發(fā)布時(shí)間：2021-01-13 21:46

　　本研究旨在探究不同佐劑對豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）S蛋白和豬流行性腹瀉病毒（PEDV）S蛋白免疫原性的影響。IPGT誘導(dǎo)重組表達(dá)菌株Rosetta（DE3）-pET28a-TGEV-S2/3和BL21（DE3）-pET28aPEDV-S1/2/3,制備重組蛋白TGEV-S2、TGEV-S3、PEDV-S1、PEDV-S2和PEDV-S3,并進(jìn)行SDS-PAGE和Western blot鑒定,將重組蛋白等量混勻分別與3種佐劑ISA 71VG、ISA 201VG和ISA 15AVG進(jìn)行乳化制備免疫原免疫蛋雞;Western blot檢測蛋雞血清抗體效價(jià),免疫過氧化物酶單層細(xì)胞染色法（IPMA）檢測抗體與病原的反應(yīng)活性;監(jiān)測雞群平均日增重。結(jié)果顯示,重組蛋白TGEV-S2、TGEV-S3、PEDV-S1、PEDV-S2和PEDV-S3的分子量依次為25 ku、28 ku、26 ku、24 ku和21 ku。Western blot分析顯示,5種蛋白均具有良好的免疫原性;疫苗二次免疫后7天抗體效價(jià)達(dá)到高峰,ISA 201VG佐劑組、ISA 71VG佐劑和ISA 15AVG佐劑組組最高抗體效... 

【文章來源】：中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2020,36(30)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

不同佐劑配伍的TGEV-PEDV二聯(lián)亞單位疫苗免疫蛋雞血清中抗體滴度western blot檢測

TGEV-S2蛋白對應(yīng)ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:32000和1:8000;TGEV-S3蛋白對應(yīng)ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:16000和1:4000;PEDV-S1蛋白對應(yīng)ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:32000、1:8000;PEDV-S2蛋白對應(yīng)ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:16000、1:8000;PEDV-S3蛋白對應(yīng)ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:64000、1:32000、1:4000（圖2和圖3）。2.3 二聯(lián)抗體免疫活性的測定

用3種不同油性佐劑配制的TGEV+PEDV二聯(lián)亞單位疫苗對蛋雞接種試驗(yàn)，首次注射疫苗后5天內(nèi)，對照組日均產(chǎn)蛋率為95%,ISA 71VG、ISA 201VG、ISA15AVG佐劑疫苗免疫組日均產(chǎn)蛋率為依次為77%、90%和92%,ISA 71VG和ISA 201VG對產(chǎn)蛋率影響相對較大，7天后試驗(yàn)組產(chǎn)蛋率恢復(fù)正常。增重率指標(biāo)評估顯示，試驗(yàn)雞ISA 15A VG組日增重比對照組日增重高(P<0.05),ISA 71 VG組日增重顯著低于對照組日增重(P<0.05),ISA 201 VG組日增重與對照組日增重?zé)o顯著差異(P>0.05)（見圖6）。圖5 TGEV-PEDV二聯(lián)免疫血清與PEDV反應(yīng)活性檢測

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]豬Gp96N增強(qiáng)PRRSV合成肽疫苗、亞單位疫苗及PCV2滅活疫苗免疫效應(yīng)的分析[D]. 賈曉娟.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]抗豬流行性腹瀉病毒S1蛋白卵黃抗體制劑的制備[D]. 王愛富.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院 2017
[2]不同佐劑配合ETEC滅活疫苗對蛋雞免疫原性的影響[D]. 于小娟.大連理工大學(xué) 2017
[3]不同佐劑對偽狂犬活疫苗免疫效果的比較研究[D]. 賴慶光.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



本文編號：2975616