牛副結(jié)核病是由副結(jié)核分支桿菌（Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis,MAP）引起的慢性增生性腸炎,主要表現(xiàn)為腸道出現(xiàn)漿液性分泌物,伴隨長期腹瀉以及體況不良,有時危及病畜生命,使畜牧業(yè)遭受經(jīng)濟損失。國外是強制通報的傳染病,我國定為二類動物疫病。新疆地區(qū)牛場時有該病發(fā)生,但存在臨床與其他疾病易混淆,難于鑒別診斷的問題。本項研究對新疆不同地區(qū)牛場血清進(jìn)行抗體檢測,對臨床疑似病例進(jìn)行分子生物學(xué)診斷,探索建立該病的血清學(xué)ELISA檢測方法,為該病的診斷和防控提供技術(shù)支持。目的:調(diào)查新疆不同地區(qū)牛場牛副結(jié)核病血清抗體陽性情況,利用分子生物學(xué)方法診斷牛副結(jié)核病疑似病例,掌握臨床該病流行和發(fā)病情況;篩選副結(jié)核分枝桿菌重要抗原蛋白,建立該病抗體檢測的間接ELISA方法,為建立適合本地區(qū)的牛副結(jié)核病的診斷方法提供參考意見。方法:1.采集新疆石河子、沙灣、奎屯等13個地區(qū)的牛場血液樣本681份進(jìn)行抗體檢測;2.對臨床64份疑似發(fā)病牛糞便樣本進(jìn)行PCR法檢測;3.分析牛副結(jié)核分枝桿菌重要抗原蛋白表位構(gòu)建串聯(lián)重組蛋白MAP3290-1595表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌經(jīng)... 

【文章來源】： 張哲 石河子大學(xué)

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

部分牛血清Figure2-1Somebovineseru陰對陽對

疑似牛副結(jié)Figure2-2Pictureofclinicalsympto

21圖2-3糞便樣本抗酸染色鏡檢結(jié)果（100*10）Figure2-3Microscopicexaminationresultsofacid-faststainingofstoolsamples（100*10）2.2嵌套法PCR檢測結(jié)果對新疆不同地區(qū)64份樣本進(jìn)行嵌套法PCR檢測。檢測牛副結(jié)核病使用本章1.1.3中基于IS900特異性片段的MAP引物進(jìn)行，片段大小452bp；結(jié)果見圖2-4。圖2-4部分牛副結(jié)核病PCR診斷結(jié)果Figure2-4PCRdiagnosisresultsofsomebovineparatuberculosis根據(jù)對這64份臨床糞便樣本進(jìn)行檢測，結(jié)果如表2-10所示；牛副結(jié)核病核酸陽性的有52個樣本，總陽性率為81.25%，沙灣采集了16份樣本，陽性數(shù)14份，陽性率87.50%；布爾津地區(qū)采集了11份樣本，陽性數(shù)9份，陽性率81.82%；石河子地區(qū)采集了4份樣本，陽性數(shù)3份，陽性率75.00%；昌吉地區(qū)采集了8份樣本，陽性數(shù)5份，陽性率62.50%；奎屯地區(qū)采集了25份樣本，陽性數(shù)21份，陽性率84.00%；12345678910M11121314151617452bp-100x10700bp400bp100bp

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：2970863