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鵝褪黑素受體Mel-1c基因的克隆和血清褪黑素含量的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-05 17:14
  褪黑素(melatonin, MLT)是主要由松果體合成分泌的一種神經(jīng)內(nèi)分泌激素,其分泌規(guī)律呈典型的晝夜節(jié)律以及季節(jié)性變化,褪黑素的濃度在夜間升高,白天降低;在長(zhǎng)日照季節(jié),褪黑素濃度較低,短日照季節(jié)濃度較高。褪黑素通過作用于下丘腦-垂體-性腺軸中的多個(gè)位點(diǎn),調(diào)節(jié)光照信息和生殖系統(tǒng)的關(guān)系,在季節(jié)性繁殖動(dòng)物對(duì)于光照敏感性的調(diào)控上,褪黑素就表現(xiàn)為刺激短日照繁殖動(dòng)物的繁殖活動(dòng),抑制長(zhǎng)日照繁殖動(dòng)物的繁殖活動(dòng),褪黑素還參與動(dòng)物的生殖、內(nèi)分泌、免疫和神經(jīng)系統(tǒng)的生物調(diào)節(jié)。褪黑素通過與受體結(jié)合來發(fā)揮其生理功能,鵝體內(nèi)存在三種褪黑素受體Mel-la、Mel-lb、Mel-lc,其中Mel-lc受體只存在于禽類、兩棲類和魚類中,未在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)。本試驗(yàn)旨在克隆出鵝的褪黑素受體Mel-lc基因的全長(zhǎng)編碼序列,尋找鵝Mel-1c基因編碼區(qū)SNP位點(diǎn)的分布情況。并測(cè)定鵝血清中褪黑素的含量,分析其與品種和季節(jié)間的關(guān)系,以期為通過調(diào)控褪黑素來提高動(dòng)物繁殖性能提供理論依據(jù)。本研究選用鵝為研究對(duì)象,提取腦組織的總RNA,采用SMARTerRACE技術(shù),擴(kuò)增得到1158bp的鵝Mel-lc的DNA序列,通過NCBI中已經(jīng)... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 褪黑素簡(jiǎn)介
    2 褪黑素的生物合成、代謝與分布
        2.1 褪黑素的生物合成
        2.2 褪黑素的代謝
        2.3 褪黑激素分布和調(diào)節(jié)
        2.4 褪黑素的節(jié)律變化和調(diào)節(jié)機(jī)制
    3 褪黑素的生理作用
        3.1 褪黑素對(duì)繁殖系統(tǒng)的作用
    4 褪黑素受體
        4.1 命名與分類
        4.2 結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特性
        4.3 體內(nèi)分布
    5 SMARTer RACE技術(shù)原理
        5.1 SMARTer RACE技術(shù)簡(jiǎn)介
        5.2 RACE引物的設(shè)計(jì)
        5.3 5'RACE反應(yīng)試驗(yàn)原理
        5.4 SMARTer RACE技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)
        5.5 RACE技術(shù)中的常見問題及對(duì)策
    6 SNP分子標(biāo)記
    7 試驗(yàn)研究?jī)?nèi)容與意義
第二章 試驗(yàn)內(nèi)容
    試驗(yàn)一 鵝褪黑素受體Mel-1c基因的克隆與多態(tài)性分析
        1 引言
        2 試驗(yàn)材料
            2.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            2.2 主要試劑
            2.3 主要儀器
        3 試驗(yàn)方法
            3.1 SMARTer RACE擴(kuò)增Mel-1c基因
            3.2 序列分析及進(jìn)化樹構(gòu)建
            3.3 Mel-1c基因多態(tài)性分析
        4 結(jié)果分析
            4.1 保守區(qū)域擴(kuò)增PCR產(chǎn)物擴(kuò)增結(jié)果
            4.2 總RNA的提取
            4.3 Mel-1c基因序列的克隆、測(cè)序
            4.4 序列分析
            4.5 Mel-1c基因序列同源性比較和進(jìn)化樹分析
            4.6 DNA提取及PCR擴(kuò)增
            4.7 PCR產(chǎn)物測(cè)序分析SNP位點(diǎn)
        5 討論
    試驗(yàn)二 鵝血清褪黑素含量的研究
        1 引言
        2 試驗(yàn)材料
            2.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            2.2 樣本的采集與保存
            2.3 主要試劑
            2.4 主要儀器
        3 試驗(yàn)方法
            3.1 樣品的稀釋
            3.2 樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品中褪黑素的提取
            3.3 ELISA試驗(yàn)測(cè)定樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的褪黑素含量
            3.4 褪黑激素含量的計(jì)算方法
            3.5 統(tǒng)計(jì)分析
        4 結(jié)果分析
        5 討論
第三章 結(jié)論
    1 主要研究成果
    2 值得進(jìn)一步研究的相關(guān)問題
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]皖西白鵝產(chǎn)蛋特性研究[J]. 岳理,姜潤(rùn)深,耿照玉,楊秀娟,袁紹友,劉春喜.  河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(05)
[2]褪黑激素-牛血清蛋白主動(dòng)免疫對(duì)皖西白鵝性腺表征的影響[J]. 凌明亮,黃仁術(shù).  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(01)
[3]褪黑激素及其生理功能研究進(jìn)展[J]. 焦傳珍.  生物學(xué)教學(xué). 2005(02)
[4]褪黑激素對(duì)動(dòng)物生殖的作用及其調(diào)控[J]. 茆達(dá)干,楊利國(guó),吳結(jié)革.  草食家畜. 2001(03)
[5]人胚胎腎上腺皮質(zhì)褪黑素受體亞型蛋白的分布[J]. 陸祖謙,劉志民,何金,劉會(huì)敏,趙瑛,彭樹勛.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(01)
[6]人胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)褪黑素受體的鑒定及生物學(xué)特性[J]. 趙瑛,邵福源,何淑芬,彭樹勛.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(01)
[7]人胚胎甲狀腺褪黑素受體mRNA的檢測(cè)[J]. 孫中安,劉志民,黃超.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(11)
[8]松果體研究進(jìn)展[J]. 葉百寬,郭霞珍.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2000(01)
[9]SNP-為人類基因組描繪新的藍(lán)圖[J]. 劉萬清,賀林.  遺傳. 1998(06)
[10]鳥類及鼠類的胸腺、腔上囊及脾臟褪黑素受體的鑒定及意義[J]. 趙瑛,劉志民,彭樹勛.  上海免疫學(xué)雜志. 1998(02)



本文編號(hào):2959001

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