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豆?fàn)钅椅豺实腞S1基因原核表達(dá)和感染家兔驅(qū)蟲后肌肉營養(yǎng)素含量與驅(qū)蟲藥殘留量的分析

發(fā)布時(shí)間:2021-01-19 23:28
  豆?fàn)钅椅豺什∈怯啥範(fàn)钅椅豺室鸬囊环N在世界各地均有分布的寄生蟲病。對(duì)于不同性別、年齡、品種的兔,豆?fàn)钅椅豺示赘?尤其對(duì)家兔最易感,造成的危害最嚴(yán)重。豆?fàn)钅椅豺什〔粌H對(duì)家兔的生長發(fā)育起到抑制作用,而且感染嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)䦟?dǎo)致家兔死亡。因此,給畜牧業(yè)發(fā)展和人體健康帶來嚴(yán)重危害。目前,針對(duì)豆?fàn)钅椅豺什〉难芯?相關(guān)報(bào)道甚少。本試驗(yàn)選取豆?fàn)钅椅豺蕿檠芯繉?duì)象,并提取其RNA作為模板,根據(jù)已發(fā)表的豬帶絳蟲RS1 cDNA序列設(shè)計(jì)引物,利用RT-PCR技術(shù)首次成功獲取到TpRS1基因序列,并預(yù)測(cè)分析TpRS1基因編碼蛋白的理化性質(zhì)、抗原位點(diǎn)、二級(jí)結(jié)構(gòu)等多方面。用EcoRⅠ和XhoⅠ酶切后,構(gòu)建原核表達(dá)載體,獲得的重組蛋白pGEX-TpRS1經(jīng)SDS-PAGE進(jìn)行分析。結(jié)果表明,兔豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1基因序列長為275bp,其完整開放閱讀框由258個(gè)核苷酸組成,并可編碼85個(gè)氨基酸。TpRS1編碼分子質(zhì)量約為9.6ku的蛋白,理論等電點(diǎn)為9.07。α螺旋在TpRS1二級(jí)結(jié)構(gòu)中所占比例最高,為70.59%。經(jīng)Clustal X軟件分析,其他帶科絳蟲與TpRS1的氨基酸序列有72%以上的同源性,與泡狀帶絳蟲屬... 

【文章來源】:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Summary
主要縮略詞英漢對(duì)照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 帶科絳蟲種屬抗原
        1.1 45W抗原
        1.2 16ku和 18ku
        1.3 CP
        1.4 RS1基因
    2 兔肉品質(zhì)的研究進(jìn)展
        2.1 兔肉的營養(yǎng)成分
        2.2 兔肉品質(zhì)的影響因素
    3 獸藥在肉中的殘留
第二章 豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1基因克隆、生物信息學(xué)分析及原核表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 質(zhì)粒、菌株及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器設(shè)備
        1.4 豆?fàn)钅椅豺士俁NA的提取
        1.5 兔豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1基因的克隆
        1.6 豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1基因的ORF序列和氨基酸序列分析
        1.7 豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1生物信息學(xué)分析
        1.8 同源性比較及系統(tǒng)進(jìn)化分析
        1.9 重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-TpRS1的構(gòu)建
        1.10重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
    2 結(jié)果
        2.1 兔豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1基因的克隆
        2.2 TpRS1基因的ORF序列分析
        2.3 豆?fàn)钅椅豺蔜pRS1基因的生物信息學(xué)分析
        2.4 重組質(zhì)粒pGEX-TpRS1的酶切鑒定
        2.5 重組蛋白的表達(dá)
    3 討論
第三章 驅(qū)蟲藥對(duì)人工感染豆?fàn)钅椅豺始彝眉∪庵饕獱I養(yǎng)素含量的影響
    1 材料與方法
        1.1 蟲種來源
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 主要儀器
        1.4 主要試劑
        1.5 試驗(yàn)藥物
        1.6 人工感染
        1.7 驅(qū)蟲試驗(yàn)
        1.8 兔肌肉營養(yǎng)素含量的測(cè)定
        1.9 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果
        2.1 驅(qū)蟲后水分含量的變化分析
        2.2 驅(qū)蟲后灰分含量的變化分析
        2.3 驅(qū)蟲后蛋白質(zhì)含量的比較分析
        2.4 驅(qū)蟲后脂肪含量的比較分析
    3 討論
第四章 家兔體內(nèi)伊維菌素的藥物殘留量的檢測(cè)
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
        1.5 色譜分析條件
        1.6 樣品處理
        1.7 伊維菌素標(biāo)準(zhǔn)品的線性關(guān)系
        1.8 加標(biāo)回收試驗(yàn)
        1.9 樣品含量測(cè)定
    2 結(jié)果
        2.1 線性回歸方程
        2.2 方法的回收率
        2.3 樣品含量測(cè)定
    3 討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]豆?fàn)顜Ы{蟲Tp18基因的原核表達(dá)及其產(chǎn)物的抗原性分析[J]. 楊德英,陳林,古小彬,賴松家,孫家剛,楊光友.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(11)
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[5]家兔豆?fàn)钅椅豺什∮盟幮Ч^察[J]. 杜守信,孫蘭英,陳占洲.  四川畜牧獸醫(yī). 2010(01)
[6]家兔囊蟲病的診斷與防治[J]. 許偉.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2009(04)
[7]豬肉組織中阿維菌素類藥物殘留的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定[J]. 趙東豪,賀利民,聶建榮,洪振濤,連槿,劉雅紅,彭聰.  分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2008(08)
[8]不同冷卻工藝對(duì)冷卻兔肉肉質(zhì)特性的影響[J]. 王衛(wèi),茍興華.  食品工業(yè)科技. 2008(06)
[9]肉兔豆?fàn)钅椅豺什〉奈:π匝芯縖J]. 周永學(xué),杜愛芳,張雪娟,吳永明,童鳳英,吳廣運(yùn).  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(03)
[10]阿維菌素殘留檢測(cè)中不同SPE柱凈化效果的比較研究[J]. 張啟迪,鄒明,劉文華,曲志娜,劉煥奇.  中國動(dòng)物檢疫. 2007(12)



本文編號(hào):2987895

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