流行性乙型腦炎（JE）是由流行性乙型腦炎病毒（JEV）感染引起的一種嚴(yán)重人畜共患傳染病。對(duì)人類的健康和畜牧養(yǎng)殖業(yè)的危害非常大。近年來由于全球氣溫變暖,乙腦的流行區(qū)域不斷擴(kuò)大,雖然乙腦疫苗的推廣使用降低了乙腦的發(fā)病率,但是流行的頻率卻在增加,而且流行的基因型也在逐漸的演變。由于乙腦的治療沒有特效藥,因此對(duì)乙腦的防治必須加強(qiáng)流行病學(xué)監(jiān)測,以便針對(duì)性地采取防控措施。豬是JEV最重要的貯藏和擴(kuò)散宿主,而且我國養(yǎng)豬業(yè)十分龐大,人豬接觸頻繁、密切。蚊是JEV的主要傳播媒介,由于蚊感染JEV后可帶毒越冬經(jīng)卵傳代,所以蚊也是病毒的貯存宿主。因此對(duì)地區(qū)范圍內(nèi)豬和蚊所攜帶的流行性乙型腦炎病毒進(jìn)行分子流行病學(xué)監(jiān)測,可以評(píng)估該地區(qū)乙腦的流行狀況。在云南省采集蚊樣品,首先將疑似的蚊懸液樣品接種BHK-21單層細(xì)胞,待出現(xiàn)細(xì)胞病變后接種于乳鼠腦內(nèi),反復(fù)傳代至病毒適應(yīng)鼠腦。提取RNA鑒定為陽性病毒RNA為模板利用PCR擴(kuò)增E基因片段,克隆到pMD18-T載體后由上海生工測序。通過對(duì)測序結(jié)果的比對(duì)分析,確定分離到1株乙型腦炎病毒,命名為云南1101株,對(duì)新分離到的YN/11/01毒株進(jìn)行E基因序列和基因系統(tǒng)進(jìn)化分析,... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 流行性乙型腦炎研究進(jìn)展
        1.1 JEV的病原學(xué)及分子生物學(xué)特性
        1.2 JEV的分布及流行趨勢
        1.3 JEV的傳播媒介
        1.4 豬乙型腦炎的臨床癥狀與病理變化
        1.5 乙型腦炎的診斷
        1.6 乙型腦炎的防治
        1.7 小結(jié)
    第二章 實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究進(jìn)展
        2.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的原理
        2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的分類和方法
        2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量方法
        2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的應(yīng)用
        2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的發(fā)展前景
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 流行性乙型腦炎病毒YN/11/O1株的分離鑒定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 JEV RT-PCR方法和熒光定量PCR方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 應(yīng)用建立的RT-PCR和熒光定量PCR方法對(duì)云南省豬和蚊JEV進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[5]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究進(jìn)展及其在獸醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J]. 薛霜,獨(dú)軍政,高閃電,常惠蕓.  中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(07)
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