氧化應(yīng)激是機(jī)體在遭受有害刺激時,體內(nèi)活性氧產(chǎn)生過多,氧化程度超出氧化物的清除,導(dǎo)致多種形式組織損傷的過程。本研究首先利用過氧化氫（H2O2）誘導(dǎo)的仔豬腸上皮細(xì)胞（porcine intestinal epithelial cell-1,IPEC-1）氧化應(yīng)激模型篩選出一株抗氧化功能較好的芽孢桿菌菌株——解淀粉芽孢桿菌SC06。隨后通過動物試驗(yàn)研究了 SC06對仔豬生長、腸道抗氧化狀態(tài)和自噬水平的影響,并通過研究SC06對IPEC-1的保護(hù)作用,揭示了 SC06改善機(jī)體抗氧化功能的作用機(jī)理,最后用高脂日糧誘導(dǎo)小鼠氧化應(yīng)激和脂肪肝,以探究SC06改善小鼠氧化應(yīng)激、肝臟脂肪變性和心理福利的作用,初步揭示SC06調(diào)控宿主抗氧化能力和提高動物健康水平的分子機(jī)理。本研究共包括以下5部分試驗(yàn):試驗(yàn)一體外氧化應(yīng)激模型的建立及具抗氧化功能芽孢桿菌的篩選（1）IPEC-1氧化應(yīng)激模型的建立:采用不同濃度H202處理IPEC-1不同時間,IPEC-1細(xì)胞活力測定結(jié)果顯示:當(dāng)用300 μmol/L H2O2處理細(xì)胞12h時,細(xì)胞活力下降一半。概率單位法計(jì)算結(jié)果為,當(dāng)用H202處理細(xì)胞12h時,H2O2的半數(shù)致... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：141 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?ＲＯＳ的來源??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｓｏｕｒｃｅｓ?ｏｆ?ＲＯＳ??

在過去幾十年中，人們發(fā)現(xiàn)不同種的益生菌可通過不同的方式提高宿主抗氧??化能力。但是，關(guān)于益生菌抗氧化機(jī)理的研究較少。因此，以下內(nèi)容對已知的關(guān)??于益生菌抗氧化機(jī)制的研究進(jìn)行了總結(jié)（圖１．２）。??１．６．１螯合金屬離子能力??螯合劑，例如乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）、水合紅菲繞啉二磺酸鈉（ＢＰＳ）、青??霉胺和去鐵敏等，能夠捕獲金屬鐵離子并抑制金屬離子氧化（Ｇｕｔｔｅｒｉｄｇｅ?ｅｔａｌ．??１９７９）。１９９９年Ｌｉｎ和Ｙｅｎ測定了?１９種ＬＡＢ螯合金屬離子（鐵離子和銅離子）??的能力（Ｌｉｎ?ａｎｄ?Ｙｅｎ，?１９９９）。結(jié)果顯示嗜熱鏈球菌８２１螯合鐵離子和銅離子的??能力最強(qiáng)，且其他菌株也有螯合鐵離子和銅離子的能力。此外，另一研究發(fā)現(xiàn)干??５??

２．３．１?ＩＰＥＣ－１氧化應(yīng)激模型的建立??隨著Ｈ２０２濃度及處理時間的增加，ＩＰＥＣ－１的存活力呈下降趨勢。當(dāng)用３００??ｐｍｏｌ／ＬＨ２０２處理細(xì)胞１２ｈ時，細(xì)胞活力下降一半（圖２．１）。通過概率單位法??計(jì)算結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)用Ｈ２０２處理細(xì)胞１２?ｈ時，Ｈ２０２的半數(shù)致死劑量為３２３．５９??｜ｉｍｏｌ／Ｌ。因此，后續(xù)試驗(yàn)可用３００?｜ｉｍｏｌ／Ｌ?Ｈ２〇２處理細(xì)胞１２?ｈ以誘導(dǎo)氧化應(yīng)激。??１５０－｜??丨?一?１?ｈ??７?－＊？?３?ｈ??＾?１００－、、?６ｈ??１???＾Ｔ?＋?１２ｈ??°?Ｔ＾Ｓ＾ｔ??０＿?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２００?４００?６００?８００??Ｈ２〇２?ｆｉｎａｌ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（ｐｍｏｌ／Ｌ）??圖２．１Ｈ２０２對ＩＰＥＣ－１活性的影響（《?＝?６）??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｗｉｔｈ?Ｈ２〇２?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．?ＩＰＥＣ－１?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ｈ２Ｏ２?（〇，?ｌ〇〇，?２００，?３００，?４００，?５００，?６００，?７００?ｊｉｍｏｌ／Ｌ）?ｆｏｒ?１，３，?６，?１２?ｈ．?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ??ｗａｓ?ｄｅｔｅｉｍｉｎｅｄ?ｂｙ?ＭＴＴ?ａｓｓａｙ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｇｉｖｅｎ?ａｓ?ｍｅａｎ?士?ＳＤ?（／？?＝?６）．??２．３．２?ＩＰＥＣ－１氧化應(yīng)激生物指標(biāo)的確定??如表２．３所示，冊－７的表達(dá)與Ｈ２０２處理時間呈正相關(guān)，且Ｒ２達(dá)到０．９６４１。??此外

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]苜草素對產(chǎn)蛋高峰期蛋雞脂肪肝出血綜合征預(yù)防作用研究[J]. 楊長進(jìn),董曉芳,佟建明,高玉鵬.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2015(07)
[2]日糧中添加枯草芽孢桿菌B10對高脂日糧誘導(dǎo)的小鼠脂肪代謝及抗氧化的影響（英文）[J]. Kai LEI,Ya-li LI,Yang WANG,Jing WEN,Hong-zhao WU,Dong-you YU,Wei-fen LI.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(06)
[3]Application of Probiotics in Pig Industry as a Substitute of Antibiotics[J]. Sha Wenfeng,Zhu Juan,Gu Yongjian,Dai Hui,Qiu Liangwei.  Animal Husbandry and Feed Science. 2015(01)
[4]Plasma metabolomic profiles and immune responses of piglets after weaning and challenge with E.coli[J]. Sugiharto Sugiharto,Mette S Hedemann,Charlotte Lauridsen.  Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(03)
[5]Ingestion of Lactobacillus strain reduces anxiety and improves cognitive function in the hyperammonemia rat[J]. LUO Jia,WANG Tao,LIANG Shan,HU Xu,LI Wei,JIN Feng.  Science China（Life Sciences）. 2014(03)
[6]益生菌替代抗生素控制肉種雞壞死性腸炎的效果[J]. Venkat Shelke,Prakash Chandra Saini,黃生樹.  飼料工業(yè). 2013(21)
[7]Protective effects of two Lactobacillus plantarum strains in hyperlipidemic mice[J]. Li-Xin Wang,Kai Liu,Da-Wei Gao,Ji-Kui Hao.  World Journal of Gastroenterology. 2013(20)
[8]農(nóng)場動物福利的評估[J]. 尹國安,孫國鵬.  家畜生態(tài)學(xué)報. 2013(05)
[9]農(nóng)場動物福利現(xiàn)狀及對策[J]. 顧招兵,楊飛云,林保忠,劉作華.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2011(03)
[10]甜菜堿預(yù)防蛋雞脂肪肝出血綜合征的研究[J]. 張彩英,曹華斌,胡國良,郭小權(quán),曹洪峰,黃愛民.  中國畜牧獸醫(yī). 2010(10)

碩士論文
[1]用益生菌制劑代替斷奶仔豬日糧中抗生素的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 肖宏德.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號：2958588