在我國(guó)新發(fā)的以蛋鴨產(chǎn)蛋下降為主要特征的鴨坦布蘇病毒病,給我國(guó)養(yǎng)鴨產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。引起該病的病原為鴨坦布蘇病毒（Duck Tembusu Virus, DTMUV）,該病毒屬于黃病毒科（Flaviviridae）,黃病毒屬（flavivirus）。目前,對(duì)鴨坦布蘇病毒的致病機(jī)制尚不明確,同時(shí)也缺乏有效的疫苗和抗病毒措施來(lái)預(yù)防和控制該病。E蛋白是黃病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白,在病毒吸附、與宿主細(xì)胞膜融合、細(xì)胞嗜性、病毒毒力以及病毒組裝過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。同時(shí),E蛋白含有多種抗原表位,可誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體,是黃病毒的主要保護(hù)性抗原。本研究對(duì)鴨坦布蘇病毒E蛋白的DomainⅢ抗原性、及其線性抗原表位進(jìn)行研究,為鴨坦布蘇病毒疫苗研制奠定良好基礎(chǔ)。利用針對(duì)E蛋白的具有中和活性的單克隆抗體,建立了一種熒光微量中和試驗(yàn)。首先將血清與病毒作用后,接種96孔板上長(zhǎng)成單層DF-1細(xì)胞,24小時(shí)后,使用間接免疫熒光法檢測(cè)病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖情況,從而確定血清的中和效價(jià)。建立的熒光微量中和試驗(yàn)方法具有良好的特異性。與雞胚中和試驗(yàn)方法相比,該方法穩(wěn)定性高、敏感性強(qiáng)、重復(fù)性好、通量高、操作簡(jiǎn)便和節(jié)省時(shí)間。該方法比細(xì)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖I鴨坦布蘇病毒基因組結(jié)構(gòu)

Fig 1 The Genome structure of the DTMUV能有一個(gè)開(kāi)放閱讀框，只編碼一個(gè)多聚蛋白，而目前已知的黃白在蛋白酶的作用下，剪切加工成衣殼C蛋白、prM蛋白和構(gòu)蛋白。隨后，病毒在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上組裝成未成熟的病毒粒子。中被宿主細(xì)胞蛋白酶切，以胞吐的方式釋放成熟病毒粒子（

圖5 SDS-PAGE分析重組蛋白Fig 5 SDS-PAGE analysis of recombinant pr標(biāo)準(zhǔn)；1:在大腸桿菌中表達(dá)的EDIII上清樣 standards; 1: The supernatant samples of EDIThe purified recombinant protein.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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