一株含新裂解酶的大腸桿菌噬菌體基因組測(cè)序及其裂解酶的活性檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間：2021-02-15 21:26
近年來(lái)日漸嚴(yán)重細(xì)菌抗生素耐藥問(wèn)題，已對(duì)人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展造成了極大威脅。面對(duì)耐藥菌不斷的增多和耐藥基因的廣泛傳播，噬菌體及其裂解酶再次成為人們的研究熱點(diǎn)。噬菌體及裂解酶相關(guān)分子，在抗菌治療方面具有抗生素?zé)o法比擬的優(yōu)越性。為了提高藥用噬菌體及裂解酶的安全性，不僅要分析它們的生物學(xué)特征，還要從基因水平分析它們的進(jìn)化及是否含有有害基因，對(duì)于革蘭氏陰性菌噬菌體的裂解酶更要研究從細(xì)胞外直接裂解細(xì)菌的方法，提高使用的方便性。本研究從自然界的污水分離到一株噬菌體vBEcoM-ep3，并研究各項(xiàng)生物學(xué)特性：它的最佳MOI在0.10.001之間；具有良好的熱穩(wěn)定性，50℃以下，2小時(shí)內(nèi)可以基本保持其原活性；潛伏期為20min，裂解期約40min，能裂解大腸桿菌O78及8株臨床分離的雞大腸桿菌；透射電鏡觀察結(jié)果顯示vBEcoM-ep3形態(tài)學(xué)上屬于肌尾噬菌體科，由此判斷它是一株裂解性較強(qiáng)、裂解譜廣的噬菌體。因此對(duì)其進(jìn)行全基因組測(cè)序，軟件預(yù)測(cè)、注釋分析各個(gè)開(kāi)放閱讀框的功能，從基因組水平研究噬菌體的進(jìn)化關(guān)系，由42351個(gè)核苷酸組成，GC含量為...
【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
噬菌斑vB_EcoM-ep3的形態(tài)
圖 1.2 噬菌體最佳感染復(fù)數(shù)（MOI）的測(cè)定（x 軸為不同 MOI，y 軸為噬菌體滴度）ig1.2 Determination of multiplicity of infection of bacteriopha噬菌體的溫度敏感性噬菌體對(duì)溫度的耐受性也有區(qū)別。vB_EcoM-ep3 的溫度敏隨溫度增高、處理時(shí)間延長(zhǎng)，存活的噬菌體數(shù)量逐漸降低2 小時(shí)內(nèi) vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良于 50℃時(shí)，滴度開(kāi)始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降 40min 后僅有少量噬菌體存活；70℃、80℃作用 20min 噬
on of multiplicity of infection of bacteriophage1.2.2.2 噬菌體的溫度敏感性不同的噬菌體對(duì)溫度的耐受性也有區(qū)別。vB_EcoM-ep3 的溫度敏感性如圖1.3 所示，隨溫度增高、處理時(shí)間延長(zhǎng)，存活的噬菌體數(shù)量逐漸降低。溫度在50℃以下，2 小時(shí)內(nèi) vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良好的熱穩(wěn)定性；溫度高于 50℃時(shí)，滴度開(kāi)始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降達(dá)四個(gè)數(shù)量級(jí)，作用 40min 后僅有少量噬菌體存活；70℃、80℃作用 20min 噬菌體基本全部失活。圖 1.3 噬菌體的溫度敏感性（x 軸為不同溫度下的作用時(shí)間，y 軸為噬菌體滴度）Fig1.3The temperature sensitivity of phage1.2.2.3 氯仿及乙醚敏感性結(jié)果如表 1.2 所示，vB_EcoM-ep3 與氯仿、乙醚作用后效價(jià)變化均不明顯
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]1株寬宿主譜大腸桿菌噬菌體的生物學(xué)特性觀察[J]. 徐焰,熊鴻燕,宋建勇,王思雄. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(23)
[2]大腸桿菌VT噬菌體受體（vpr）基因突變株的鑒定[J]. 嚴(yán)亞賢,孫建和,陸承平,Heather E Allison. 微生物學(xué)報(bào). 2002(06)
[3]大腸桿菌VT噬菌體受體基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建[J]. 嚴(yán)亞賢,陸承平. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)科學(xué)版). 2002(02)
[4]O139霍亂弧菌噬菌體的分離[J]. 蔣小皖,朱鳳才,祖榮強(qiáng). 江蘇衛(wèi)生保健. 2002(03)
博士論文
[1]分枝桿菌噬菌體的生物學(xué)特性及基因組學(xué)研究[D]. 劉平.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012
碩士論文
[1]大腸桿菌噬菌體的分離鑒定與初步應(yīng)用[D]. 張培東.青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號(hào)：3035564
【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
噬菌斑vB_EcoM-ep3的形態(tài)
圖 1.2 噬菌體最佳感染復(fù)數(shù)（MOI）的測(cè)定（x 軸為不同 MOI，y 軸為噬菌體滴度）ig1.2 Determination of multiplicity of infection of bacteriopha噬菌體的溫度敏感性噬菌體對(duì)溫度的耐受性也有區(qū)別。vB_EcoM-ep3 的溫度敏隨溫度增高、處理時(shí)間延長(zhǎng)，存活的噬菌體數(shù)量逐漸降低2 小時(shí)內(nèi) vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良于 50℃時(shí)，滴度開(kāi)始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降 40min 后僅有少量噬菌體存活；70℃、80℃作用 20min 噬
on of multiplicity of infection of bacteriophage1.2.2.2 噬菌體的溫度敏感性不同的噬菌體對(duì)溫度的耐受性也有區(qū)別。vB_EcoM-ep3 的溫度敏感性如圖1.3 所示，隨溫度增高、處理時(shí)間延長(zhǎng)，存活的噬菌體數(shù)量逐漸降低。溫度在50℃以下，2 小時(shí)內(nèi) vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良好的熱穩(wěn)定性；溫度高于 50℃時(shí)，滴度開(kāi)始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降達(dá)四個(gè)數(shù)量級(jí)，作用 40min 后僅有少量噬菌體存活；70℃、80℃作用 20min 噬菌體基本全部失活。圖 1.3 噬菌體的溫度敏感性（x 軸為不同溫度下的作用時(shí)間，y 軸為噬菌體滴度）Fig1.3The temperature sensitivity of phage1.2.2.3 氯仿及乙醚敏感性結(jié)果如表 1.2 所示，vB_EcoM-ep3 與氯仿、乙醚作用后效價(jià)變化均不明顯
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]1株寬宿主譜大腸桿菌噬菌體的生物學(xué)特性觀察[J]. 徐焰,熊鴻燕,宋建勇,王思雄. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(23)
[2]大腸桿菌VT噬菌體受體（vpr）基因突變株的鑒定[J]. 嚴(yán)亞賢,孫建和,陸承平,Heather E Allison. 微生物學(xué)報(bào). 2002(06)
[3]大腸桿菌VT噬菌體受體基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建[J]. 嚴(yán)亞賢,陸承平. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)科學(xué)版). 2002(02)
[4]O139霍亂弧菌噬菌體的分離[J]. 蔣小皖,朱鳳才,祖榮強(qiáng). 江蘇衛(wèi)生保健. 2002(03)
博士論文
[1]分枝桿菌噬菌體的生物學(xué)特性及基因組學(xué)研究[D]. 劉平.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012
碩士論文
[1]大腸桿菌噬菌體的分離鑒定與初步應(yīng)用[D]. 張培東.青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號(hào)：3035564
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