動物肌內(nèi)脂肪沉積是一個復(fù)雜的生物學(xué)過程,涉及肌肉細(xì)胞分化、脂肪細(xì)胞分化及甘油三酯代謝等多個方面。過氧化物酶體增殖物活化受體γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ, PPARγ）基因在動物的脂肪細(xì)胞分化過程中具有核心調(diào)控作用,但是PPARγ基因的表達(dá)水平與肌內(nèi)脂肪含量之間的關(guān)系尚不明確。本研究旨在包裝牛（Bos taurus） PPARγ基因腺病毒（Adenovirus）,并分析過表達(dá)PPARγ對肌肉細(xì)胞脂質(zhì)沉積的影響。將PPARγ亞克隆至腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV后,構(gòu)建載體pAdTrackCMV-PPARγ。將線性化的pAdTrack-CMV-PPARγ載體和腺病毒骨架載體pAdEasy-1共轉(zhuǎn)化至重組細(xì)菌大腸桿菌（Escherichia coli） BJ5183細(xì)胞中,在細(xì)菌中同源重組后,成功構(gòu)建腺病毒骨架載體pAdEasy-1-PPARγ。將線性化的pAdEasy-1-PPARγ轉(zhuǎn)入人（Homo sapiens） 293A細(xì)胞中包裝并擴(kuò)增PPARγ腺病毒。用PPARγ腺病毒感染牛肌肉細(xì)胞后,用實(shí)時熒光定量PCR （q... 

【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2020,28(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 主要試劑藥品
    1.3 主要儀器設(shè)備
    1.4 重組腺病毒載體的構(gòu)建
    1.5 重組腺病毒的包裝
    1.6 腺病毒滴度的測定
    1.7 腺病毒感染牛肌肉細(xì)胞
    1.8 使用qRT-PCR檢測過表達(dá)PPARγ對肌肉細(xì)胞的影響
2 結(jié)果與分析
    2.1 構(gòu)建了PPARγ重組腺病毒載體
    2.2 包裝并擴(kuò)增了PPARγ腺病毒
    2.3 過表達(dá)PPARγ對牛肌肉細(xì)胞的影響
3 討論
4 結(jié)論



本文編號：2961699