布魯氏菌�。˙rucellosis），簡稱布病，是布魯氏菌（Brucella）引起的人畜共患病，宿主范圍廣泛，牛、羊、豬易感。感染布病的人和家畜特征為生殖器官和胎膜發(fā)炎，引起流產、不育和各種組織的局部病灶。M5-90是馬耳他型布魯氏菌弱毒疫苗株，由親本M28強毒株經過吖啶橙處理菌體后，再通過雞胚成纖維細胞連續(xù)傳代弱化而來，免疫保護力好，生物特性穩(wěn)定，具有良好的安全性，在我國的布病防控中起到了重要的作用。有關M5-90疫苗株的具體分子致弱機制尚不清楚。前期研究表明，M5-90基因組在致弱過程中發(fā)生了31處插入-缺失（Indels）突變和125處單個核苷酸多態(tài)性（SNPs）突變，分布于35個編碼序列（CDS）中，其中包括發(fā)生移碼突變的B0107基因和A1103基因，分別負責編碼O抗原聚合酶（O-antigen polymerase）和奎寧tRNA核糖基轉移酶（Quinine tRNA-ribosyltransferase）。已有研究表明，O-antigen是眾多革蘭氏陰性致病菌的毒力因子之一，而奎寧tRNA核糖基轉移酶對革蘭氏陰性致病菌毒力的影響尚未系統(tǒng)研究。為探討B(tài)0107基因和A110... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數】：38 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 布魯氏菌概述
        1.1.1 布魯氏菌形態(tài)學
        1.1.2 布魯氏菌分類
        1.1.3 布魯氏菌流行病學
    1.2 布氏桿菌胞內生存機制
        1.2.1 布魯氏菌與專業(yè)巨噬細胞的相互作用
        1.2.2 布魯氏菌與非吞噬細胞的相互作用
        1.2.3 布魯氏菌能夠主動改變其胞內運輸途徑
    1.3 布魯氏菌毒力因子的研究進展
        1.3.1 LPS 的完整性及其合成相關基因
        1.3.2 Cu/Zn 超氧化物歧化酶（SOD）
        1.3.3 virB 系列毒力基因
        1.3.4 BvrR/BvrS 雙元系統(tǒng)
        1.3.5 環(huán)形β-1,2 葡聚糖
    1.4 布魯氏菌比較基因組學研究
    1.5 研究背景、目的及意義
第二章 M28 強毒株 B0107 基因和 A1103 基因缺失對菌株毒力的影響研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 菌株、實驗動物及細胞系
        2.1.2 質粒和主要器材及試劑
        2.1.3 引物設計及合成
        2.1.4 同源重組序列擴增及其鑒定
        2.1.5 含有外側基因同源重組質粒 pSP-B0107-k 和 pSP-A1103-k 的構建
        2.1.6 突變株構建、篩選及卡那霉素基因表達穩(wěn)定性的檢測
        2.1.7 生長特性檢測
        2.1.8 小鼠體內致病性試驗
        2.1.9 巨噬細胞感染實驗
    2.2 結果
        2.2.1 pSP-B0107-K 和 pSP-A1103-k 轉移載體的構建及鑒定
        2.2.2 突變菌株抗性篩選及 PCR 鑒定缺失
        2.2.3 生長特性檢測
        2.2.4 突變菌株小鼠體內毒力的測定
        2.2.5 巨噬細胞感染試驗
    2.3 討論
第三章 全文結論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介



本文編號：3026482