作為一種抗菌促生長(zhǎng)劑,喹賽多有很大的潛力被添加到飼料中用于促進(jìn)畜禽類(lèi)動(dòng)物的生長(zhǎng),但要成為飼料添加劑必須通過(guò)全面嚴(yán)格的食品安全評(píng)估。迄今為止,關(guān)于喹賽多毒作用性質(zhì)的傳統(tǒng)毒理學(xué)研究相對(duì)較多,但是喹賽多對(duì)機(jī)體內(nèi)源性代謝的影響還沒(méi)有相關(guān)的報(bào)道。因此,本論文用基于核磁共振波譜的代謝組學(xué)方法研究了喹賽多對(duì)Kunming小鼠內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的影響；為了進(jìn)一步研究喹賽多對(duì)機(jī)體內(nèi)源性代謝物影響的種屬差異,我們又設(shè)計(jì)了喹賽多對(duì)Wistar大鼠的急性毒理實(shí)驗(yàn)；在這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,為了再進(jìn)一步探討長(zhǎng)期喹賽多暴露對(duì)機(jī)體內(nèi)源性代謝的影響,我們還設(shè)計(jì)了喹賽多對(duì)Wistar大鼠的亞慢性毒理實(shí)驗(yàn)。在亞慢性毒理實(shí)驗(yàn)中,除了傳統(tǒng)的代謝組學(xué)方法,我們還采用了大鼠肝臟表達(dá)譜全基因組測(cè)序以及熒光定量PCR檢測(cè)的方法,研究了長(zhǎng)期的喹賽多暴露對(duì)大鼠肝臟的轉(zhuǎn)錄組的影響。喹賽多對(duì)Kunming小鼠的急性毒理實(shí)驗(yàn)一共設(shè)計(jì)了三個(gè)劑量組（100,650,4000mg/kg body weight）和一個(gè)對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)采取的是一次性灌胃給藥的方式,研究了給藥后小鼠尿樣、血樣、肝臟以及腎臟中代謝物水平的變化。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,代謝物的變化具有劑量依賴... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院武漢物理與數(shù)學(xué)研究所)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：170 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
目錄
1 引言
    1.1 研究背景與目的
    1.2 代謝組學(xué)簡(jiǎn)介
        1.2.1 代謝組學(xué)的定義
        1.2.2 代謝組學(xué)研究方法與特點(diǎn)
        1.2.3 基于NMR的代謝組學(xué)研究流程
    1.3 核磁共振（NMR）簡(jiǎn)介
        1.3.1 核磁共振（NMR）的基本原理
        1.3.2 化學(xué)位移
1和T₂">        1.3.3 弛豫時(shí)間T₁和T2

        1.3.4 耦合常數(shù)
        1.3.5 代謝組學(xué)中常用的一維核磁譜和二維核磁譜
            1.3.5.1 一維Noesyprld譜或Noesygpprld譜
            1.3.5.2 一維CPMG譜
            1.3.5.3 一維擴(kuò)散加權(quán)Led譜
1H-¹H JRES">            1.3.5.4 二維J分解譜¹H-¹H JRES
1H-¹H COSY">            1.3.5.5 二維同核化學(xué)位移相關(guān)譜¹H-¹H COSY
1H-¹H TOCSY">            1.3.5.6 二維¹H-¹H TOCSY
1H-¹³C HSQC譜">            1.3.5.7 二維¹H-¹³C HSQC譜
1H-¹³C HMBC">            1.3.5.8 二維異核多鍵相關(guān)譜¹H-¹³C HMBC
        1.3.6 核磁譜中代謝物的歸屬
    1.4 代謝組學(xué)的數(shù)據(jù)分析方法
        1.4.1 數(shù)據(jù)預(yù)處理
        1.4.2 多元統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析
        1.4.3 1D-STOCSY和2D-STOCSY
    1.5 代謝組學(xué)的應(yīng)用
        1.5.1 代謝組學(xué)在藥物毒理研究領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.5.2 代謝組學(xué)在疾病診斷領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.5.3 代謝組學(xué)在植物藥以及中醫(yī)領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.5.4 代謝組學(xué)在基因功能研究領(lǐng)域的應(yīng)用
    1.6 轉(zhuǎn)錄組學(xué)簡(jiǎn)述
2 喹賽多在Kunming小鼠體內(nèi)急性毒理的代謝組學(xué)研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試劑
        2.1.2 動(dòng)物試驗(yàn)
        2.1.3 臨床血生化檢測(cè)
        2.1.4 組織病理切片
        2.1.5 肝臟與腎臟組織的提取
        2.1.6 NMR樣品的制備與數(shù)據(jù)采集
            2.1.6.1 NMR樣品的制備
            2.1.6.2 樣品的數(shù)據(jù)采集
        2.1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 血生化檢測(cè)結(jié)果
        2.2.2 組織病理檢測(cè)結(jié)果
        2.2.3 尿樣、肝臟以及腎臟代謝物的歸屬
        2.2.4 多元統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)模型驗(yàn)證
        2.2.5 尿樣中代謝物質(zhì)的變化
        2.2.6 肝臟和腎臟中代謝物質(zhì)的變化
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
3 喹賽多在Wistar大鼠體內(nèi)的急性毒理的代謝組學(xué)研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.1.1 試劑
        3.1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        3.1.3 臨床血生化檢測(cè)
        3.1.4 組織病理切片
        3.1.5 肝臟與腎臟的組織提取
        3.1.6 樣品的預(yù)處理與NMR檢測(cè)
            3.1.6.1 NMR樣品的制備
            3.1.6.2 樣品的數(shù)據(jù)采集
        3.1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 血生化檢測(cè)結(jié)果
        3.2.2 組織病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果
        3.2.3 大鼠尿樣、血樣和肝臟代謝物的歸屬
        3.2.4 多元統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)模型驗(yàn)證
        3.2.5 尿樣中代謝物質(zhì)的變化
        3.2.6 肝臟和血漿中代謝物質(zhì)的變化
    3.3 討論
        3.3.1 由藥物代謝所引發(fā)的Wistar大鼠內(nèi)源性代謝組的紊亂
        3.3.2 能量代謝的紊亂
        3.3.3 腸道菌群生命活動(dòng)所受到的抑制
    3.4 結(jié)論
4 喹賽多在Wistar大鼠體內(nèi)亞慢性毒理的代謝組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.1.1 試劑
        4.1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        4.1.3 臨床血生化檢測(cè)
        4.1.4 組織病理切片
        4.1.5 肝臟與腎臟的組織提取
        4.1.6 樣品的預(yù)處理與NMR檢測(cè)
            4.1.6.1 NMR樣品的制備
            4.1.6.2 樣品的數(shù)據(jù)采集
        4.1.7 數(shù)據(jù)分析
        4.1.8 表達(dá)譜全基因組測(cè)序
            4.1.8.1 樣本
            4.1.8.2 RNA提取與微陣列檢測(cè)
            4.1.8.3 數(shù)據(jù)分析
        4.1.9 qRT-PCR檢測(cè)
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物體重以及進(jìn)食量的變化
        4.2.2 血生化檢測(cè)結(jié)果
        4.2.3 組織病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果
        4.2.4 大鼠尿樣、血樣、肝臟以及腎臟代謝物的歸屬
        4.2.5 多元統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)模型驗(yàn)證
        4.2.6 尿樣中代謝物的變化
        4.2.7 肝臟代謝物的變化
        4.2.8 血樣代謝物的變化
        4.2.9 腎臟代謝物的變化
        4.2.10 表達(dá)譜全基因組測(cè)序與qRT-PCR結(jié)果
            4.2.10.1 表達(dá)譜全基因組測(cè)序聚類(lèi)分析
            4.2.10.2 表達(dá)譜基因變化
            4.2.10.3 qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果
            4.2.10.4 與發(fā)生顯著變化基因有關(guān)的通路與網(wǎng)絡(luò)
    4.3 討論
        4.3.1 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致的機(jī)體脂類(lèi)代謝的紊亂
        4.3.2 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致機(jī)體的糖酵解和三羧酸循環(huán)的紊亂
        4.3.3 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致機(jī)體的氨基酸代謝的紊亂
        4.3.4 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致機(jī)體的核苷酸代謝的紊亂
        4.3.5 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致機(jī)體肝臟的炎性反應(yīng)
        4.3.6 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)的病變
        4.3.7 長(zhǎng)期的喹賽多暴露所導(dǎo)致機(jī)體腸道菌群的變化
    4.4 結(jié)論
5 總結(jié)與展望
    5.1 Kunming小鼠和Wistar大鼠對(duì)喹賽多急性暴露反應(yīng)的異同
    5.2 Wistar大鼠對(duì)喹賽多亞慢性暴露的反應(yīng)以及其分子生物學(xué)機(jī)制
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]喹賽多的皮膚光敏毒性和長(zhǎng)期毒性研究[D]. 何慶華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào)：2995777

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