本試驗(yàn)主要研究了脂磷壁酸在植物乳桿菌與HT-29細(xì)胞互作及免疫應(yīng)答過(guò)程中的作用。采用冷酚法提取植物乳桿菌脂磷壁酸,用紅外光譜儀及核磁共振儀鑒定該提取物結(jié)構(gòu)。紅外譜圖表征了一種有磷酸甘油結(jié)構(gòu)和有酰胺、糖殘基等基團(tuán)的物質(zhì),符合脂磷壁酸的主要官能團(tuán)結(jié)構(gòu),核磁共振譜圖發(fā)現(xiàn)了甘油和糖基、D-Ala、-NHCOCH3（s）、-CH（CO）CH3（d）等脂磷壁酸的主要結(jié)構(gòu),可斷定此物質(zhì)為脂磷壁酸。研究脂磷壁酸是否在植物乳桿菌粘附過(guò)程中發(fā)揮作用。試驗(yàn)分三個(gè)處理：Ⅰ組用熒光標(biāo)記的細(xì)菌（1×109CFU/mL）處理HT-29細(xì)胞2h；Ⅱ組用50μg/mL脂磷壁酸處理HT-29細(xì)胞2h,再用熒光標(biāo)記的細(xì)菌（1×109CFU/mL）處理HT-29細(xì)胞2h；Ⅲ組用100μg/mL脂磷壁酸處理理HT-29細(xì)胞2h,再用熒光標(biāo)記的細(xì)菌（1×109CFU/mL）處理HT-29細(xì)胞2h。在熒光倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),Ⅰ組細(xì)菌粘附數(shù)為最多,Ⅱ組次之,Ⅲ組最少。可說(shuō)明脂磷壁酸在植物乳桿菌粘附過(guò)程中發(fā)揮作用。與對(duì)照組相比,植物乳桿菌短時(shí)間處理HT-29細(xì)胞,對(duì)其IL-10、IL-12、TNF-a及IL-6的蛋白表達(dá)量均無(wú)顯著影... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 植物乳桿菌研究進(jìn)展
        1.1.1 植物乳桿菌益生作用研究
        1.1.2 植物乳桿菌免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展
        1.1.3 植物乳桿菌的應(yīng)用
        1.1.4 乳酸桿菌粘附作用研究進(jìn)展
    1.2 脂磷壁酸概述
        1.2.1 LTA的粘附定植作用
        1.2.2 LTA的免疫調(diào)節(jié)作用及其作用成分
        1.2.3 LTA的抗體識(shí)別作用
        1.2.4 LTA結(jié)構(gòu)的多樣性
    1.3 LTA提取純化
2 材料與方法
    2.1 植物乳桿菌脂磷壁酸的提取與鑒定
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 研究方法
    2.2 脂磷壁酸在植物乳桿菌粘附、定植過(guò)程中的作用解析
        2.2.1 試驗(yàn)材料
        2.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2.3 試驗(yàn)方法
    2.3 植物乳桿菌及脂磷壁酸對(duì)HT-29細(xì)胞免疫刺激的研究
        2.3.1 試驗(yàn)材料
        2.3.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.3.3 試驗(yàn)方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 植物乳桿菌脂磷壁酸鑒定
        3.1.1 植物乳桿菌脂磷壁酸的紅外圖譜鑒定
        3.1.2 植物乳桿菌脂磷壁酸的核磁共振圖譜鑒定
    3.2 脂磷壁酸對(duì)HT-29細(xì)胞粘附作用
    3.3 植物乳桿菌及pLTA對(duì)HT-29細(xì)胞免疫水平的影響
        3.3.1 植物乳桿菌及pLTA短時(shí)間作用HT-29細(xì)胞對(duì)免疫因子蛋白水平的影響
        3.3.2 植物乳桿菌及pLTA長(zhǎng)時(shí)間作用HT-29細(xì)胞對(duì)免疫因子蛋白水平的影響
        3.3.3 植物乳桿菌及pLTA對(duì)HT-29細(xì)胞的免疫相關(guān)因子的RNA表達(dá)的影響
4 討論
    4.1 脂磷壁酸結(jié)構(gòu)圖譜分析
    4.2 脂磷壁酸在植物乳桿菌與HT-29細(xì)胞粘附過(guò)程中的作用
    4.3 植物乳桿菌對(duì)HT-29細(xì)胞免疫功能的影響
    4.4 植物乳桿菌脂磷壁酸（pLTA）對(duì)HT-29細(xì)胞免疫功能的影響
5 結(jié)論
    5.1 總體結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 不足之處及進(jìn)一步解決的問(wèn)題
6 參考文獻(xiàn)
7 附錄
8 致謝
9 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]磷壁酸在細(xì)菌黏附、定植及免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中的作用[J]. 王進(jìn)波,倪江,高權(quán)新,齊莉莉.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2013(09)
[2]乳酸桿菌與腸道黏附相關(guān)表面因子及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 汪海峰,章文明,汪以真,劉建新.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2011(02)
[3]A群鏈球菌脂磷壁酸的提取純化及其抑瘤活性[J]. 白瑩,孫民,邱芳萍,王志兵.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2010(04)
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[6]植物乳桿菌黏附大鼠小腸黏液及機(jī)制的研究[J]. 孫進(jìn),樂(lè)國(guó)偉,施用暉,蘇廣偉.  微生物學(xué)雜志. 2006(02)
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[9]生物合成γ-氨基丁酸的乳酸菌的篩選[J]. 許建軍,江波,許時(shí)嬰.  食品科技. 2002(10)
[10]非離子型去垢劑TritonX-114提取兩歧雙歧桿菌的脂磷壁酸[J]. 樂(lè)軍,胡宏.  中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 1997(04)

博士論文
[1]內(nèi)蒙古牧區(qū)傳統(tǒng)乳制品中乳桿菌生物學(xué)特性及其益生作用的研究[D]. 周雨霞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào)：2966886