肉牛養(yǎng)殖過程中,因異地運(yùn)輸所誘發(fā)的肉牛應(yīng)激反應(yīng),可造成運(yùn)輸肉牛機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)遭到破壞,從而誘發(fā)肉牛多種疾病的發(fā)生,嚴(yán)重影響肉牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。在運(yùn)輸應(yīng)激發(fā)生過程中,miRNAs因其自身的生物學(xué)特性,推測(cè)其可作為新興的應(yīng)激候選診斷標(biāo)志物。因此,本研究選取15頭雜交肉牛,隨機(jī)分組后以時(shí)速80 km,公路運(yùn)輸0 h、3 h、6 h以構(gòu)建運(yùn)輸應(yīng)激肉牛模型,按照模型構(gòu)建條件,運(yùn)輸刺激后,分別采集血液、肝臟、脾臟等組織樣品,評(píng)估肉牛運(yùn)輸應(yīng)激狀態(tài),并篩選出運(yùn)輸應(yīng)激肉牛肝臟miRNAs候選診斷標(biāo)志物。ELISA方法檢測(cè)結(jié)果顯示,運(yùn)輸6 h后,肉牛血清中細(xì)胞因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10,應(yīng)激激素CORT以及應(yīng)激相關(guān)蛋白Hp、SAA、CRP和HSP70濃度均顯著上調(diào)（P<0.05）,肝臟和脾臟SAA、HP及HSP70濃度顯著升高（P<0.05）。qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,運(yùn)輸6 h后,肝臟中SAA mRNA的表達(dá)量顯著升高（P<0.05）;肝臟中HSP70 mRNA和CRP mRNA的表達(dá)量極顯著升高（P<0.01）;脾臟中SAA mRNA、HSP70 mRN... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)肉牛血清CORT的影響

肉牛運(yùn)輸應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)及 miRNAs 的篩選與驗(yàn)證20圖3-2 運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)肉牛血清IL-1，IL-6，IL-8，IL-10，TNF-α的影響。結(jié)果表示為平均值 SD（每組n=5）的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。*P 0.05，**P 0.01。Fig. 3-2 Effect of transport stress on serum of IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α.Resultsareexpressedasthemean SD (n=5per group) in three independent experiments. *P 0.05, **P 0.01.3.3 運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)肉牛應(yīng)激相關(guān)蛋白的影響3.3.1 運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)肉牛血清中應(yīng)激相關(guān)蛋白的影響三組實(shí)驗(yàn)肉牛血清中檢測(cè)急性期蛋白（Hp、SAA、CRP）和 HSP70 的含量變化。結(jié)果顯示Hp 和 CRP 在運(yùn)輸 6 h 組中顯著上調(diào)（圖 3-3A 和 C，P<0.05），SAA 含量在運(yùn)輸 3 h 組和 6 h 組均極顯著上調(diào)

結(jié)果21圖3-3 運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)血清中SAA，Hp，CRP和HSP70的影響。結(jié)果表示為平均值 SD的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。n=5，*P 0.05，**P 0.01。Fig.3- 3 Effect of transport stress on SAA, Hp, CRP, and HSP70. Results are expressed as the mean SD in threeindependent experiments. n=5, *P 0.05,**P 0.01.3.3.2 運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)肉牛肝臟和脾臟中 SAA 的影響使用ELISA和qRT-PCR方法檢測(cè)肉牛肝臟和脾臟中SAA的濃度和mRNA表達(dá)量。qRT-PCR結(jié)果顯示，與運(yùn)輸0h組相比，運(yùn)輸3h和6h組肝臟組織中SAA的mRNA的表達(dá)量分別極顯著升高（圖3-4A，P<0.01）、顯著升高（P＜0.05）；而脾臟組織中SAA在運(yùn)輸應(yīng)激6 h組中

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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