鴨源雞桿菌（Gallibacterium anatis,G.anatis）是家禽中常見(jiàn)的條件性致病菌,主要引起蛋雞生殖道疾病,造成產(chǎn)蛋量下降。【目的】為探究RTX樣毒素GtxA及外膜蛋白（OmpW）對(duì)鴨源雞桿菌生物學(xué)特性和致病力的影響�！痉椒ā勘狙芯坎捎米匀晦D(zhuǎn)化法對(duì)突變株RZ△ompW進(jìn)一步缺失gtxA構(gòu)建突變株RZ△ompW△gtxA,通過(guò)分析其生長(zhǎng)特性、黏附能力、引起細(xì)胞凋亡程度及對(duì)小鼠致病性等,探究其與生物學(xué)特性及致病性可能的關(guān)系�！窘Y(jié)果】結(jié)果顯示,RZ△ompW△gtxA能穩(wěn)定遺傳gtxA的缺失;單雙基因突變株溶血活性均消失、與RZ株相比菌落形態(tài)及生長(zhǎng)速率并未出現(xiàn)顯著改變;相比RZ、RZ△ompW和RZ△gtxA,雙基因缺失株RZ△ompW△gtxA在不同時(shí)段對(duì)雞原代輸卵管上皮細(xì)胞的黏附能力顯著降低（P<0.05）,誘導(dǎo)雞輸卵管上皮原代細(xì)胞發(fā)生凋亡的能力明顯減弱,對(duì)小鼠的致病力顯著降低。【結(jié)論】GtxA毒素和外膜蛋白OmpW在鴨源雞桿菌毒力、黏附宿主細(xì)胞及誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡中起重要作用,且可能存在明顯的協(xié)同關(guān)系。本研究為鴨源雞桿菌感染機(jī)制的闡明奠定基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：微生物學(xué)報(bào). 2020,60(10)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：12 頁(yè)

【部分圖文】：

質(zhì)粒p MD18T-U-K-D PCR及酶切鑒定

anatis RZΔomp WΔgtx A突變株P(guān)CR鑒定

鴨源雞桿菌RZ株和突變株RZΔomp W、RZΔgtx A、RZΔomp WΔgtx A經(jīng)37°C培養(yǎng)24 h后，均長(zhǎng)出半透明、灰白色、有完整邊緣、直徑1–2 mm的圓形菌落；3株缺失突變株菌落大小形態(tài)與原始親本株RZ無(wú)顯著變化，但RZΔgtx A、RZΔomp WΔgtx A溶血環(huán)均消失而RZΔomp W溶血環(huán)無(wú)明顯變化，表明gtx A的缺失改變了鴨源雞桿菌溶血活性，omp W和gtx A單獨(dú)或者同時(shí)缺失菌落形態(tài)及大小沒(méi)有顯著影響。在相同培養(yǎng)條件下培養(yǎng)鴨源雞桿菌RZ、RZΔomp W、RZΔgtx A和RZΔomp WΔgtx A，每隔1 h測(cè)定菌液OD600值并繪制細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(圖4)。結(jié)果顯示，4株菌生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)狀態(tài)相仿，雖生長(zhǎng)曲線顯示RZΔomp WΔgtx A與其他3株相比生長(zhǎng)速度稍緩慢，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值均大于0.05，差異不顯著)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鴨源雞桿菌gtxA突變株構(gòu)建及其生物特性分析[J]. 王繼洋,彭志鋒,劉盼盼,王坤芃,王川慶,陳陸,趙軍,楊霞.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2019(03)
[2]鴨源雞桿菌相關(guān)致病因子研究進(jìn)展[J]. 王繼洋,王艷,彭志鋒,楊霞.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(08)
[3]鴨源雞桿菌ompW基因缺失菌株的構(gòu)建及其藥物敏感性分析[J]. 彭志鋒,崔丹丹,楊霞,敬文憲,王忠田,王坤芃,王川慶.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(07)
[4]鴨源雞桿菌外膜蛋白W基因克隆及結(jié)構(gòu)與功能分析[J]. 敬文憲,彭志鋒,王新衛(wèi),常洪濤,劉紅英,王川慶,盧彩景,楊霞.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(01)
[5]鴨源雞桿菌對(duì)雞原代輸卵管上皮細(xì)胞作用[J]. 張秀平,盧彩景,陳陸,李永濤,劉紅英,彭志鋒,敬文憲,楊霞,王川慶.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2016(02)
[6]我國(guó)鴨源雞桿菌的研究進(jìn)展[J]. 彭志鋒,楊霞,鄭鹿平,王川慶.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(12)
[7]雞原代輸卵管上皮細(xì)胞體外分離培養(yǎng)與鑒定[J]. 張秀平,陳陸,劉紅英,王川慶,姚惠霞,楊霞.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(06)
[8]鴨源雞桿菌對(duì)HeLa細(xì)胞的黏附和侵襲特性[J]. 張秀平,陳陸,趙軍,王川慶,李永濤,劉紅英,彭志鋒,盧彩景,敬文憲,楊霞.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(02)
[9]鴨源雞桿菌毒素蛋白GtxA表達(dá)和間接ELISA方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 李歡,楊霞,趙軍,魏亞鵬,陳陸,王新衛(wèi),常洪濤,李永濤,劉紅英,王川慶.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(01)
[10]胸膜肺炎放線桿菌RTX毒素與宿主的相互作用[J]. 范盛先,劉輝,陳楊,陳煥春,何啟蓋.  微生物學(xué)報(bào). 2009(02)

碩士論文
[1]鴨源雞桿菌中國(guó)株gtxA單基因、gtxA/flfA雙基因缺失株的構(gòu)建及相關(guān)特性分析[D]. 王繼洋.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]鴨源雞桿菌中國(guó)株外膜蛋白W基因鑒定及其敲除株的構(gòu)建[D]. 敬文憲.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]鴨源雞桿菌的生物被膜形成能力及對(duì)雞原代輸卵管上皮細(xì)胞作用的初步研究[D]. 張秀平.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]鴨源雞桿菌流行株毒素蛋白GtxA表達(dá)及其部分生物學(xué)特性的研究[D]. 李歡.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[5]鐵離子調(diào)節(jié)革蘭氏陰性菌外膜蛋白OmpW抗宿主氧化應(yīng)激作用及機(jī)制的研究[D]. 鄒海杰.浙江理工大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3025659