豬細(xì)小病毒（Porcine parvovirus,PPV）屬細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒屬。是引起母豬繁殖障礙的主要病原體之一。主要表現(xiàn)為初產(chǎn)母豬流產(chǎn),胎兒和胚胎的感染和死亡,產(chǎn)出死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔豬等,而受感染母豬本身通常并不表現(xiàn)臨床癥狀。仔豬會(huì)出現(xiàn)生長受阻,偶有皮炎和腹瀉癥狀。感染公豬則表現(xiàn)為精液品質(zhì)下降。PPV又常同豬偽狂犬病病毒（PRV）、乙型腦炎病毒（JEV）、豬圓環(huán)病毒（PCV）、豬瘟（CSFV）、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒（PRRSV）等混合感染而加重了其危害。PPV感染普遍存在于世界各地的豬群中,嚴(yán)重影響和制約著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。PPV自二十世紀(jì)六十年代被發(fā)現(xiàn)以來,許多國家先后分離到該病毒和檢測(cè)到其抗體,抗體檢出率為50%～80%,其中我國高達(dá)80%。近年來,PPV感染和造成的危害呈上升趨勢(shì),給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本試驗(yàn)從采集疑似感染PPV的病料中分離出了 4株P(guān)PV,進(jìn)行了全基因組測(cè)序及相關(guān)生物學(xué)特性研究,并對(duì)PPV的滅活條件進(jìn)行了探索,對(duì)河南地區(qū)分離株進(jìn)行豚鼠免疫試驗(yàn),以期為臨床上該病的防治提供試驗(yàn)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)從流產(chǎn)死胎及木乃伊胎中分離出了 4株P(guān)PV病毒,... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－丨組織病料中ＰＰＶ的ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??Ｆｉ．?１－１?ＰＣＲ?ａｍｌｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰＰＶ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｏｒａｎｓ??

＿．ｘ．ｔｐ?—??ｌＣＣｂｐ?—??圖１－丨組織病料中ＰＰＶ的ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??Ｆｉｇ．?１－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰＰＶ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｏｒｇａｎｓ??Ｍ．?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?２０００：?１．?ＰＰＶ檢測(cè)引物的ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物；２．陰性對(duì)照??Ｍ．?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ２０００；?１．?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔ?ｏｆ?ＰＰＶ：?２．?Ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ??陽性克隆測(cè)序結(jié)果表明ＰＣＲ擴(kuò)增片段長度為１９５?ｂｐ，與預(yù)期結(jié)果相符合。將陽性片段序??列與ＧｅｎＢａｎｋ中已發(fā)表的多株豬細(xì)小病毒序列進(jìn)行核苷酸同源性比較后，發(fā)現(xiàn)同源性可達(dá)到??１００％。測(cè)序結(jié)果如下：??ＣＣＡＡＡＡＡＴＧＣＡＡＡＣＣＣＣＡＡＴＡＡＡＴＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＡＣＴＣＴＣＡＧＡＴＴＴＣＣＡＣＡＴＣＡＧ??ＴＧＡＡＡＡＣＴＴＣＧＣＣＡＧＣＧＧＡＣＡＡＣＡＡＣＴＡＣＧＣＡＧＣＡＡＣＴＣＣＡＡＴＡＣＡＧＧＡＧＧＡＣＣＴＧＧ??ＡＴＴＴＡＧＣＴＴＴＡＧＣＣＴＴＧＧＡＧＣＣＧＴＧＧＡＧＣＧＡＧＣＣＡＡＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＴＴＴＣＡＣＣＡＡＣＣＴ??ＧＣＡＣＴＴＡＡＣＴＣＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＡＧＡＴ??２．２?ＰＰＶ分離株的分離培養(yǎng)與細(xì)胞病變觀察??將處理后的病料接種于ＳＴ細(xì)胞，盲傳至第５代細(xì)胞出現(xiàn)輕微的ＣＰＥ，第１０代時(shí)細(xì)胞??出現(xiàn)了較穩(wěn)定的ＣＰＥ？正常的ＳＴ細(xì)胞緊密地貼壁生長，接毒第１０代后細(xì)胞內(nèi)顆粒增多，??隨后出現(xiàn)病毒蝕斑，蝕斑周圍細(xì)胞圓縮，接著大片脫落，細(xì)胞拉網(wǎng)，很多細(xì)胞發(fā)生裂解、破??碎

２．６間接免疫焚光鑒定結(jié)果??將ＰＰＶ分離株的細(xì)胞毒做適當(dāng)處理后，按照常規(guī)免疫熒光操作方法。可在倒置熒光顯??微鏡下看到細(xì)胞核或胞漿內(nèi)呈閃亮蘋果綠色顆粒型熒光（圖１４）：??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]豬細(xì)小病毒YL株序列分析及其VP2基因原核表達(dá)[J]. 時(shí)樂,黃勇,許信剛,童德文.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(06)
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博士論文
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碩士論文
[1]豬細(xì)小病毒河南流行株的分離、鑒定及部分生物學(xué)特性研究[D]. 顧帥.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]豬偽狂犬病、細(xì)小病毒病和乙型腦炎三聯(lián)滅活疫苗的研制[D]. 何永龍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]河南株P(guān)PV的分離鑒定及VP2基因的克隆與序列分析[D]. 王宏魁.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[4]豬細(xì)小病毒分離株感染母豬及胎豬的體內(nèi)組織分布及病理變化[D]. 苗嵐飛.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]豬細(xì)小病毒NS1與VP2基因的研究[D]. 蘇曉健.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]豬細(xì)小病毒SR-1株全基因測(cè)序研究[D]. 張宇.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[7]豬細(xì)小病毒（PPV-SC1）的分離、鑒定及其非結(jié)構(gòu)蛋白NS1基因的克隆和序列分析[D]. 殷華平.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004



本文編號(hào)：2963187