豬繁殖與呼吸障礙綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）俗稱“豬藍耳病”，是由豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratorysyndrome virus，PRRSV）引起的一種具有高發(fā)病率和死亡率的接觸性傳染病。PRRSV共有兩種基因型：歐洲型（Ⅰ型，LV株）和美洲型（Ⅱ型，VR2332株）；而我國流行的PRRSV以美洲型為主。研究證明，PRRSV GP5蛋白是由ORF5基因編碼的病毒的高度糖基化的囊膜蛋白，全長200個氨基酸，含有多個中和性抗原表位，具有誘導機體產生中和性抗體的能力，被認為是研制基因工程疫苗和亞單位疫苗的良好靶蛋白，成為PRRSV的研究熱點。但目前國內尚無針對GP5蛋白抗體檢測的商品化ELISA試劑盒，無法檢測免疫機體內GP5蛋白的抗體水平，不能對免疫后中和性抗體的水平進行有效評價。為解決這一難題，開展了本項研究。為獲得重組GP5蛋白的高效表達，本研究利用RT-PCR技術從PRRSV SD-JN株（美洲型）的病毒基因組RNA中擴增編碼GP5蛋白的... 

【文章來源】：山東農業(yè)大學山東省

【文章頁數】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PRRSV膜蛋白的拓撲結構圖

法RRSV 毒株5 細胞和高致病性豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒（HP-PRRSV）SD學院動物疫病防治與繁育重點實驗室保存。體桿菌 DH5α 為山東省農業(yè)科學院動物疫病防治與繁育重點實驗室 BL21(DE3) pLysS 購自 TransGen 公司pMD19-T Vector 購自 TaKaRa 公司；載體的物理圖譜如圖 2 所示：

圖 3 pET-32a(+)原核表達載體物理圖譜e physical map of pET-32a (+) prokaryotic expression隆腹水抗體為中國農業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所童鼠 IgG（H+L）抗體和 HRP 標記的山羊抗豬 I性血清采自健康豬， 經 IDEXX 公司抗體檢測環(huán)病毒（PCV2）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂血清由本實驗室制備并保存。轉錄酶 Prime ScriptTMOne Step RT-PCR Kit，DL限公司。DNATaq 聚合酶、T4 DNA 連接酶、

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：2958406