C/EBPα即CCAAT/增強子結(jié)合蛋白α基因,其編碼的CCAAT/增強子結(jié)合蛋白是重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,在細胞的分化和代謝過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。試驗利用RNAi來敲低雞LMH細胞系中C/EBPα基因的表達,以研究C/EBPα基因影響脂肪代謝的機制。根據(jù)雞C/EBPα基因的mRNA序列,設計3對siRNA,用RNAi干擾技術來敲低雞LMH細胞中的C/EBPα基因表達,然后用熒光定量PCR檢測C/EBPα基因的表達情況,發(fā)現(xiàn)其中的C/EBPα-siRNA-161能夠顯著降低C/EBPα基因的表達;并將C/EBPα-siRNA-161轉(zhuǎn)染LHM細胞后48 h后,利用熒光定量PCR檢測LMH細胞中糖脂代謝相關基因（PCK1、SCD、GLUT2、PPARγ、INS、G6PC、IGF1、IGF2、INSR、STAT3）的表達,發(fā)現(xiàn)在LMH細胞中PCK1、G6PC、GLUT2基因的mRNA表達量下降,結(jié)果表明C/EBPα基因能影響糖代謝相關基因G6PC、GLUT2、甘油異生相關基因PCK1的表達,證實了C/EBPα基因?qū)﹄u肝細胞中的糖脂代謝具有調(diào)控作用,通過調(diào)控C/EBPα基因的表達將影響糖吸... 

【文章來源】：中國家禽. 2020,42(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

siC/EBPα-161干擾雞C/EBPα基因?qū)μ侵x相關基因表達的影響

根據(jù)C/EBPα序列設計四對雙鏈siRNA，分別為位于161位（siC/EBPα-161）、383位（siC/EBPα-383）和941位（siC/EBPα-941），以及陰性對照（siC/EBPα-NC）為Scramble siRNA。siC/EBPα-161、siC/EBPα-383、siC/EBPα-941和si-NC分別轉(zhuǎn)染LMH細胞，48 h后分別提取細胞總RNA。以β-actin做內(nèi)參，檢測C/EBPα的mRNA表達，結(jié)果見圖1。轉(zhuǎn)染siC/EBPα-161和siC/EBPα-941后，LMH細胞中C/EBPαmRNA表達量下降，其中轉(zhuǎn)染siC/EBPα-161后C/EBPαmRNA表達量顯著下降（P<0.01），而轉(zhuǎn)染siC/EBPα-383后，未使C/EBPαmRNA表達量下降。三種C/EBPαsiRNA中siC/EBPα-161的干擾表達效果最好。本試驗后期用siC/EBPα-161對LMH細胞中敲低C/EBPα，研究該基因?qū)μ侵x所產(chǎn)生的影響。2.2 雞的LMH肝細胞中C/EBPα基因干擾后對糖脂代謝相關基因表達的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]RNAi作用機制及應用研究進展[J]. 馮小艷,張樹珍.  生物技術通報. 2017(05)
[2]RNAi機制及在植物中應用的研究概述[J]. 崔喜艷,孫小杰,劉忠野,張繼偉.  吉林農(nóng)業(yè)大學學報. 2013(02)
[3]糖尿病腎病遺傳學研究進展[J]. 李俊燕,譚英姿,馮國鄞,賀林,周里鋼,陸灝.  遺傳. 2012(12)



本文編號：3003313