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馬麝病毒性出血癥RT-PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-02-16 03:16
  馬麝病毒性出血癥(Moschus chrysogaster (sifanicus) viral hemorrhagic disease, McVHD)為馬麝的一種病毒性傳染病,發(fā)病急、病死率高,嚴(yán)重威脅我國馬麝種群的健康和安全。該病病原馬麝出血癥病毒(Moschus chrysogaster (sifanicus) hemorrhagic disease virus, McHDV)與杯狀病毒科(Caliciviridae)兔病毒屬(Lagovirus)的兔出血癥病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV)高度同源。為建立該病快速簡便的診斷方法,本研究對病原基因組序列及兔出血癥病毒基因組序列進(jìn)行比對分析,設(shè)計并合成引物McVHDF/R,在反應(yīng)條件優(yōu)化及特異性和敏感性分析的基礎(chǔ)上,建立馬麝病毒性出血癥的反轉(zhuǎn)錄PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)診斷方法。結(jié)果表明,所建立的RT-PCR方法可在目標(biāo)病毒基因組上擴增出1條448 bp的目的片段,而與沙門氏菌(Salmonella)、巴氏桿菌(Pasteurella... 

【文章來源】:農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2020,28(05)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 試劑與樣品
    1.2 毒株與菌種
    1.3 引物設(shè)計
    1.4 RNA提取
    1.5 RT-PCR擴增及最佳Tm值確定
    1.6 PCR最佳引物濃度的確定
    1.7 特異性試驗
    1.8 敏感性試驗
    1.9 重復(fù)性試驗
    1.1 0 臨床病料的RT-PCR檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 PCR反應(yīng)條件的確定
    2.2 PCR最佳引物濃度的確定
    2.3 特異性試驗
    2.4 敏感性試驗
    2.5 重復(fù)性試驗
    2.6 臨床應(yīng)用試驗
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]一種新的動物傳染病——馬麝病毒性出血癥[J]. 包世俊,邢小勇,丁小琴,高翔,安凱,伏小平,薛慧文.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(05)
[2]兔瘟常用檢測方法[J]. 靳巍,劉峰,任銳,孫營,邵洪澤,丁世杰.  吉林畜牧獸醫(yī). 2017(08)
[3]兔病毒血癥RT-PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 朱裕華,胡安康,陳全剛,韓旭峰,陳仁金.  上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2016(06)
[4]兔出血癥病毒與兔出血癥病毒2型復(fù)合RT-PCR檢測方法的初步研究[J]. 楊澤曉,趙希侖,李巖,姚學(xué)萍,王印,劉亞東,蒙正群,耿毅,白瑜.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2016(06)
[5]青海馬麝腸道寄生蟲感染情況調(diào)查[J]. 呂向輝,喬繼英,吳曉民,王靜,胡罕,裴俊峰,張洪峰,封托,王啟軍,孔飛,李滌非.  中國獸醫(yī)雜志. 2010(12)
[6]馬麝出血性肺炎的病理學(xué)觀察[J]. 路浩,胡俊杰,黃有德,劉宗平,趙寶玉.  中國獸醫(yī)雜志. 2010(06)
[7]馬麝呼吸系統(tǒng)疾病病原學(xué)研究[J]. 路浩,黃有德,劉宗平.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2008(01)
[8]兔出血癥病毒RT-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 王芳,李超美,楊龍圣,徐為中,張則斌,侯玉峰,陳國強,何孔旺.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2007(03)
[9]野捕和圈養(yǎng)繁殖雄性馬麝行為格局的比較[J]. 孟秀祥,馮金朝,周宜君,楊奇森,馮祚建,夏霖,孟智斌,華星.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報. 2006(11)
[10]中國的麝資源及其保護(hù)與利用現(xiàn)狀分析[J]. 劉文華,佟建明.  中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報. 2005(04)



本文編號:3036052

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