禽偏肺病毒（Avian metapneumovirus, aMPV），是家禽常見的呼吸道病原之一。aMPV感染火雞可引起火雞鼻氣管炎，感染產(chǎn)蛋雞可導(dǎo)致產(chǎn)蛋率下降、孵化率降低。aMPV也被認為是肉雞腫頭綜合征（Swollen head syndrome, SHS）的重要誘發(fā)因素之一。aMPV于1978年首次在南非報道之后，歐洲、亞洲等地陸續(xù)出現(xiàn)該病毒的相關(guān)報道。aMPV可以分為A、B、C、D4個亞型，其中A亞型和B亞型在世界各地廣泛報道，C亞型和D亞型分別在美國和法國報道。中國大陸地區(qū)僅于1999年報道分離到1株禽偏肺病毒；2007-2008年的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示山東某些地區(qū)種雞血清學(xué)陽性率可達100%；2009-2010年，孫靜等利用地高辛標記的核酸探針對山東省部分地區(qū)臨床健康肉雞群的多種呼吸道病原進行檢測，aMPV檢出率高達36.87%，而且多重感染現(xiàn)象嚴重，aMPV對養(yǎng)禽業(yè)的危害不容忽視。本研究使用建立的aMPV Nested RT-PCR檢測方法，對aMPV進行了分離鑒定，并對分離株的部分特性進行了初步研究，從而為該病的預(yù)防控制提供理論依據(jù)。本研究內(nèi)容主要分為兩部分：1、禽偏肺病... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

第一次PCR擴增結(jié)果

陽性病料的組織 RNA，進行反轉(zhuǎn)錄后，依次用果均得到一條特異性條帶：第一次 PCR所得目目的條帶大小為 415 bp，均與預(yù)期片段大小圖 1、圖 2 所示。圖 1 第一次 PCR擴增結(jié)果Fig. 1 The result of the first PCR amplificationM. DNA 分子量標準； 1-5. PCR 產(chǎn)物；6. 陰性對照;M. DL 2000 Marker;1-5.The PCR products;6.Negative co

3.1.3 特異性試驗結(jié)果應(yīng)用該方法能夠從aMPV陽性雞胚尿囊液中特異性的擴增出預(yù)期的415 bp條帶，而對H9亞型AIV、NDV、IBV、ILTV的擴增沒有出現(xiàn)該片段，結(jié)果均為陰性(見圖5)。圖 5 逆轉(zhuǎn)錄套式 PCR方法檢測禽偏肺病毒的特異性試驗結(jié)果Fig. 5 Specificity of nested RT-PCR assay for aMPVM: DNA 分子量標準; 1-2 為 aMPV 陽性尿囊液; 3-6 分別為AIV, NDV, IBV, ILTV; 7: 陰性對照M: DL2000 DNA Marker; 1-2: Positive allantoic fluid; 3-6:AIV,NDV, IBV, ILTV, respectively;7: Nega

【參考文獻】：
期刊論文
[1]禽偏肺病毒地高辛核酸探針的制備與應(yīng)用[J]. 陳琳,刁有祥,鞠小軍,慕榕,鄭新穎,劉霞,孫靜,吳海洋.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2012(01)
[2]種雞禽肺病毒感染的血清學(xué)調(diào)查[J]. 郭龍宗,曲立新.  中國畜牧獸醫(yī). 2009(04)
[3]禽肺病毒的分離鑒定[J]. 沈瑞忠,曲立新,于康震,李建偉,張建林,谷守林,徐宜為,唐桂運.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 1999(01)



本文編號：2981800