牛副結(jié)核病是由副結(jié)核分支桿菌（Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis,MAP）引起的慢性增生性腸炎,主要表現(xiàn)為腸道出現(xiàn)漿液性分泌物,伴隨長(zhǎng)期腹瀉以及體況不良,有時(shí)危及病畜生命,使畜牧業(yè)遭受經(jīng)濟(jì)損失。國(guó)外是強(qiáng)制通報(bào)的傳染病,我國(guó)定為二類動(dòng)物疫病。新疆地區(qū)牛場(chǎng)時(shí)有該病發(fā)生,但存在臨床與其他疾病易混淆,難于鑒別診斷的問(wèn)題。本項(xiàng)研究對(duì)新疆不同地區(qū)牛場(chǎng)血清進(jìn)行抗體檢測(cè),對(duì)臨床疑似病例進(jìn)行分子生物學(xué)診斷,探索建立該病的血清學(xué)ELISA檢測(cè)方法,為該病的診斷和防控提供技術(shù)支持。目的:調(diào)查新疆不同地區(qū)牛場(chǎng)牛副結(jié)核病血清抗體陽(yáng)性情況,利用分子生物學(xué)方法診斷牛副結(jié)核病疑似病例,掌握臨床該病流行和發(fā)病情況;篩選副結(jié)核分枝桿菌重要抗原蛋白,建立該病抗體檢測(cè)的間接ELISA方法,為建立適合本地區(qū)的牛副結(jié)核病的診斷方法提供參考意見(jiàn)。方法:1.采集新疆石河子、沙灣、奎屯等13個(gè)地區(qū)的牛場(chǎng)血液樣本681份進(jìn)行抗體檢測(cè);2.對(duì)臨床64份疑似發(fā)病牛糞便樣本進(jìn)行PCR法檢測(cè);3.分析牛副結(jié)核分枝桿菌重要抗原蛋白表位構(gòu)建串聯(lián)重組蛋白MAP3290-1595表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌經(jīng)... 

【文章來(lái)源】： 張哲 石河子大學(xué)

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

部分牛血清Figure2-1Somebovineseru陰對(duì)陽(yáng)對(duì)

疑似牛副結(jié)Figure2-2Pictureofclinicalsympto

21圖2-3糞便樣本抗酸染色鏡檢結(jié)果（100*10）Figure2-3Microscopicexaminationresultsofacid-faststainingofstoolsamples（100*10）2.2嵌套法PCR檢測(cè)結(jié)果對(duì)新疆不同地區(qū)64份樣本進(jìn)行嵌套法PCR檢測(cè)。檢測(cè)牛副結(jié)核病使用本章1.1.3中基于IS900特異性片段的MAP引物進(jìn)行，片段大小452bp；結(jié)果見(jiàn)圖2-4。圖2-4部分牛副結(jié)核病PCR診斷結(jié)果Figure2-4PCRdiagnosisresultsofsomebovineparatuberculosis根據(jù)對(duì)這64份臨床糞便樣本進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如表2-10所示；牛副結(jié)核病核酸陽(yáng)性的有52個(gè)樣本，總陽(yáng)性率為81.25%，沙灣采集了16份樣本，陽(yáng)性數(shù)14份，陽(yáng)性率87.50%；布爾津地區(qū)采集了11份樣本，陽(yáng)性數(shù)9份，陽(yáng)性率81.82%；石河子地區(qū)采集了4份樣本，陽(yáng)性數(shù)3份，陽(yáng)性率75.00%；昌吉地區(qū)采集了8份樣本，陽(yáng)性數(shù)5份，陽(yáng)性率62.50%；奎屯地區(qū)采集了25份樣本，陽(yáng)性數(shù)21份，陽(yáng)性率84.00%；12345678910M11121314151617452bp-100x10700bp400bp100bp

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[8]牛副結(jié)核病的病原檢測(cè)[D]. 張繼才.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[9]牛副結(jié)核病多重組抗原間接ELISA方法的建立及應(yīng)用[D]. 遲磊.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



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