肌肉糖酵解對(duì)北京黑豬肉質(zhì)性狀的影響及其差異蛋白研究
發(fā)布時(shí)間：2021-01-30 21:42
本試驗(yàn)通過(guò)研究宰后肌肉糖酵解酶活性及其產(chǎn)物含量,了解代謝差異性對(duì)肉質(zhì)性狀的影響,并通過(guò)蛋白組學(xué)的方法揭示影響肉質(zhì)性狀的分子機(jī)制。采集北京黑豬（210日齡）胴體背最長(zhǎng)肌,測(cè)定肉樣在宰后24 h的pH、肉色L*值以及72 h滴水損失（Drip loss,DL）值,并檢測(cè)宰后6 h及24 h PK（丙酮酸激酶）、LDH（乳酸脫氫酶）的活性,以及PA（丙酮酸）、LA（乳酸）的含量。對(duì)肉質(zhì)性狀及糖酵解指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析,以揭示宰后豬肌肉糖酵解對(duì)肉質(zhì)性狀的影響。利用TMT蛋白組定量技術(shù)對(duì)豬背最長(zhǎng)肌2組樣品（G組:高pH值、低肉色L*值、低DL值;B組:低pH值、高肉色L*值、高DL值）,每組4個(gè)個(gè)體進(jìn)行差異蛋白篩選和鑒定,分析這些蛋白功能與肉質(zhì)代謝之間的關(guān)系,以期揭示影響肉質(zhì)代謝性狀的分子機(jī)理。試驗(yàn)結(jié)果如下所示:1.（1）宰后24 h pH均值為5.937、24 h L*均值為50.612、72 h DL均值為1.412;pH值同L*及DL值均呈極顯著的負(fù)相關(guān)（P<0.01）,L*及DL值呈極顯著的正相關(guān)（P<0.01）。（2）24 h的PK及LDH活性極顯著的低于6 h的活性（P&l...
【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
G和B組間不同個(gè)體組織切片HE染色對(duì)比圖
圖 3.2 G 和 B 組間差異肉樣肌纖維各項(xiàng)指標(biāo)差異分析Figure 3.2 analysis of the differences between G and B groups in various indexes of flesh fibe注：p < 0.01（**）為差異極顯著；p < 0.05（*）為差異顯著；p > 0.05 為差異不顯著Note: P < 0.01 (**) was extremely significantly different.P < 0.05 (*) was significantly different.The difference was not significant (P>0.05)3.3.2 差異肉樣總蛋白濃度檢測(cè)結(jié)果通過(guò)蛋白 Bradford 定量法對(duì)樣品蛋白濃度進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)蛋白在 540 nm 吸光度值繪制蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品檢測(cè)到的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的公式，計(jì)算得出樣品的蛋白質(zhì)濃度。各樣品蛋白質(zhì)的總量均在 600 ug，蛋白濃度符合試驗(yàn)要求。蛋白樣品的濃度。3.3.3 SDS-PAGE 電泳檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的完整性通過(guò) SDS-PAGE 檢測(cè)，結(jié)果顯示（圖 3.3），結(jié)果顯示各個(gè)泳道條帶清晰可見(jiàn)，蛋白數(shù)量眾多，無(wú)拖帶和降解的現(xiàn)象，無(wú)論橫向還是縱向條帶脫色均勻，無(wú)混雜，證明本實(shí)驗(yàn)樣品符合 TMT 實(shí)驗(yàn)要求。
圖 3.3 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝膠）電泳檢測(cè)結(jié)果Figue 3.3 SDS-PAGE（polyacrylamide gel）electrophoresis test results分析酶切的效果評(píng)估結(jié)果酶酶切特異性評(píng)估結(jié)果 胰蛋白酶酶切特異性評(píng)估的結(jié)果可知，完全特異性酶切的肽段所占比切的肽段所占比例為 5.45%，N-端酶切的肽段所占比例為 2.61%，完 0.06%。特異性肽段數(shù)目越多，對(duì)應(yīng)的蛋白的可信度越高。本試驗(yàn)特合進(jìn)行下一步處理。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]市售壹號(hào)土豬肉理化品質(zhì)及其熟制品感官特性分析[J]. 李享,李瑞麗,劉文營(yíng),成曉瑜,賈曉云,王樂(lè),楊凱. 食品研究與開(kāi)發(fā). 2019(01)
[2]miR-1和miR-369在中外豬種背最長(zhǎng)肌中的表達(dá)與肉質(zhì)性狀的關(guān)系研究[J]. 楊雪梅,顧以韌,梁艷,陶璇,楊躍奎,曾凱,陳曉暉,鐘志君,呂學(xué)斌. 養(yǎng)豬. 2018(01)
[3]槐豬FTO基因遺傳多態(tài)性及其與肉質(zhì)性狀相關(guān)性研究[J]. 許衛(wèi)華,趙殿強(qiáng),黃芬,李虹儀,張茂,孫艷發(fā). 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(01)
[4]屠宰前血糖值與豬肉風(fēng)味等品質(zhì)的相關(guān)性分析[J]. 李亮,樊福好,許華釗. 養(yǎng)豬. 2017(04)
[5]影響豬肉質(zhì)性狀相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 宋志芳,解幼志,刑荷巖,蘆春蓮,曹洪戰(zhàn). 中國(guó)豬業(yè). 2017(07)
[6]高壓結(jié)合熱處理對(duì)豬肉風(fēng)味的影響[J]. 黃業(yè)傳,李婷婷,龔道楷,李鳳. 食品科學(xué). 2018(02)
[7]飼糧能氮水平對(duì)不同品種豬肉質(zhì)性狀及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 劉瑩瑩,李鳳娜,李穎慧,印遇龍,孔祥峰. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2017(02)
[8]N-糖肽的規(guī)�；|(zhì)譜解析方法進(jìn)展[J]. 曾文鋒,張揚(yáng),劉銘琪,吳建強(qiáng),張曉今,楊皓,劉超,遲浩,張昆,孫瑞祥,楊芃原,賀思敏. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2016(06)
[9]A gene expression estimator of intramuscular fat percentage for use in both cattle and sheep[J]. Bing Guo,Kritaya Kongsuwan,Paul L Greenwood,Guanghong Zhou,Wangang Zhang,Brian P Dalrymple. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(04)
[10]皮下脂肪和肌內(nèi)脂肪對(duì)豬肉風(fēng)味的作用[J]. 黃業(yè)傳,賀稚非,李洪軍,秦剛,王庭,馬明輝. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(10)
碩士論文
[1]生鮮豬肉品質(zhì)變化的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 黃曉毅.浙江工商大學(xué) 2010
[2]氟烷基因型對(duì)豬背最長(zhǎng)肌MyHC表達(dá)和能量代謝的影響以及與肉質(zhì)的關(guān)系[D]. 單斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào)：3009636
【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
G和B組間不同個(gè)體組織切片HE染色對(duì)比圖
圖 3.2 G 和 B 組間差異肉樣肌纖維各項(xiàng)指標(biāo)差異分析Figure 3.2 analysis of the differences between G and B groups in various indexes of flesh fibe注：p < 0.01（**）為差異極顯著；p < 0.05（*）為差異顯著；p > 0.05 為差異不顯著Note: P < 0.01 (**) was extremely significantly different.P < 0.05 (*) was significantly different.The difference was not significant (P>0.05)3.3.2 差異肉樣總蛋白濃度檢測(cè)結(jié)果通過(guò)蛋白 Bradford 定量法對(duì)樣品蛋白濃度進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)蛋白在 540 nm 吸光度值繪制蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品檢測(cè)到的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的公式，計(jì)算得出樣品的蛋白質(zhì)濃度。各樣品蛋白質(zhì)的總量均在 600 ug，蛋白濃度符合試驗(yàn)要求。蛋白樣品的濃度。3.3.3 SDS-PAGE 電泳檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的完整性通過(guò) SDS-PAGE 檢測(cè)，結(jié)果顯示（圖 3.3），結(jié)果顯示各個(gè)泳道條帶清晰可見(jiàn)，蛋白數(shù)量眾多，無(wú)拖帶和降解的現(xiàn)象，無(wú)論橫向還是縱向條帶脫色均勻，無(wú)混雜，證明本實(shí)驗(yàn)樣品符合 TMT 實(shí)驗(yàn)要求。
圖 3.3 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝膠）電泳檢測(cè)結(jié)果Figue 3.3 SDS-PAGE（polyacrylamide gel）electrophoresis test results分析酶切的效果評(píng)估結(jié)果酶酶切特異性評(píng)估結(jié)果 胰蛋白酶酶切特異性評(píng)估的結(jié)果可知，完全特異性酶切的肽段所占比切的肽段所占比例為 5.45%，N-端酶切的肽段所占比例為 2.61%，完 0.06%。特異性肽段數(shù)目越多，對(duì)應(yīng)的蛋白的可信度越高。本試驗(yàn)特合進(jìn)行下一步處理。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]市售壹號(hào)土豬肉理化品質(zhì)及其熟制品感官特性分析[J]. 李享,李瑞麗,劉文營(yíng),成曉瑜,賈曉云,王樂(lè),楊凱. 食品研究與開(kāi)發(fā). 2019(01)
[2]miR-1和miR-369在中外豬種背最長(zhǎng)肌中的表達(dá)與肉質(zhì)性狀的關(guān)系研究[J]. 楊雪梅,顧以韌,梁艷,陶璇,楊躍奎,曾凱,陳曉暉,鐘志君,呂學(xué)斌. 養(yǎng)豬. 2018(01)
[3]槐豬FTO基因遺傳多態(tài)性及其與肉質(zhì)性狀相關(guān)性研究[J]. 許衛(wèi)華,趙殿強(qiáng),黃芬,李虹儀,張茂,孫艷發(fā). 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(01)
[4]屠宰前血糖值與豬肉風(fēng)味等品質(zhì)的相關(guān)性分析[J]. 李亮,樊福好,許華釗. 養(yǎng)豬. 2017(04)
[5]影響豬肉質(zhì)性狀相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 宋志芳,解幼志,刑荷巖,蘆春蓮,曹洪戰(zhàn). 中國(guó)豬業(yè). 2017(07)
[6]高壓結(jié)合熱處理對(duì)豬肉風(fēng)味的影響[J]. 黃業(yè)傳,李婷婷,龔道楷,李鳳. 食品科學(xué). 2018(02)
[7]飼糧能氮水平對(duì)不同品種豬肉質(zhì)性狀及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 劉瑩瑩,李鳳娜,李穎慧,印遇龍,孔祥峰. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2017(02)
[8]N-糖肽的規(guī)�；|(zhì)譜解析方法進(jìn)展[J]. 曾文鋒,張揚(yáng),劉銘琪,吳建強(qiáng),張曉今,楊皓,劉超,遲浩,張昆,孫瑞祥,楊芃原,賀思敏. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2016(06)
[9]A gene expression estimator of intramuscular fat percentage for use in both cattle and sheep[J]. Bing Guo,Kritaya Kongsuwan,Paul L Greenwood,Guanghong Zhou,Wangang Zhang,Brian P Dalrymple. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(04)
[10]皮下脂肪和肌內(nèi)脂肪對(duì)豬肉風(fēng)味的作用[J]. 黃業(yè)傳,賀稚非,李洪軍,秦剛,王庭,馬明輝. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(10)
碩士論文
[1]生鮮豬肉品質(zhì)變化的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 黃曉毅.浙江工商大學(xué) 2010
[2]氟烷基因型對(duì)豬背最長(zhǎng)肌MyHC表達(dá)和能量代謝的影響以及與肉質(zhì)的關(guān)系[D]. 單斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào)：3009636
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