豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型與副豬嗜血桿菌混合感染的診斷及病原分析
發(fā)布時(shí)間：2021-01-10 00:26
為確定河南開封某豬場發(fā)生豬呼吸系統(tǒng)疾病綜合征（PRDC）的病原,本研究無菌采集病死保育豬肺臟、心臟和脾臟等組織樣品,進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)和藥敏試驗(yàn),通過PCR/RT-PCR檢測樣品中豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬流感病毒（SIV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、豬瘟病毒（CSFV）和豬肺炎支原體（Mhp）等病原,并對(duì)核酸陽性病毒性病原的抗原結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行測序和遺傳演化分析。結(jié)果表明,通過細(xì)菌分離培養(yǎng)、形態(tài)觀察、衛(wèi)星現(xiàn)象觀察和16S rRNA基因鑒定,從病死保育豬體內(nèi)分離鑒定出1株副豬嗜血桿菌（Hps）,藥敏實(shí)驗(yàn)表明該菌株對(duì)對(duì)氨芐西林、阿莫西林克拉維酸、頭孢噻呋和四環(huán)素幾種藥物敏感。核酸檢測PRRSV和PCV2核酸陽性,分別命名為PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;進(jìn)一步對(duì)PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的結(jié)構(gòu)基因分析發(fā)現(xiàn),PRRSV/HN-2019與與NADC30分支的毒株親緣關(guān)系較近,屬于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019與PCV-2d分支的毒株親緣關(guān)系較近,屬于PCV-2d分支。綜上所述,...
【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(10)北大核心
【文章頁數(shù)】：9 頁
【部分圖文】：
病死保育豬的纖維素性漿膜炎的病理變化
提取具有明顯病理變化的病豬的病料組織中DNA/RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行可疑病原的PCR擴(kuò)增檢測發(fā)現(xiàn)病料組織中PRRSV和PCV2 2種病原的核酸檢測陽性,SIV、CSFV、PRV、Mhp等2種病原的核酸檢測陰性(圖2),初步鑒定該發(fā)病豬場存在PRRSV和PCV2 2種病原的感染。2.3 致病性毒株的分子流行病學(xué)分析
以PCV2 CapF/PCV2 CapR引物對(duì)進(jìn)行克隆,獲得大小為702 bp的目的條帶。 經(jīng)過測序驗(yàn)證,確定PCV2/HN-2019株的Cap基因長度為702 bp,編碼233個(gè)氨基酸。通過GenBank中的23株P(guān)CV2代表毒株進(jìn)行序列比對(duì),發(fā)現(xiàn)PCV2/HN11-2019株Cap基因與PCV-2d分支的毒株核苷酸序列相似性在最高,均在96%以上;與PCV-2b分支的毒株相似性較低,在93.5%左右;與PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支的相似性最低,在90%左右。基于Cap蛋白氨基酸序列的遺傳演化分析結(jié)果顯示,PCV2/HN11-2019株與PCV-2d分支的毒株親緣關(guān)系最近,屬于PCV-2d亞型;與PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支毒株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。此外,PCV2/HN11-2019株與疫苗株SH株親緣關(guān)系近,與DBN-SX07-1、LG和WH等疫苗株具有一定的遺傳距離,親緣關(guān)系較遠(yuǎn)(圖4)。圖4 PCV2/HN11-2019株cap基因遺傳演化分析
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2014年～2019年P(guān)RRSV主要流行毒株在我國的變化[J]. 張洪亮,張文立,許滸,宋帥杰,趙靜,相麗潤,冷超糧,李真,劉春曉,湯艷東,陳家锃,彭金美,王倩,安同慶,童光志,蔡雪輝,田志軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020(05)
[2]屠宰生豬副豬嗜血桿菌的分離鑒定及藥物敏感性分析[J]. 田昊倫,馮秀,王凱,馮全文,李鑫鑫,范志新,羅麗華,孫穎,周宏超,張彥明,郭抗抗. 中國畜牧獸醫(yī). 2019(07)
[3]豬肺炎支原體PCR快速檢測方法的應(yīng)用研究[J]. 柳麗,張磊,劉蓓蓓,甘源,韋艷娜,馮志新,熊祺琰,劉茂軍,邵國青. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2017(12)
[4]20142015年河南地區(qū)PRRSV的分子檢測及NSP2、ORF5基因變異分析[J]. 郭天準(zhǔn),常洪濤,崔丹丹,王新港,周峰,趙軍,楊霞,李永濤,陳陸,王川慶. 病毒學(xué)報(bào). 2016(03)
[5]豬呼吸道疾病綜合征的防制[J]. 蔡明,黃希慶,劉學(xué)漢,張淑會(huì). 中國畜牧獸醫(yī). 2006(03)
博士論文
[1]天津地區(qū)PRRSV類NADC30毒株的監(jiān)測、分離毒株的基因組特征與致病性分析[D]. 孫英峰.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
碩士論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征病毒類NADC30毒株的分離鑒定、全基因序列測定及分析[D]. 李炎林.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
本文編號(hào)：2967695
【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(10)北大核心
【文章頁數(shù)】：9 頁
【部分圖文】：
病死保育豬的纖維素性漿膜炎的病理變化
提取具有明顯病理變化的病豬的病料組織中DNA/RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行可疑病原的PCR擴(kuò)增檢測發(fā)現(xiàn)病料組織中PRRSV和PCV2 2種病原的核酸檢測陽性,SIV、CSFV、PRV、Mhp等2種病原的核酸檢測陰性(圖2),初步鑒定該發(fā)病豬場存在PRRSV和PCV2 2種病原的感染。2.3 致病性毒株的分子流行病學(xué)分析
以PCV2 CapF/PCV2 CapR引物對(duì)進(jìn)行克隆,獲得大小為702 bp的目的條帶。 經(jīng)過測序驗(yàn)證,確定PCV2/HN-2019株的Cap基因長度為702 bp,編碼233個(gè)氨基酸。通過GenBank中的23株P(guān)CV2代表毒株進(jìn)行序列比對(duì),發(fā)現(xiàn)PCV2/HN11-2019株Cap基因與PCV-2d分支的毒株核苷酸序列相似性在最高,均在96%以上;與PCV-2b分支的毒株相似性較低,在93.5%左右;與PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支的相似性最低,在90%左右。基于Cap蛋白氨基酸序列的遺傳演化分析結(jié)果顯示,PCV2/HN11-2019株與PCV-2d分支的毒株親緣關(guān)系最近,屬于PCV-2d亞型;與PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支毒株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。此外,PCV2/HN11-2019株與疫苗株SH株親緣關(guān)系近,與DBN-SX07-1、LG和WH等疫苗株具有一定的遺傳距離,親緣關(guān)系較遠(yuǎn)(圖4)。圖4 PCV2/HN11-2019株cap基因遺傳演化分析
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2014年～2019年P(guān)RRSV主要流行毒株在我國的變化[J]. 張洪亮,張文立,許滸,宋帥杰,趙靜,相麗潤,冷超糧,李真,劉春曉,湯艷東,陳家锃,彭金美,王倩,安同慶,童光志,蔡雪輝,田志軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020(05)
[2]屠宰生豬副豬嗜血桿菌的分離鑒定及藥物敏感性分析[J]. 田昊倫,馮秀,王凱,馮全文,李鑫鑫,范志新,羅麗華,孫穎,周宏超,張彥明,郭抗抗. 中國畜牧獸醫(yī). 2019(07)
[3]豬肺炎支原體PCR快速檢測方法的應(yīng)用研究[J]. 柳麗,張磊,劉蓓蓓,甘源,韋艷娜,馮志新,熊祺琰,劉茂軍,邵國青. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2017(12)
[4]20142015年河南地區(qū)PRRSV的分子檢測及NSP2、ORF5基因變異分析[J]. 郭天準(zhǔn),常洪濤,崔丹丹,王新港,周峰,趙軍,楊霞,李永濤,陳陸,王川慶. 病毒學(xué)報(bào). 2016(03)
[5]豬呼吸道疾病綜合征的防制[J]. 蔡明,黃希慶,劉學(xué)漢,張淑會(huì). 中國畜牧獸醫(yī). 2006(03)
博士論文
[1]天津地區(qū)PRRSV類NADC30毒株的監(jiān)測、分離毒株的基因組特征與致病性分析[D]. 孫英峰.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
碩士論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征病毒類NADC30毒株的分離鑒定、全基因序列測定及分析[D]. 李炎林.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
本文編號(hào)：2967695
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