抗球蟲藥和活疫苗免疫是目前防治雞球蟲病的主要手段,但存在球蟲產(chǎn)生耐藥性、藥物殘留以及球蟲活疫苗安全性差,免疫效果不理想等問題而得不到廣泛應(yīng)用,因此,研發(fā)新型球蟲疫苗成為預(yù)防雞球蟲病的主要發(fā)展方向。本研究克隆E.tenella HB株AMA-1基因與SO7基因分別與IL-2和pPIC9串聯(lián),構(gòu)建免疫調(diào)節(jié)型真核表達(dá)載體GS115-pPIC9-IL-2-AMA-1、GS115-pPIC9-IL-2-SO7并進(jìn)行蛋白表達(dá),用純化后的重組蛋白IL-2-AMA-1及IL-2-SO7對(duì)雞進(jìn)行免疫保護(hù)性試驗(yàn),綜合評(píng)價(jià)其抗球蟲效果、免疫原性和抗氧化能力,為以后研制柔嫩艾美耳球蟲核酸疫苗提供理論依據(jù)。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.E.tenella HB株AMA-1基因、SO7基因克隆與鑒定及生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示:成功克隆了E.tenella HB株AMA-1基因和SO7基因。其中,AMA-1基因全長為1 617bp,編碼535個(gè)氨基酸,預(yù)測蛋白具有信號(hào)肽及跨膜結(jié)構(gòu);SO7基因全長為645bp,編碼215個(gè)氨基酸,預(yù)測蛋白具有信號(hào)肽但無跨膜結(jié)構(gòu)。2.E.tenella HB株免疫調(diào)節(jié)型真核表達(dá)載體GS115-pPI... 

【文章來源】：河北科技師范學(xué)院河北省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

E.tenellaHB株AMA-1基因擴(kuò)增結(jié)果

圖 2-1 E.tenella HB 株 AMA-1 基因擴(kuò)增結(jié)果re 2-1Amplification results of E.tenella HB strain AMA-. E.tenella HB 株 AMA-1 基因；M.DL2000 DNAMark HB 株 AMA-1 基因的克隆與鑒定的陽性重組質(zhì)粒 pMD18-T-AMA-1 進(jìn)行 PCR ，用質(zhì)量濃度為 10g/L 的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行0bp 的位置有特異性條帶，雙酶切鑒定結(jié)果顯示 1 600bp，另一條大小約為 2 600bp 的載體片段lla HB 株的 AMA-1 基因成功克隆到 pMD18-T

圖 2-3 E.tenella HB 株 AMA-1 基因雙酶切鑒定結(jié)re 2-3 The double enzyme digestion identification of E.tenella HB strain AMA-1 geneB 株 AMA-1 基因雙酶切結(jié)果;M.DL2000 DNAMB 株 AMA-1 基因序列的測定與分析正確的陽性重組質(zhì)粒 pMD18-T-AMA-1 進(jìn)行DS 區(qū)全長 1 617bp，含有 1 個(gè) 1 608bp 的開，與 GenBank 中發(fā)表的 AMA-1（E.tenella）45 位由 G 變?yōu)榱?C，第 421 位 G 變?yōu)榱?變?yōu)榱?G，第 905 位 C 變?yōu)榱?G，第 1 18

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[3]雞柔嫩艾美耳球蟲多表位亞單位疫苗的構(gòu)建與免疫保護(hù)效果的評(píng)價(jià)[D]. 韓林臻.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
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[5]表達(dá)雞球蟲EtMIC3和EtAMAI沙門氏菌活載體疫苗的構(gòu)建及免疫效果的研究[D]. 呂俊峰.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
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[7]四種雞球蟲多價(jià)DNA疫苗免疫程序及其穩(wěn)定性研究[D]. 姜榮芝.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[8]雞柔嫩艾美球蟲重組SO7抗原的免疫保護(hù)作用[D]. 彭金彪.揚(yáng)州大學(xué) 2007
[9]雞艾美耳球蟲不同種株ITS-1、ITS-2序列的克隆和分析比較[D]. 薛方民.山東師范大學(xué) 2007



本文編號(hào)：2935491