不同佐劑對豬傳染性胃腸炎病毒S蛋白和豬流行性腹瀉病毒S蛋白免疫原性的影響
發(fā)布時間：2021-01-13 21:46
本研究旨在探究不同佐劑對豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）S蛋白和豬流行性腹瀉病毒（PEDV）S蛋白免疫原性的影響。IPGT誘導重組表達菌株Rosetta（DE3）-pET28a-TGEV-S2/3和BL21（DE3）-pET28aPEDV-S1/2/3,制備重組蛋白TGEV-S2、TGEV-S3、PEDV-S1、PEDV-S2和PEDV-S3,并進行SDS-PAGE和Western blot鑒定,將重組蛋白等量混勻分別與3種佐劑ISA 71VG、ISA 201VG和ISA 15AVG進行乳化制備免疫原免疫蛋雞;Western blot檢測蛋雞血清抗體效價,免疫過氧化物酶單層細胞染色法（IPMA）檢測抗體與病原的反應活性;監(jiān)測雞群平均日增重。結果顯示,重組蛋白TGEV-S2、TGEV-S3、PEDV-S1、PEDV-S2和PEDV-S3的分子量依次為25 ku、28 ku、26 ku、24 ku和21 ku。Western blot分析顯示,5種蛋白均具有良好的免疫原性;疫苗二次免疫后7天抗體效價達到高峰,ISA 201VG佐劑組、ISA 71VG佐劑和ISA 15AVG佐劑組組最高抗體效...
【文章來源】：中國農學通報. 2020,36(30)
【文章頁數(shù)】：8 頁
【部分圖文】：
不同佐劑配伍的TGEV-PEDV二聯(lián)亞單位疫苗免疫蛋雞血清中抗體滴度western blot檢測
TGEV-S2蛋白對應ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:32000和1:8000;TGEV-S3蛋白對應ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:16000和1:4000;PEDV-S1蛋白對應ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:32000、1:8000;PEDV-S2蛋白對應ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:16000、1:8000;PEDV-S3蛋白對應ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:64000、1:32000、1:4000（圖2和圖3）。2.3 二聯(lián)抗體免疫活性的測定
用3種不同油性佐劑配制的TGEV+PEDV二聯(lián)亞單位疫苗對蛋雞接種試驗，首次注射疫苗后5天內，對照組日均產(chǎn)蛋率為95%,ISA 71VG、ISA 201VG、ISA15AVG佐劑疫苗免疫組日均產(chǎn)蛋率為依次為77%、90%和92%,ISA 71VG和ISA 201VG對產(chǎn)蛋率影響相對較大，7天后試驗組產(chǎn)蛋率恢復正常。增重率指標評估顯示，試驗雞ISA 15A VG組日增重比對照組日增重高(P<0.05),ISA 71 VG組日增重顯著低于對照組日增重(P<0.05),ISA 201 VG組日增重與對照組日增重無顯著差異(P>0.05)（見圖6）。圖5 TGEV-PEDV二聯(lián)免疫血清與PEDV反應活性檢測
【參考文獻】：
期刊論文
[1]PEDV、TGEV和PoRV三重PCR檢測方法的建立及初步應用[J]. 蒲翠敏,馮旭芳,張雙翔,胡興義,張海,丁尊俄,王開功,周碧君,文明,程振濤. 動物醫(yī)學進展. 2018(02)
[2]獸用疫苗佐劑的研究進展[J]. 鄧碧華,朱俊,馬鶴毓,徐海,盧宇. 畜牧獸醫(yī)科學(電子版). 2017(12)
[3]豬圓環(huán)病毒2型-肺炎支原體二聯(lián)滅活疫苗佐劑的篩選[J]. 翟路峰,胡東波,廖永洪,孫哲,朱巧艷,張國良. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(16)
[4]卵黃抗體/殼聚糖微囊的制備與體外釋放性能的研究[J]. 薛海燕,杜枘宣,韓芳,宋宏新. 食品工業(yè)科技. 2014(19)
[5]抗豬傳染性胃腸炎病毒與豬流行性腹瀉病毒卵黃抗體制備及其臨床應用研究[J]. 崔煥忠,姜海龍,張加力,張輝,秦貴信. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(06)
[6]不同佐劑對豬圓環(huán)病毒2型滅活抗原免疫效果的影響[J]. 馬濤,王先煒,李玉峰,李文良,姜平. 中國獸醫(yī)科學. 2011(06)
博士論文
[1]豬Gp96N增強PRRSV合成肽疫苗、亞單位疫苗及PCV2滅活疫苗免疫效應的分析[D]. 賈曉娟.中國農業(yè)大學 2014
碩士論文
[1]抗豬流行性腹瀉病毒S1蛋白卵黃抗體制劑的制備[D]. 王愛富.佛山科學技術學院 2017
[2]不同佐劑配合ETEC滅活疫苗對蛋雞免疫原性的影響[D]. 于小娟.大連理工大學 2017
[3]不同佐劑對偽狂犬活疫苗免疫效果的比較研究[D]. 賴慶光.江西農業(yè)大學 2011
本文編號：2975616
【文章來源】：中國農學通報. 2020,36(30)
【文章頁數(shù)】：8 頁
【部分圖文】：
不同佐劑配伍的TGEV-PEDV二聯(lián)亞單位疫苗免疫蛋雞血清中抗體滴度western blot檢測
TGEV-S2蛋白對應ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:32000和1:8000;TGEV-S3蛋白對應ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:16000和1:4000;PEDV-S1蛋白對應ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:32000、1:8000;PEDV-S2蛋白對應ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:32000、1:16000、1:8000;PEDV-S3蛋白對應ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐劑免疫組血清抗體最高滴度依次為1:64000、1:32000、1:4000（圖2和圖3）。2.3 二聯(lián)抗體免疫活性的測定
用3種不同油性佐劑配制的TGEV+PEDV二聯(lián)亞單位疫苗對蛋雞接種試驗，首次注射疫苗后5天內，對照組日均產(chǎn)蛋率為95%,ISA 71VG、ISA 201VG、ISA15AVG佐劑疫苗免疫組日均產(chǎn)蛋率為依次為77%、90%和92%,ISA 71VG和ISA 201VG對產(chǎn)蛋率影響相對較大，7天后試驗組產(chǎn)蛋率恢復正常。增重率指標評估顯示，試驗雞ISA 15A VG組日增重比對照組日增重高(P<0.05),ISA 71 VG組日增重顯著低于對照組日增重(P<0.05),ISA 201 VG組日增重與對照組日增重無顯著差異(P>0.05)（見圖6）。圖5 TGEV-PEDV二聯(lián)免疫血清與PEDV反應活性檢測
【參考文獻】：
期刊論文
[1]PEDV、TGEV和PoRV三重PCR檢測方法的建立及初步應用[J]. 蒲翠敏,馮旭芳,張雙翔,胡興義,張海,丁尊俄,王開功,周碧君,文明,程振濤. 動物醫(yī)學進展. 2018(02)
[2]獸用疫苗佐劑的研究進展[J]. 鄧碧華,朱俊,馬鶴毓,徐海,盧宇. 畜牧獸醫(yī)科學(電子版). 2017(12)
[3]豬圓環(huán)病毒2型-肺炎支原體二聯(lián)滅活疫苗佐劑的篩選[J]. 翟路峰,胡東波,廖永洪,孫哲,朱巧艷,張國良. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(16)
[4]卵黃抗體/殼聚糖微囊的制備與體外釋放性能的研究[J]. 薛海燕,杜枘宣,韓芳,宋宏新. 食品工業(yè)科技. 2014(19)
[5]抗豬傳染性胃腸炎病毒與豬流行性腹瀉病毒卵黃抗體制備及其臨床應用研究[J]. 崔煥忠,姜海龍,張加力,張輝,秦貴信. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(06)
[6]不同佐劑對豬圓環(huán)病毒2型滅活抗原免疫效果的影響[J]. 馬濤,王先煒,李玉峰,李文良,姜平. 中國獸醫(yī)科學. 2011(06)
博士論文
[1]豬Gp96N增強PRRSV合成肽疫苗、亞單位疫苗及PCV2滅活疫苗免疫效應的分析[D]. 賈曉娟.中國農業(yè)大學 2014
碩士論文
[1]抗豬流行性腹瀉病毒S1蛋白卵黃抗體制劑的制備[D]. 王愛富.佛山科學技術學院 2017
[2]不同佐劑配合ETEC滅活疫苗對蛋雞免疫原性的影響[D]. 于小娟.大連理工大學 2017
[3]不同佐劑對偽狂犬活疫苗免疫效果的比較研究[D]. 賴慶光.江西農業(yè)大學 2011
本文編號：2975616
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