狂犬病病毒主要結(jié)構(gòu)蛋白單克隆抗體的制備及血清抗體檢測方法的建立
發(fā)布時(shí)間:2021-01-26 07:24
狂犬病(Rabies)是一種由狂犬病病毒(Rabies rivus,RV)引起的急性人獸共患傳染病,一旦發(fā)病,死亡率幾乎為100%。我國是狂犬病的高發(fā)區(qū),隨著我國寵物犬、貓數(shù)量的增加,狂犬病的防控面臨更加嚴(yán)峻的形勢。因此,急需建立一種能夠用于快速檢測動物狂犬病病毒血清抗體水平的方法,對接種狂犬病疫苗動物的免疫接種效果進(jìn)行評估,以消除免疫不確實(shí)動物帶來的潛在威脅。本研究首先以狂犬病病毒作為免疫原,免疫BALB/c小鼠,取小鼠的脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞(SP2/0)融合。以RV作為包被抗原建立的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)作為篩選方法,經(jīng)過三輪亞克隆后篩選得到1G10、3F7、3F8、5C8、5A11、6B10等六株陽性雜交瘤細(xì)胞。然后以原核表達(dá)的重組RV結(jié)構(gòu)蛋白作為抗原,分別以間接ELISA和蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot)進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)其中3F8株針對基質(zhì)蛋白(M),6B10針對糖蛋白(G),其余四株針對核蛋白(N)。亞類鑒定結(jié)果表明,其中1G10為IgG2a亞型,3F7和3F8為IgG1亞型,5C8、5A11和6B10為IgG2b。間接免疫熒光試驗(yàn)表明,6B10能夠與...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
008年全球狂犬病風(fēng)險(xiǎn)分布圖(引自WHO網(wǎng)站)
3圖 1.4 2011 年全國各地區(qū)人間狂犬病病例數(shù)(例)(引自中國 CDC 網(wǎng)站)Fig 1.4 The human rabies cases of every province in 2011 in China(website of CDC)近 5 年來,狂犬病累計(jì)死亡人數(shù)位居全國前 5 位的。▍^(qū))分別為廣西壯族自治區(qū)、貴州省、廣東省、湖南省和四川省,合計(jì)報(bào)告病例數(shù)占全國同期病例報(bào)告總數(shù)的 60.85%。而且狂犬病的疫情波及范圍不斷擴(kuò)大,1996 年我國僅有 21 個(gè)。▍^(qū)、市)98 個(gè)縣區(qū)報(bào)告有狂犬病疫情。到 2007
012年中國狂犬病疫情縣區(qū)分布
本文編號:3000714
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
008年全球狂犬病風(fēng)險(xiǎn)分布圖(引自WHO網(wǎng)站)
3圖 1.4 2011 年全國各地區(qū)人間狂犬病病例數(shù)(例)(引自中國 CDC 網(wǎng)站)Fig 1.4 The human rabies cases of every province in 2011 in China(website of CDC)近 5 年來,狂犬病累計(jì)死亡人數(shù)位居全國前 5 位的。▍^(qū))分別為廣西壯族自治區(qū)、貴州省、廣東省、湖南省和四川省,合計(jì)報(bào)告病例數(shù)占全國同期病例報(bào)告總數(shù)的 60.85%。而且狂犬病的疫情波及范圍不斷擴(kuò)大,1996 年我國僅有 21 個(gè)。▍^(qū)、市)98 個(gè)縣區(qū)報(bào)告有狂犬病疫情。到 2007
012年中國狂犬病疫情縣區(qū)分布
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