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豬輪狀病毒G4P[6]株的分離鑒定及新型檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-02-15 04:56
  豬輪狀病毒(Porcine Rotavirus,PoRV)是引起哺乳仔豬和斷奶仔豬腹瀉和胃腸炎的常見(jiàn)病原,導(dǎo)致仔豬出現(xiàn)腹瀉、嘔吐、消瘦和脫水等臨床癥狀,甚至引起仔豬死亡。PoRV在全球范圍內(nèi)廣泛流行,給豬場(chǎng)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。PoRV的重組基因可以在豬群和人群中檢出,已成為一個(gè)潛在的公共衛(wèi)生問(wèn)題需要進(jìn)行進(jìn)一步的調(diào)查研究。為了解我國(guó)PoRV的流行情況,對(duì)2016年采集的2240份血清樣品進(jìn)行PoRV、豬傳染性胃腸炎(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的血清IgG抗體檢測(cè);對(duì)191份疑似病毒性腹瀉發(fā)病豬場(chǎng)的豬腸道和糞便樣品進(jìn)行了上述三種病毒的核酸檢測(cè)。血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示,PoRV、TGEV和PEDV個(gè)體陽(yáng)性率分別為90.85%、22.99%和63.10%,場(chǎng)陽(yáng)性率分別為100%、82.14%和89.29%。豬場(chǎng)中存在三種病毒的雙重和三重混合感染。病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示,PoRV、TGEV和PEDV個(gè)體陽(yáng)性率分別為13.09%、0.52%和59.16%,場(chǎng)陽(yáng)性... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

豬輪狀病毒G4P[6]株的分離鑒定及新型檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用


圖2-1豬場(chǎng)PoRV抗體陽(yáng)性率??Fig?2-1?Positive?rate?of?PoRV?antibody?in?swine?farms??

細(xì)胞,膠體金,色帶,細(xì)胞病變


3.4.1細(xì)胞病變結(jié)果??將病毒在MA104細(xì)胞盲傳至第5代,接毒后48h細(xì)胞出現(xiàn)明顯病變。正常MA104細(xì)胞生??長(zhǎng)良好,形態(tài)清晰(圖3-1A)。接種病毒后的MA104細(xì)胞固縮,顆粒增多,最后細(xì)胞崩解脫落??(圖?3-1B)。??■■??A?B??圖3-1細(xì)胞病變結(jié)果(20〇x)??Fig?3-1?Results?of?cytopathic?effects?(20〇x)??A:正常MA104細(xì)胞:B:輪狀病毒感染48h后的MA104細(xì)胞??A:?Normal?MAI04?cells;?B:?MAI04?cells?infected?RoRV?after?48?h?incubation??3.4.2股體金檢測(cè)結(jié)果??將病毒液加至1^3八8、卩已〇八8、。啊臧私(jīng)膠體金的樣品孔內(nèi),5|11丨11后1^3厶§、卩£〇八§、??TGEAg膠體金上“C”均出現(xiàn)色帶,表明試驗(yàn)結(jié)果成立。在Rota?Ag膠體金上‘‘T’出現(xiàn)色帶,表明??病毒液中含有輪狀病毒抗原,見(jiàn)圖3-2。??之?4?....毳??圖3-2膠體金檢測(cè)結(jié)果??Fig?3-2?Results?of?colloid?gold?test??33??

細(xì)胞病變,細(xì)胞,膠體金


3.4.1細(xì)胞病變結(jié)果??將病毒在MA104細(xì)胞盲傳至第5代,接毒后48h細(xì)胞出現(xiàn)明顯病變。正常MA104細(xì)胞生??長(zhǎng)良好,形態(tài)清晰(圖3-1A)。接種病毒后的MA104細(xì)胞固縮,顆粒增多,最后細(xì)胞崩解脫落??(圖?3-1B)。??■■??A?B??圖3-1細(xì)胞病變結(jié)果(20〇x)??Fig?3-1?Results?of?cytopathic?effects?(20〇x)??A:正常MA104細(xì)胞:B:輪狀病毒感染48h后的MA104細(xì)胞??A:?Normal?MAI04?cells;?B:?MAI04?cells?infected?RoRV?after?48?h?incubation??3.4.2股體金檢測(cè)結(jié)果??將病毒液加至1^3八8、卩已〇八8、。啊臧私(jīng)膠體金的樣品孔內(nèi),5|11丨11后1^3厶§、卩£〇八§、??TGEAg膠體金上“C”均出現(xiàn)色帶,表明試驗(yàn)結(jié)果成立。在Rota?Ag膠體金上‘‘T’出現(xiàn)色帶,表明??病毒液中含有輪狀病毒抗原,見(jiàn)圖3-2。??之?4?....毳??圖3-2膠體金檢測(cè)結(jié)果??Fig?3-2?Results?of?colloid?gold?test??33??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]2015~2016年我國(guó)東北地區(qū)豬病毒性腹瀉流行病學(xué)調(diào)查[J]. 朱子健,閆麗輝,鞠妍,唐志芬,楊金雨,朱慶虎.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(05)
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碩士論文
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[4]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重?zé)晒釸T-PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 許夢(mèng)怡.揚(yáng)州大學(xué) 2016
[5]豬輪狀病毒的分離鑒定及其環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)檢測(cè)方法的建立[D]. 張賀偉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
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[8]豬病毒性腹瀉多重RT-PCR診斷方法的建立和應(yīng)用及豬輪狀病毒的分離[D]. 張坤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



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