豬源甲型H1N1流感病毒自從被認(rèn)定是1918年流感大流行的病原以后，該病毒就已被人們所重視，2009年全球范圍內(nèi)流行的豬源性新型甲型H1N1流感再一次使人們的目光聚焦于此。通過(guò)對(duì)一些地區(qū)養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)豬群的檢測(cè)，也發(fā)現(xiàn)部分地區(qū)的豬群中確實(shí)存在新型甲型H1N1流感病毒的傳播。加強(qiáng)對(duì)人群、豬群中甲流的檢測(cè)和防控工作，具有非常重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。為了深入了解豬源性甲型H1N1病毒在山東省內(nèi)豬群中存在和流行的情況，本實(shí)驗(yàn)在山東省內(nèi)九個(gè)地市的多個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行抽樣檢測(cè)，使用AGI-30分別采集豬圈內(nèi)、外空氣樣品，經(jīng)過(guò)處理后使用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)樣品中豬源性甲型H1N1病毒的含量。豬舍內(nèi)一共采集了157個(gè)空氣樣品，通過(guò)對(duì)空氣樣品的采集、處理和鑒定，其中41個(gè)樣品為陽(yáng)性，各個(gè)地區(qū)間舍內(nèi)空氣樣品的陽(yáng)性率為5.0%67.0%，德州地區(qū)的陽(yáng)性率最高。舍內(nèi)空氣樣品中病毒拷貝數(shù)含量最高的豬場(chǎng)在德州，病毒拷貝數(shù)高達(dá)6.72log10copies/m3air。舍外的37份空氣樣品中檢出3份陽(yáng)性。2011年初，山東省濰坊市某地的部分養(yǎng)豬場(chǎng)相繼出現(xiàn)類似流感癥狀的呼吸道疫病，通過(guò)對(duì)幾個(gè)發(fā)病場(chǎng)的豬群的鼻咽棉拭子和組... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 豬源甲型 H1N1 流感病原
        1.1.1 豬源甲型 H1N1 流感研究進(jìn)展
        1.1.2 豬源甲型 H1N1 流感病毒的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 豬源甲型 H1N1 流感病毒蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能
        1.1.4 流感病毒的理化特點(diǎn)
        1.1.5 甲型流感病毒的復(fù)制和變異
        1.1.6 豬源甲型 H1N1 流感的流行和傳播
        1.1.7 豬源甲型 H1N1 流感的診斷方法
        1.1.8 豬源甲型 H1N1 流感的公共衛(wèi)生學(xué)意義
    1.2 病毒氣溶膠
        1.2.1 氣溶膠的概念
        1.2.2 病毒氣溶膠的產(chǎn)生和傳播
        1.2.3 病毒氣溶膠的危害
        1.2.4 氣溶膠采樣原理和儀器
        1.2.5 病毒氣溶膠的采集和檢測(cè)
    1.3 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
2 研究目的與意義
3 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 采樣豬場(chǎng)
        3.1.2 病料的采集
        3.1.3 標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清和抗原
        3.1.4 細(xì)胞、雞胚和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.5 引物和探針
        3.1.6 主要試劑及配制方法
        3.1.7 主要儀器設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 豬場(chǎng)內(nèi)空氣樣品的采集
        3.2.2 引物探針的合成
        3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)品的制備
        3.2.4 空氣樣品的處理
        3.2.6 病毒的分離純化
        3.2.7 病毒亞型的鑒定
        3.2.8 病毒 TCID50 的測(cè)定
        3.2.9 透射電鏡下觀察病毒形態(tài)
        3.2.12 隔離器中病毒氣溶膠濃度的測(cè)定
        3.2.13 實(shí)驗(yàn)豬感染和排毒情況的檢測(cè)
4 結(jié)果
    4.1 標(biāo)準(zhǔn)品制備結(jié)果
    4.2 豬舍內(nèi)、外空氣樣品的檢測(cè)結(jié)果
    4.3 熒光定量 PCR 的檢測(cè)結(jié)果
    4.4 病毒分離鑒定結(jié)果
    4.5 病毒 TCID50 測(cè)定結(jié)果
    4.6 透射電鏡下病毒形態(tài)
    4.7 空氣樣品的檢測(cè)結(jié)果
    4.8 傳播模型中動(dòng)物排毒檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表的文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]H1亞型豬流感病毒感染的血清學(xué)調(diào)查[J]. 羅曉松,李克敏,黃潔東,林健仁,李俊欣.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2011(05)
[2]H1N1亞型豬流感病毒分離鑒定[J]. 鄢明華,李秀麗,韓偉,高榮玲,申樹(shù)權(quán),陳龍賓,侯俊輝,王東.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2011(02)
[3]甲型H1N1流感的研究進(jìn)展[J]. 王漢杰.  吉林醫(yī)學(xué). 2011(01)
[4]豬流感病毒河南株的分離鑒定和生物學(xué)特性[J]. 趙樸,鄭玉姝,賈貝貝,劉麗艷,劉興友,李海燕.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2010(04)
[5]甲型H1N1流感的回顧與展望[J]. 張雅芳,曾慶磊,吳新忠,徐光華.  西部醫(yī)學(xué). 2010(02)
[6]新甲型H1N1（2009）流感病毒的早期分子特征[J]. 祁賢,湯奮揚(yáng),李亮,崔侖標(biāo),吳斌,祖榮強(qiáng),朱鳳才,羊海濤,汪華.  微生物學(xué)報(bào). 2010(01)
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[10]鴨瘟病毒的純化及電鏡負(fù)染形態(tài)觀察[J]. 郭宇飛,程安春,汪銘書(shū),周毅.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2008(05)



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