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胸膜肺炎放線桿菌異源保護抗原肽篩選及ApxIV體外表達(dá)

發(fā)布時間:2021-02-10 02:49
  胸膜肺炎放線桿菌是引起豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌疾病的主要病原菌,該病是世界范圍內(nèi)流行并嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病。胸膜肺炎放線桿菌具有多個血清型,其致病力和免疫原性各不相同,主要血清型之間缺乏免疫交叉保護,影響了其疫苗的開發(fā)。我們先前的研究通過MALDI-ToF質(zhì)譜鑒定出了六個共同抗原蛋白,單鏈DNA結(jié)合蛋白(PA-Ssb)、噬菌體休克蛋白A(PA-PspA)、甘油醛-3磷酸脫氫酶(PA-GAPDH)、丙酮酸激酶(PA-Pk)、絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶(PA-Shmt)以及天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(PA-Ast)。以痤瘡丙酸桿菌參考菌株設(shè)計引物克隆并測序了以上六個蛋白,通過Genebank以及其他生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫對其進行了分析,并上傳至Genebank數(shù)據(jù)庫。構(gòu)建了六個抗原蛋白的原核表達(dá)載體pGEX-PA-Ssb、pGEX-PA-Pspa、pGEX-PA-GAPDH、pGEX-PA-Pk、pGEX-PA-Shmt和pGEX-PA-Ast,并表達(dá)純化出了六個抗原蛋白的GST融合蛋白。通過小鼠模型免疫并以胸膜肺炎放線桿菌血清1型和5a型感染,分別得到免疫保護率達(dá)到(對血清1型)20%(PA-GAPDH)至... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:175 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
內(nèi)容提要
中文摘要
Abstract
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 痤瘡丙酸桿菌的研究概況
        1.1 痤瘡丙酸桿菌的生物學(xué)特性
        1.2 痤瘡丙酸桿菌的致病性
        1.3 痤瘡丙酸桿菌的免疫調(diào)節(jié)作用
        1.4 痤瘡丙酸桿菌免疫調(diào)節(jié)作用的有效成分
        1.5 痤瘡丙酸桿菌免疫調(diào)節(jié)作用的應(yīng)用
        1.6 痤瘡丙酸桿菌免疫調(diào)節(jié)研究的新進展
        1.7 痤瘡丙酸桿菌應(yīng)用研究展望
    第2章 豬傳染性胸膜肺炎研究概況
        2.1 病原學(xué)
        2.2 流行病學(xué)
        2.3 臨床癥狀和病理變化
        2.4 診斷
        2.5 防治
        2.6 結(jié)語
    第3章 胸膜肺炎放線桿菌及其疫苗研究進展
        3.1 概述
        3.2 全菌滅活疫苗
        3.3 胸膜肺炎放線桿菌的毒力因子以及亞單位疫苗
        3.4 DIVA 技術(shù)對胸膜肺炎放線桿菌疫苗研發(fā)的影響
        3.5 胸膜肺炎放線桿菌疫苗接種程序與粘膜免疫
        3.6 幾種可用于篩選候選疫苗的全基因組關(guān)聯(lián)分析技術(shù)
        3.7 討論與展望
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 胸膜肺炎放線桿菌與痤瘡丙酸桿菌共同抗原免疫保護作用研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第2章 胸膜肺炎放線桿菌整合 Nanoluc 熒光素酶報告基因的檢測
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第3章 ApxIV 體外表達(dá)調(diào)控基因篩選
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
    第4章 ApxIV 的體外表達(dá)與調(diào)控
        4.1 材料與方法
        4.2 結(jié)果
        4.3 討論
        4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介
攻讀博士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]痤瘡丙酸桿菌對小鼠抗胸膜肺炎放線桿菌血清7型9型的免疫保護[J]. 李林溪,雷連成,高宇,何伯萍,韓文瑜.  河北科技師范學(xué)院學(xué)報. 2010(04)
[2]痤瘡丙酸桿菌對小鼠抗胸膜肺炎放線桿菌感染的研究[J]. 楊鵬,雷連成,謝芳,韓文瑜,王加啟.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2009(08)
[3]報告基因熒光素酶在科研中的應(yīng)用[J]. 杜彥艷,單保恩.  中華腫瘤防治雜志. 2009(09)
[4]四川省部分地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎的流行病學(xué)調(diào)查[J]. 樊祜卿,儲岳峰,賀英,高鵬程,趙萍,郭晗,馮小明,逯忠新,伏小平.  中國動物檢疫. 2009(05)
[5]短小棒狀桿菌CpG-DNA提取方法的研究[J]. 孫彬裕,高尚先.  藥物分析雜志. 2009(03)
[6]胸膜肺炎放線桿菌血清型特異的疫苗候選基因的篩選及痤瘡丙酸桿菌異源免疫[J]. 雷連成,韓文瑜,孫長江,楊鵬,馮新.  中國生物制品學(xué)雜志. 2008(10)
[7]新型免疫佐劑研究進展[J]. 周晨陽,劉海燕,楊發(fā)龍.  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2007(05)
[8]洛陽地區(qū)規(guī);i場傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查[J]. 王天奇,董發(fā)明,龍塔,楊自軍,董淑麗,王宏魁.  中國獸醫(yī)雜志. 2006(11)
[9]痤瘡丙酸桿菌在痤瘡發(fā)病中的作用[J]. 朱蓮花,金哲虎.  中國美容醫(yī)學(xué). 2006(04)
[10]痤瘡皮損內(nèi)菌群的分離與研究[J]. 白潔,顧威,王真子,隨靜,白穎,寧安紅.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2005(06)



本文編號:3026665

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