-3 The relative expression ratio of ANXA8 protein in pregnancy days (10 d, 11 d, 12 d, 1314 d, 15 d, 18 d) to the day 9 of pregnancy in Largewhite pigs1.5 研究目的與意義胚胎附植過程是豬生產(chǎn)的重要時期之一,其過程中的分子調(diào)控機制構(gòu)成了一常復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。在胚胎附植過程中分子機制的調(diào)控直接或間接的影響其胚植的成敗,對養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟效益有重要的影響。目前對人和小鼠中影響胚胎附相關(guān)因子的研究較多,但對于豬胚胎附植過程中的分子機制尤其是標(biāo)志因子的相對較少,故研究胚胎附植過程中可能起作用的因子對深入了解豬胚胎附植以續(xù)生殖生產(chǎn)至關(guān)重要。高通量mRNA轉(zhuǎn)錄組測序和蛋白組測序的對比研究對分析早期不同妊娠時期

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Wnt信號通路在胚胎著床中的作用[J]. 唐業(yè)東,張正紅,唐宗浩,王正朝.  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報. 2018(01)
[2]小鼠胚胎附植研究現(xiàn)狀[J]. 陶俐,苗凱,安磊,吳中紅,田見暉.  黑龍江動物繁殖. 2013(03)

博士論文
[1]瘦素在豬胚胎附植中的功能及其信號通路的研究[D]. 王紅芳.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]食管鱗狀細胞癌中microRNA-21與ERK1/2通路調(diào)控機制的研究[D]. 劉鳳霞.新疆醫(yī)科大學(xué) 2013



本文編號:3039455

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