精原干細胞（Spermatogonial stem cells,SSCs）是雄性動物體內(nèi)特有的能夠將親本遺傳信息傳遞給子代的一類成體干細胞,具有自我更新與分化能力,可替代胚胎干細胞（Embryonic stem cells,ESCs）用于治療和遺傳修飾,且不涉及倫理道德和免疫排斥問題。為此,國內(nèi)外科學家致力于在體外誘導形成大量具有功能的SSCs的研究,在臨床醫(yī)學可用于治療不孕不育。然而,隨著對SSCs發(fā)生機制的深入研究,發(fā)現(xiàn)其存在體外誘導效率低,獲取細胞數(shù)量少且質量不佳,體外誘導和培養(yǎng)體系不穩(wěn)定等問題。這導致SSCs的應用受到了極大的限制。因此,系統(tǒng)全面研究影響SSCs發(fā)生的調(diào)控機制顯得尤為重要。本課題組前期采用ChIP-Seq技術對雞雄性生殖細胞分化過程中ESCs、PGCs和SSCs三種細胞的組蛋白H3K4甲基化水平進行檢測,經(jīng)分析確定組蛋白H3K4me2在雞SSCs形成過程中存在差異表達,提示H3K4me2對雞SSCs的形成發(fā)揮重要調(diào)控作用,但具體作用機理尚未闡明。為了深入研究H3K4me2對雞SSCs發(fā)生的具體調(diào)控作用,本研究結合實驗室前期建立的雞ESCs無飼養(yǎng)層RA培養(yǎng)誘導體系... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?ＲＴ－ｑＲＣＲ檢測組蛋白甲基化修飾酶在雞不同組織中表達情況

果表明各個組蛋白修飾酶在雞心、肝、脾、肺、腎、卵巢、睪丸組織中均有不同程度的表??達。其中ＡＳ／／２Ｌ，ＭＬＬ２，?和Ｉ５Ｄ／在雞睪丸組織中的表達量最高，而在和??尤ＤＭ５５在卵巢組織中的表達量較低（見圖２－１和表２－１３）。ＡＳ／／２Ｚ，ＭＺＸ２，?ＬＳＤ八??和尤ＤＭ５５在雞ＰＧＣｓ中表達最高，而ＭＬＬ５在雞ＳＳＣｓ中表達最高（見圖２－２和表２－１４）。??＜?ＡＳＨ２Ｌ?＜?ＭＬＬ２?＜?ＭＬＬ５??ｉ?２ｓ＊ｊ?ａ?ＭＱ］?ａ?ｉｉ〇－ｉ??｜?ｉｌｌ?ｆ．?｜??｜：：ｉ?■?Ｉ?�。�?■■售ｅ??ｓ?Ｌ．－ｉｉｌ?ｉＬ＇」??５?心肝牌肺腎卵巢》丸?左?心肝脾肺腎卵巢寒丸邊心肝脾胂腎卵巢寒丸??＜?ＫＤＭ１Ａ?＜?ＫＤＭ５Ａ?＜?ＫＤＭ５Ｂ??｜１?＿?Ｉ?｜－｜?■?ｌｉｉｊ?Ｉ??！?；？?Ｉ?｜?１８：Ｊ?■?｜，〇ｉ＿?＾??１?？ｔ?Ｈ?１?：：單孕專輩，＿ｉ?祖?龜二?＋??＾?心肝脾肺腎卵巢寒九?名?心肝脾肺腎卵巢寒丸益?心肝脾肺腎卵糶睪丸??圖２－１?ＲＴ－ｑＲＣＲ檢測組蛋白甲基化修飾酶在雞不同組織中表達情況。??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｈｉｓｔｏｎｅ?ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ?ｅｎｚｙｍｅｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＲＴ－ｑＰＣＲ．??注：其中?ＡＳ／ｄ?（２３．０３土０．０２），?ＭＺＬ２?（４６７±０．０１６），?ＡＴＺＺ５?（９．４６±０．０４６）和１５１）７?（８４６．８１?土０．０２４）在??雞睪丸組織中的表達量最高

Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ結果表明組蛋白Ｈ３Ｋ４ｍｅ２甲基化水平在ＥＳＣｓ，?ＰＧＣｓ和ＳＳＣｓ這三種細??胞存在差異表達，相比于雞ＥＳＣｓ，ＰＧＣｓ和ＳＳＣｓ中組蛋白Ｈ３Ｋ４ｍｅ２甲基化水平表達水??平較高（見圖２－３Ａ）。而在成體組織心臟，肝，脾，肺，腎臟，睪丸和卵巢組織中組蛋白??Ｈ３Ｋ４ｍｅ２甲基化水平?jīng)]有存在差異表達（見圖２－３Ｂ）。??Ａ??ＥＳＣｓ?ＰＧＣｓ?ＳＳＣｓ?ＤＦ１?ＣＥＦ??Ｈ３Ｋ４ｍｅ２?１７Ｋｄａ??Ｈｉｓｔｏｎｅ?Ｈ３?丨卜??ｐ－ａｃｒｔｎ?Ｕｆ?４３Ｋｔｉａ??Ｂ??心臟?肝?脾肺?腎臟睪丸卵巢??Ｈ３Ｋ４ｍｅ２?１７Ｋｄａ??入＇????????—??????＾?ＴＴ＾?＾＊５＂＊１＊＊＊＊？?ｍｍｍｍｍ?ＳＵＰ＊?ｍｍｍｍｍ?腳酬—ｉ７Ｋｄａ??Ｈｉｓｔｏｎｅ?Ｊ１Ｊ??ｐ－ａｃｔｉｎ?＿ａＭｉｇｐ?＿ｗｗ？?ｍｍｍｍ?４３Ｋｄａ??圖２－３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ檢測Ｈ３Ｋ４ｍｅ２表達水平情況。??Ｆｉｇ．２－３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ｔｈｅ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?Ｈ３Ｋ４ｍｅ２．??注：Ａ：?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ檢測Ｈ３Ｋ４ｍｅ２在雞不同細胞中表達水平情況。相比于ＥＳＣ細胞

【參考文獻】：
期刊論文
[1]BMP4誘導雞胚胎干細胞向雄性生殖細胞分化的研究[J]. 施青青,張振韜,李鵬程,鄭蒙蒙,王丹,黃曉梅,張亞妮,李碧春.  畜牧獸醫(yī)學報. 2013(11)
[2]胚胎干細胞誘導分化為雄性生殖細胞的研究進展[J]. 孫敏,施青青,李碧春.  生命科學. 2012(01)
[3]表觀遺傳學:生物細胞非編碼RNA調(diào)控的研究進展[J]. 于紅.  遺傳. 2009(11)

博士論文
[1]組蛋白甲基化酶ESET調(diào)控小鼠精原干細胞存活的機理研究[D]. 安俊輝.西北農(nóng)林科技大學 2014



本文編號：2967730