豬輪狀病毒G4P[6]株的分離鑒定及新型檢測方法的建立與應用
發(fā)布時間:2021-02-15 04:56
豬輪狀病毒(Porcine Rotavirus,PoRV)是引起哺乳仔豬和斷奶仔豬腹瀉和胃腸炎的常見病原,導致仔豬出現腹瀉、嘔吐、消瘦和脫水等臨床癥狀,甚至引起仔豬死亡。PoRV在全球范圍內廣泛流行,給豬場造成巨大的經濟損失。PoRV的重組基因可以在豬群和人群中檢出,已成為一個潛在的公共衛(wèi)生問題需要進行進一步的調查研究。為了解我國PoRV的流行情況,對2016年采集的2240份血清樣品進行PoRV、豬傳染性胃腸炎(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的血清IgG抗體檢測;對191份疑似病毒性腹瀉發(fā)病豬場的豬腸道和糞便樣品進行了上述三種病毒的核酸檢測。血清學檢測結果顯示,PoRV、TGEV和PEDV個體陽性率分別為90.85%、22.99%和63.10%,場陽性率分別為100%、82.14%和89.29%。豬場中存在三種病毒的雙重和三重混合感染。病原學檢測結果顯示,PoRV、TGEV和PEDV個體陽性率分別為13.09%、0.52%和59.16%,場陽性...
【文章來源】:中國農業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】:106 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1豬場PoRV抗體陽性率??Fig?2-1?Positive?rate?of?PoRV?antibody?in?swine?farms??
3.4.1細胞病變結果??將病毒在MA104細胞盲傳至第5代,接毒后48h細胞出現明顯病變。正常MA104細胞生??長良好,形態(tài)清晰(圖3-1A)。接種病毒后的MA104細胞固縮,顆粒增多,最后細胞崩解脫落??(圖?3-1B)。??■■??A?B??圖3-1細胞病變結果(20〇x)??Fig?3-1?Results?of?cytopathic?effects?(20〇x)??A:正常MA104細胞:B:輪狀病毒感染48h后的MA104細胞??A:?Normal?MAI04?cells;?B:?MAI04?cells?infected?RoRV?after?48?h?incubation??3.4.2股體金檢測結果??將病毒液加至1^3八8、卩已〇八8、。啊臧私浤z體金的樣品孔內,5|11丨11后1^3厶§、卩£〇八§、??TGEAg膠體金上“C”均出現色帶,表明試驗結果成立。在Rota?Ag膠體金上‘‘T’出現色帶,表明??病毒液中含有輪狀病毒抗原,見圖3-2。??之?4?....毳??圖3-2膠體金檢測結果??Fig?3-2?Results?of?colloid?gold?test??33??
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒1型微滴數字PCR定量檢測方法的建立[J]. 原霖,訾占超,亢文華,李曉霞,汪葆玥,王靜,韓燾,陳亞娜,倪建強,翟新驗. 中國獸醫(yī)學報. 2017(11)
[2]偽狂犬病病毒微滴數字PCR定量檢測方法的建立[J]. 陳亞娜,王靜,訾占超,亢文華,汪葆玥,倪建強,原霖. 畜牧獸醫(yī)學報. 2017(09)
[3]2015~2016年我國東北地區(qū)豬病毒性腹瀉流行病學調查[J]. 朱子健,閆麗輝,鞠妍,唐志芬,楊金雨,朱慶虎. 中國預防獸醫(yī)學報. 2017(05)
[4]北京規(guī)模化豬場病毒性腹瀉隱性感染情況調查[J]. 劉鄧,賈澤穎,張丹,全炎銘,郭又春,劉莉如,劉修全,陳華林. 中國豬業(yè). 2017(04)
[5]華東地區(qū)豬病毒性腹瀉感染狀況調查[J]. 張佩華,倪建平,繆德年,何錫忠,張春玲,蔣鳳英,李春華. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2017(02)
[6]廣東部分地區(qū)豬流行性腹瀉病毒流行病學調查[J]. 白小磊,崔進,崔甜甜,陳耀,石慶偉,馮嘉萍,王林川,張桂紅. 中國獸醫(yī)學報. 2016(11)
[7]重慶市2014—2015年部分腹瀉發(fā)病豬場豬輪狀病毒血清流行病學調查[J]. 羅煉釗,龍安格,田成林,陳健勇,杜永新,馮培峰,張云貴,馬鮮平,唐明霞,易華山. 中國動物檢疫. 2016(10)
[8]2014年部分地區(qū)豬流行性腹瀉病毒流行病學調查[J]. 常鐵城,陳建飛,馮力,倪宏波. 中國預防獸醫(yī)學報. 2016(04)
[9]檢測豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒的cDNA芯片的構建[J]. 滑翔,胡中凱,黃小波,文心田,曹三杰,文翼平,伍銳,鄧靜,趙松,尹人杰,常曉霞,歐陽達,張仙. 畜牧獸醫(yī)學報. 2015(12)
[10]2012-2013年廣東豬流行性腹瀉流行情況調查報告[J]. 田云,焦穎,王福廣,查云峰,孫彥偉. 廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2015(05)
碩士論文
[1]基于微滴式數字PCR技術的甲型流感病毒絕對定量研究[D]. 馮兆民.中國疾病預防控制中心 2017
[2]豬輪狀病毒GD-01-2015的全基因序列分析及雙夾心ELISA方法的建立[D]. 楊娟.揚州大學 2017
[3]豬圓環(huán)病毒2型微滴式數字PCR檢測方法的建立與初步應用[D]. 趙珊.四川農業(yè)大學 2016
[4]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重熒光RT-PCR檢測方法的建立[D]. 許夢怡.揚州大學 2016
[5]豬輪狀病毒的分離鑒定及其環(huán)介導等溫擴增反應檢測方法的建立[D]. 張賀偉.中國農業(yè)科學院 2015
[6]抗豬輪狀病毒單克隆抗體的制備及雙抗體夾心ELISA檢測方法的初步建立[D]. 孟柳.東北農業(yè)大學 2014
[7]豬輪狀病毒TaqMan熒光定量RT-PCR方法的建立及初步應用[D]. 吳奇英.華中農業(yè)大學 2013
[8]豬病毒性腹瀉多重RT-PCR診斷方法的建立和應用及豬輪狀病毒的分離[D]. 張坤.華中農業(yè)大學 2010
本文編號:3034469
【文章來源】:中國農業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】:106 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1豬場PoRV抗體陽性率??Fig?2-1?Positive?rate?of?PoRV?antibody?in?swine?farms??
3.4.1細胞病變結果??將病毒在MA104細胞盲傳至第5代,接毒后48h細胞出現明顯病變。正常MA104細胞生??長良好,形態(tài)清晰(圖3-1A)。接種病毒后的MA104細胞固縮,顆粒增多,最后細胞崩解脫落??(圖?3-1B)。??■■??A?B??圖3-1細胞病變結果(20〇x)??Fig?3-1?Results?of?cytopathic?effects?(20〇x)??A:正常MA104細胞:B:輪狀病毒感染48h后的MA104細胞??A:?Normal?MAI04?cells;?B:?MAI04?cells?infected?RoRV?after?48?h?incubation??3.4.2股體金檢測結果??將病毒液加至1^3八8、卩已〇八8、。啊臧私浤z體金的樣品孔內,5|11丨11后1^3厶§、卩£〇八§、??TGEAg膠體金上“C”均出現色帶,表明試驗結果成立。在Rota?Ag膠體金上‘‘T’出現色帶,表明??病毒液中含有輪狀病毒抗原,見圖3-2。??之?4?....毳??圖3-2膠體金檢測結果??Fig?3-2?Results?of?colloid?gold?test??33??
3.4.1細胞病變結果??將病毒在MA104細胞盲傳至第5代,接毒后48h細胞出現明顯病變。正常MA104細胞生??長良好,形態(tài)清晰(圖3-1A)。接種病毒后的MA104細胞固縮,顆粒增多,最后細胞崩解脫落??(圖?3-1B)。??■■??A?B??圖3-1細胞病變結果(20〇x)??Fig?3-1?Results?of?cytopathic?effects?(20〇x)??A:正常MA104細胞:B:輪狀病毒感染48h后的MA104細胞??A:?Normal?MAI04?cells;?B:?MAI04?cells?infected?RoRV?after?48?h?incubation??3.4.2股體金檢測結果??將病毒液加至1^3八8、卩已〇八8、。啊臧私浤z體金的樣品孔內,5|11丨11后1^3厶§、卩£〇八§、??TGEAg膠體金上“C”均出現色帶,表明試驗結果成立。在Rota?Ag膠體金上‘‘T’出現色帶,表明??病毒液中含有輪狀病毒抗原,見圖3-2。??之?4?....毳??圖3-2膠體金檢測結果??Fig?3-2?Results?of?colloid?gold?test??33??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒1型微滴數字PCR定量檢測方法的建立[J]. 原霖,訾占超,亢文華,李曉霞,汪葆玥,王靜,韓燾,陳亞娜,倪建強,翟新驗. 中國獸醫(yī)學報. 2017(11)
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[3]2015~2016年我國東北地區(qū)豬病毒性腹瀉流行病學調查[J]. 朱子健,閆麗輝,鞠妍,唐志芬,楊金雨,朱慶虎. 中國預防獸醫(yī)學報. 2017(05)
[4]北京規(guī)模化豬場病毒性腹瀉隱性感染情況調查[J]. 劉鄧,賈澤穎,張丹,全炎銘,郭又春,劉莉如,劉修全,陳華林. 中國豬業(yè). 2017(04)
[5]華東地區(qū)豬病毒性腹瀉感染狀況調查[J]. 張佩華,倪建平,繆德年,何錫忠,張春玲,蔣鳳英,李春華. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2017(02)
[6]廣東部分地區(qū)豬流行性腹瀉病毒流行病學調查[J]. 白小磊,崔進,崔甜甜,陳耀,石慶偉,馮嘉萍,王林川,張桂紅. 中國獸醫(yī)學報. 2016(11)
[7]重慶市2014—2015年部分腹瀉發(fā)病豬場豬輪狀病毒血清流行病學調查[J]. 羅煉釗,龍安格,田成林,陳健勇,杜永新,馮培峰,張云貴,馬鮮平,唐明霞,易華山. 中國動物檢疫. 2016(10)
[8]2014年部分地區(qū)豬流行性腹瀉病毒流行病學調查[J]. 常鐵城,陳建飛,馮力,倪宏波. 中國預防獸醫(yī)學報. 2016(04)
[9]檢測豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒的cDNA芯片的構建[J]. 滑翔,胡中凱,黃小波,文心田,曹三杰,文翼平,伍銳,鄧靜,趙松,尹人杰,常曉霞,歐陽達,張仙. 畜牧獸醫(yī)學報. 2015(12)
[10]2012-2013年廣東豬流行性腹瀉流行情況調查報告[J]. 田云,焦穎,王福廣,查云峰,孫彥偉. 廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2015(05)
碩士論文
[1]基于微滴式數字PCR技術的甲型流感病毒絕對定量研究[D]. 馮兆民.中國疾病預防控制中心 2017
[2]豬輪狀病毒GD-01-2015的全基因序列分析及雙夾心ELISA方法的建立[D]. 楊娟.揚州大學 2017
[3]豬圓環(huán)病毒2型微滴式數字PCR檢測方法的建立與初步應用[D]. 趙珊.四川農業(yè)大學 2016
[4]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重熒光RT-PCR檢測方法的建立[D]. 許夢怡.揚州大學 2016
[5]豬輪狀病毒的分離鑒定及其環(huán)介導等溫擴增反應檢測方法的建立[D]. 張賀偉.中國農業(yè)科學院 2015
[6]抗豬輪狀病毒單克隆抗體的制備及雙抗體夾心ELISA檢測方法的初步建立[D]. 孟柳.東北農業(yè)大學 2014
[7]豬輪狀病毒TaqMan熒光定量RT-PCR方法的建立及初步應用[D]. 吳奇英.華中農業(yè)大學 2013
[8]豬病毒性腹瀉多重RT-PCR診斷方法的建立和應用及豬輪狀病毒的分離[D]. 張坤.華中農業(yè)大學 2010
本文編號:3034469
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