鑒定臨床癥狀疑似鴨疫里默氏桿菌病的病原并分析病原耐藥性。通過采集臨床樣本、細菌培養(yǎng)觀察、生化試驗、16S rRNA基因序列測定及動物感染試驗確定6株分離株為鴨疫里默氏桿菌（RA）,將其命名為RA-SS1～RA-SS6。藥敏試驗結(jié)果顯示,分離菌株僅對頭孢氨芐、氧氟沙星、利福平及磺胺異惡唑4種抗生素較為敏感,對其他常用的16種抗生素并不敏感。耐藥基因檢測結(jié)果顯示,除arm A、bla（SHV）、bla（CTXM-9G）、erm A、erm B及erm C 6種耐藥基因沒有擴增出來,oqx A、oqx B、erm F、aph（3′）-Ⅱa、rmt C、aac（6′）-Ⅰb、qnr B、bla（DHA）、bla（OXA）及qnr A 10種耐藥基因的檢出率分別為100.0%、100.0%、100.0%、83.3%、83.3%、50.0%、50.0%、16.7%、16.7%及16.7%。結(jié)果表明:從貴州某養(yǎng)鴨場分離出6株RA;各分離株具耐12種以上抗生素高達100.0%,1株RA可同時耐17種抗生素,分離株對常用抗生素具有不同程度的多重耐藥性;首次報道在RA分離菌株上檢測出16S rRNA甲基化... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(10)北大核心

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細菌16SrRNA基因的PCR擴增Figure3PCRamplificationofbacterial16SrRNAgene500bp250bp100bp

10期包濤濤等：六株鴨疫里默氏桿菌貴州株的分離鑒定及其耐藥性分析第圖4分離菌的耐藥基因PCR擴增結(jié)果Figure4DrugresistancegenePCRamplificationresultsofisolatedstrainsM：DNA分子質(zhì)量標(biāo)準；1～16：耐藥基因分別為bla（DHA）、bla（CTX-M-9G）、bla（DHA）、bla（OXA）、oqxA、oqxB、qnrA、qnrB、aph（3′）-IIa、rmtC、armA、aac（6′）-Ib、ermA、ermB、ermC和ermF；17：陰性對照。M：DL2000DNAMarker；1～16：Thedrugresistancegenesare：bla（DHA），bla（CTX-M-9G），bla（DHA），bla（OXA），oqxA，oqxB，qnrA，qnrB，aph（3′）-IIa，rmtC，armA，aac（6′）-Ib，ermA，ermB，ermCandermF，respectively；17：Negativecontrol.2000bp1000bp750bp500bp250bp100bpM12345678910111213141516172000bp1000bp750bp500bp250bp100bpM12345678910111213141516172000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bpM1234567891011121314151617M12345678910111213141516172000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp1234567891011121314151617M1234567891011121314151617M氟沙星、利福平及磺胺異惡唑4種較敏感，對阿莫西林、諾氟沙星及恩諾沙星等11種耐藥，大部分菌株對5種藥物表現(xiàn)不同程度耐藥，各分離菌具有多重耐藥性，平均耐藥可達15種，占所選不同種類藥物的75.0％，這與國內(nèi)多位學(xué)者［13-15］研究的RA具有多重耐藥性結(jié)果一致。RA高度耐藥給臨床實踐選擇合理藥物增加了極大的難度，長期不規(guī)范使用或濫用抗生素極易加快超級細菌的形成，嚴重威脅人

命名為RA-SS1、RA-SS2、RA-SS3、RA-SS4、RA-SS5、RA-SS6。2.5藥敏試驗采用Kirby-Bauer紙片法對6株分離菌開展獸醫(yī)常用20種抗生素藥敏試驗，結(jié)果（見表3）顯示：所有分離菌株對頭孢氨芐、氧氟沙星、利福平及磺胺異惡唑較敏感，對阿莫西林、諾氟沙星、恩諾沙星、鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、丁胺卡那、阿奇霉素、紅霉素、新霉素及多黏菌素B耐藥。大部分菌株對青圖1分離菌菌落形態(tài)Figure1Colonymorphologyofisolatedstrains圖2分離菌革蘭染色鏡檢結(jié)果Figure2Gramstainingresultsofisolatedstrains2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp1480bpM12345671281

【參考文獻】：
期刊論文
[1]珠三角及鄰地鴨疫里默氏桿菌主要生物學(xué)特性的研究[J]. 張濟培,張小峰,陳建紅,羅滿林,司興奎.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2012(02)
[2]介導(dǎo)鴨疫里默氏桿菌耐β-內(nèi)酰胺類藥物發(fā)生的研究[J]. 仲崇岳,程安春,汪銘書,朱德康,張淑華,羅啟慧,陳孝躍.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2009(12)
[3]我國鴨疫里默氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J]. 程安春,汪銘書,陳孝躍,朱德康,黃城,劉菲,周毅,郭宇飛,劉兆宇,方鵬飛.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2003(04)

碩士論文
[1]廣東省鴨疫里氏桿菌耐藥性調(diào)查及floR傳播分子特征研究[D]. 張亞楠.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]鴨疫里默氏菌的分離鑒定及RCAD0122株多重耐藥基因簇的解析[D]. 宋曉恒.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]鴨疫里默氏桿菌氨基糖苷類和喹諾酮類耐藥基因的檢測與序列分析[D]. 楊芳芳.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]鴨疫里默氏菌耐藥性監(jiān)測與分析[D]. 劉穎.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號：2974120