HBD3抗結(jié)核能力鑒定及抗結(jié)核轉(zhuǎn)基因牛生產(chǎn)
發(fā)布時(shí)間：2021-01-18 06:18
牛的結(jié)核病是一種動(dòng)物的慢性傳染病，臨床上以在肺和其他器官上形成肉芽腫為主要病理特點(diǎn)。這種疾病能夠傳染奶牛和其他家畜，同時(shí)也能感染野生動(dòng)物。牛的結(jié)核桿菌分布于世界各個(gè)角落，每年都會(huì)引起巨大的經(jīng)濟(jì)損失，其中對(duì)奶牛的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)影響更為嚴(yán)重。因此發(fā)現(xiàn)一種合適的方法降低這種損失變得尤為緊迫和重要。前期的文獻(xiàn)證明人的防御素（HBDs）在結(jié)核的發(fā)展過程中對(duì)結(jié)核桿菌有一定的抑制作用。因此在本實(shí)驗(yàn)中首先純化了HBD3蛋白并通過大腸桿菌和葡萄球菌測定了其生物學(xué)活性，而后驗(yàn)證了HBD3蛋白對(duì)結(jié)核桿菌的抑制作用。而后構(gòu)建HBD3真核表達(dá)載體，利用體細(xì)胞核移植技術(shù)獲得了轉(zhuǎn)HBD3基因的轉(zhuǎn)基因牛。（1）本文首先純化了GST-HBD3蛋白，通過Xa酶切后獲得純化的rHBD3蛋白，對(duì)其生物學(xué)活性鑒定表明其對(duì)大腸桿菌無明顯的抑制作用，而對(duì)金黃色葡萄球菌有顯著的抑制作用。（2）使用純化的rHBD3蛋白對(duì)結(jié)核桿菌做抗菌性分析，結(jié)果表明純化的HBD3蛋白對(duì)結(jié)核桿菌最小抑菌濃度為20μg.ml-1，同時(shí)結(jié)核桿菌對(duì)靶細(xì)胞侵染時(shí)，靶細(xì)胞會(huì)釋放HBD3。（3） Muc1蛋白在牛上的分布表明可以將muc1啟動(dòng)子應(yīng)用于抗結(jié)核研究中，同時(shí)...
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：124 頁
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
精子載體法產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的過程
圖 1-1 精子載體法產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的過程s to the production of genetically modified animals via SMGT(Smith and S細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因（ES cell）涉及到具有全能性的胚胎干細(xì)胞的分離，全能性的胚胎干細(xì)力，同時(shí)也能夠產(chǎn)生完整的生命體。然后將外源 DNA 通過同養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞基因組中，并把這些包含有外源 DNA 的細(xì)胞，最終形成嵌合體動(dòng)物（圖 1-2）。這項(xiàng)技術(shù)對(duì)于發(fā)育過程作用。
圖 1-3 體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得 Dolly 羊的過程ig1-3. Diagram of the nuclear transfer procedure that produced the dolly sheep(Mia病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因（Retrovirus-mediated gene transfer）毒是一種遺傳物質(zhì)為 RNA 而不是 DNA 的病毒，在腺病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基夠作為載體將外源基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞中，形成嵌合體，最后形成包的有機(jī)體或者動(dòng)物體。這種嵌合體動(dòng)物經(jīng)過自交 20 代之后會(huì)獲得純毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因最早開始于 90 年代中期。腺病毒作為載體最重要的性和轉(zhuǎn)基因的效率高效性。當(dāng)細(xì)胞被腺病毒感染后，合成的病毒 DN因整合后，變?yōu)樗拗骷?xì)胞基因組的一部分并能使宿主細(xì)胞維持壽命Nase 的光敏區(qū)是腺病毒載體偏愛的結(jié)合位點(diǎn)(Jaenisch 1988)。殖干細(xì)胞技術(shù)（Germline stem cell technique）干細(xì)胞技術(shù)分為精子發(fā)生細(xì)胞技術(shù)和原生殖細(xì)胞技術(shù)。雄性生togonial stem cell，SSCs），是在動(dòng)物睪丸中分離到的一種具有自
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)基因動(dòng)物新技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 羅慶苗,苗向陽,張瑞杰. 遺傳. 2011(05)
[2]小鼠精子形成各階段轉(zhuǎn)基因效率的研究[J]. 張鑫,苗向陽,尹遜河,馬艷芳,曲朝杰,張秋婷. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(08)
本文編號(hào)：2984445
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：124 頁
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
精子載體法產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的過程
圖 1-1 精子載體法產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的過程s to the production of genetically modified animals via SMGT(Smith and S細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因（ES cell）涉及到具有全能性的胚胎干細(xì)胞的分離，全能性的胚胎干細(xì)力，同時(shí)也能夠產(chǎn)生完整的生命體。然后將外源 DNA 通過同養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞基因組中，并把這些包含有外源 DNA 的細(xì)胞，最終形成嵌合體動(dòng)物（圖 1-2）。這項(xiàng)技術(shù)對(duì)于發(fā)育過程作用。
圖 1-3 體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得 Dolly 羊的過程ig1-3. Diagram of the nuclear transfer procedure that produced the dolly sheep(Mia病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因（Retrovirus-mediated gene transfer）毒是一種遺傳物質(zhì)為 RNA 而不是 DNA 的病毒，在腺病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基夠作為載體將外源基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞中，形成嵌合體，最后形成包的有機(jī)體或者動(dòng)物體。這種嵌合體動(dòng)物經(jīng)過自交 20 代之后會(huì)獲得純毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因最早開始于 90 年代中期。腺病毒作為載體最重要的性和轉(zhuǎn)基因的效率高效性。當(dāng)細(xì)胞被腺病毒感染后，合成的病毒 DN因整合后，變?yōu)樗拗骷?xì)胞基因組的一部分并能使宿主細(xì)胞維持壽命Nase 的光敏區(qū)是腺病毒載體偏愛的結(jié)合位點(diǎn)(Jaenisch 1988)。殖干細(xì)胞技術(shù)（Germline stem cell technique）干細(xì)胞技術(shù)分為精子發(fā)生細(xì)胞技術(shù)和原生殖細(xì)胞技術(shù)。雄性生togonial stem cell，SSCs），是在動(dòng)物睪丸中分離到的一種具有自
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)基因動(dòng)物新技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 羅慶苗,苗向陽,張瑞杰. 遺傳. 2011(05)
[2]小鼠精子形成各階段轉(zhuǎn)基因效率的研究[J]. 張鑫,苗向陽,尹遜河,馬艷芳,曲朝杰,張秋婷. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(08)
本文編號(hào)：2984445
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