高產纖維分解酶木霉和黑曲霉誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化
發(fā)布時間:2020-12-21 20:38
我國能量飼料存在較大缺口,2016年玉米全年進口量達到了330萬t。秸稈產量豐富,蘊含大量潛在能值。但秸稈纖維含量高,不易被動物消化利用,若經(jīng)科學處理可作為能量資源的補充。1.通過對7株木霉菌株,利用DNS酶活測定和玉米秸稈剛果紅培養(yǎng)基法,篩選出高產纖維分解酶的菌株,為其高效篩選提供參考。2.對篩選出的木霉菌株和黑曲霉(實驗室保藏菌)進行誘變選育,(紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯復合誘變)獲得產纖維分解酶高的突變菌,并對其產酶發(fā)酵條件和水解秸稈能力進行研究。(1)木霉和黑曲霉經(jīng)紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯復合誘變篩選出了一株突變菌康氏木霉UH-1和黑曲霉X1U4-1。與原菌相比,康氏木霉UH-1木聚糖酶提高了42.7%,纖維素酶提高了78.5%。黑曲霉X1U4-1濾紙酶提高了66.7%。(2)康氏木霉UH-1最適的固態(tài)發(fā)酵條件為硫酸銨添加量2%、接種量1.1 ml、含水量67%、發(fā)酵時間84 h,在此條件下濾紙酶活達到0.86 U/g、纖維素酶活99.81 U/g、木聚糖酶活1150.32 U/g。黑曲霉X1U4-1最適固態(tài)發(fā)酵條件為發(fā)酵時間72 h、玉米芯:麩皮=3:7、接...
【文章來源】:內蒙古農業(yè)大學內蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
木霉菌產透明圈情況
產纖維分解酶菌株初篩和復篩:在最佳致死率條件下,經(jīng)多輪紫外突變菌株長得快,菌絲短、產孢子晚、透明圈大的菌落用 0.9%的后涂到傳代培養(yǎng)基上,培養(yǎng) 4-6 天長出單菌落后收集保藏并稀釋成體發(fā)酵培養(yǎng)基上進行發(fā)酵測定其纖維素酶活、木聚糖酶活和濾紙酶小確定高產纖維分解菌株。變菌紫外、化學交叉復合誘變菌紫外、化學交叉復合誘變步驟同上述一致,挑選出最優(yōu)突變菌與分析子適宜萌發(fā)時間
圖 4 木霉不同化學反應時間下的致死率Fig. 4 Mortality of trichoderma under different chemical reaction tim霉在化學誘變不同反應時間孢子致死率,從圖 4 中看出康氏度為 20%時反應 30 min 致死率達到了 85%以上,綠色木霉 13%時反應 30 min 致死率達到了 85%以上。因此康氏木霉 13006 佳化學誘變反應時間為 30 min。菌初篩與復篩霉 13006 和綠色木霉 13010 經(jīng)多輪紫外誘變和化學誘變處理,養(yǎng)基上培養(yǎng) 7d 后透明圈直徑較大的突變株,紫外誘變和化學見圖 1-5,初篩突變菌株在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中各個酶活,見表
【參考文獻】:
期刊論文
[1]溶解性多糖單加氧酶的研究進展[J]. 孫小寶,萬嘉欣,曹佳雯,斯越秀,王謙. 生物工程學報. 2018(02)
[2]固態(tài)生物發(fā)酵研究進展與未來發(fā)展趨勢[J]. 張鐵鷹. 飼料與畜牧. 2017(17)
[3]微生物降解玉米秸稈的研究進展[J]. 張斯童,蘭雪,李哲,陳光. 吉林農業(yè)大學學報. 2016(05)
[4]綠色木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產纖維素酶的研究[J]. 姜伯玲,王曙陽,李文建,董妙音,陳積紅,劉敬,胡偉. 中國釀造. 2015(07)
[5]中國飼料工業(yè)發(fā)展若干重大問題探討[J]. 蔡輝益. 飼料工業(yè). 2012(10)
[6]里氏木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產纖維素酶及其水解特性[J]. 宋娜娜,宋向陽,歐陽嘉,勇強. 生物加工過程. 2010(05)
[7]固態(tài)發(fā)酵麩皮和玉米芯生產擬康氏木霉孢子的研究[J]. 孫斐,陳靠山,張鵬英. 中國農學通報. 2010(06)
[8]微生物降解纖維素的研究概況[J]. 文少白,李勤奮,侯憲文,李光義,鄧曉. 中國農學通報. 2010(01)
[9]纖維素酶在反芻動物營養(yǎng)中的研究進展[J]. 邱定杰,劉慶華. 福建畜牧獸醫(yī). 2008(S1)
[10]玉米秸桿發(fā)酵生產蛋白飼料的研究[J]. 李海紅,同幟,仝攀瑞. 西北大學學報(自然科學版). 2003(06)
博士論文
[1]復合酶處理玉米秸稈對肉羊生產性能及破解纖維結構機制的研究[D]. 王紅梅.中國農業(yè)科學院 2017
[2]玉米深加工企業(yè)成長動力的作用機理研究[D]. 李銳.吉林農業(yè)大學 2013
[3]木霉菌株產酶培養(yǎng)及其特定底物酶解過程研究[D]. 馮月.北京林業(yè)大學 2012
[4]康氏木霉AS3.2774纖維素酶系的誘導、阻遏、純化及鑒定研究[D]. 林元山.廣西大學 2011
[5]飼用酶制劑生物學價值評價技術研究[D]. 王寧娟.中國農業(yè)科學院 2009
[6]固態(tài)發(fā)酵植酸酶、溶菌酶對肉仔雞及仔豬的應用研究[D]. 朱忠珂.西北農林科技大學 2008
碩士論文
[1]利用FTIR技術評定玉米秸稈營養(yǎng)價值的研究[D]. 丁雪.東北農業(yè)大學 2016
[2]木聚糖酶產生菌的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及其酶學性質研究[D]. 馮波.湖南農業(yè)大學 2016
[3]提高木霉屬纖維素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究[D]. 李敏霞.齊魯工業(yè)大學 2014
[4]纖維素酶和半纖維素酶高產菌株的篩選[D]. 董桓.河北大學 2014
[5]一株產纖維素酶菌株的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 楊麗娜.西北農林科技大學 2013
[6]一株產纖維素酶真菌的篩選鑒定、酶學性質和發(fā)酵產酶條件的研究[D]. 潘樂毅.湖南農業(yè)大學 2012
[7]里氏木霉Rut-C30產纖維素酶條件優(yōu)化及酶解生物質的基礎研究[D]. 李勇昊.吉林大學 2012
[8]稻草纖維降解菌的選育及其應用[D]. 初世宇.湖南農業(yè)大學 2011
[9]秸稈纖維素高效降解菌株的篩選及對秸稈降解效果初步研究[D]. 殷中偉.中國農業(yè)科學院 2010
[10]產幾丁質酶木霉的誘變選育及對玉米紋枯病的生物防治[D]. 趙丹萍.四川農業(yè)大學 2010
本文編號:2930468
【文章來源】:內蒙古農業(yè)大學內蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
木霉菌產透明圈情況
產纖維分解酶菌株初篩和復篩:在最佳致死率條件下,經(jīng)多輪紫外突變菌株長得快,菌絲短、產孢子晚、透明圈大的菌落用 0.9%的后涂到傳代培養(yǎng)基上,培養(yǎng) 4-6 天長出單菌落后收集保藏并稀釋成體發(fā)酵培養(yǎng)基上進行發(fā)酵測定其纖維素酶活、木聚糖酶活和濾紙酶小確定高產纖維分解菌株。變菌紫外、化學交叉復合誘變菌紫外、化學交叉復合誘變步驟同上述一致,挑選出最優(yōu)突變菌與分析子適宜萌發(fā)時間
圖 4 木霉不同化學反應時間下的致死率Fig. 4 Mortality of trichoderma under different chemical reaction tim霉在化學誘變不同反應時間孢子致死率,從圖 4 中看出康氏度為 20%時反應 30 min 致死率達到了 85%以上,綠色木霉 13%時反應 30 min 致死率達到了 85%以上。因此康氏木霉 13006 佳化學誘變反應時間為 30 min。菌初篩與復篩霉 13006 和綠色木霉 13010 經(jīng)多輪紫外誘變和化學誘變處理,養(yǎng)基上培養(yǎng) 7d 后透明圈直徑較大的突變株,紫外誘變和化學見圖 1-5,初篩突變菌株在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中各個酶活,見表
【參考文獻】:
期刊論文
[1]溶解性多糖單加氧酶的研究進展[J]. 孫小寶,萬嘉欣,曹佳雯,斯越秀,王謙. 生物工程學報. 2018(02)
[2]固態(tài)生物發(fā)酵研究進展與未來發(fā)展趨勢[J]. 張鐵鷹. 飼料與畜牧. 2017(17)
[3]微生物降解玉米秸稈的研究進展[J]. 張斯童,蘭雪,李哲,陳光. 吉林農業(yè)大學學報. 2016(05)
[4]綠色木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產纖維素酶的研究[J]. 姜伯玲,王曙陽,李文建,董妙音,陳積紅,劉敬,胡偉. 中國釀造. 2015(07)
[5]中國飼料工業(yè)發(fā)展若干重大問題探討[J]. 蔡輝益. 飼料工業(yè). 2012(10)
[6]里氏木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產纖維素酶及其水解特性[J]. 宋娜娜,宋向陽,歐陽嘉,勇強. 生物加工過程. 2010(05)
[7]固態(tài)發(fā)酵麩皮和玉米芯生產擬康氏木霉孢子的研究[J]. 孫斐,陳靠山,張鵬英. 中國農學通報. 2010(06)
[8]微生物降解纖維素的研究概況[J]. 文少白,李勤奮,侯憲文,李光義,鄧曉. 中國農學通報. 2010(01)
[9]纖維素酶在反芻動物營養(yǎng)中的研究進展[J]. 邱定杰,劉慶華. 福建畜牧獸醫(yī). 2008(S1)
[10]玉米秸桿發(fā)酵生產蛋白飼料的研究[J]. 李海紅,同幟,仝攀瑞. 西北大學學報(自然科學版). 2003(06)
博士論文
[1]復合酶處理玉米秸稈對肉羊生產性能及破解纖維結構機制的研究[D]. 王紅梅.中國農業(yè)科學院 2017
[2]玉米深加工企業(yè)成長動力的作用機理研究[D]. 李銳.吉林農業(yè)大學 2013
[3]木霉菌株產酶培養(yǎng)及其特定底物酶解過程研究[D]. 馮月.北京林業(yè)大學 2012
[4]康氏木霉AS3.2774纖維素酶系的誘導、阻遏、純化及鑒定研究[D]. 林元山.廣西大學 2011
[5]飼用酶制劑生物學價值評價技術研究[D]. 王寧娟.中國農業(yè)科學院 2009
[6]固態(tài)發(fā)酵植酸酶、溶菌酶對肉仔雞及仔豬的應用研究[D]. 朱忠珂.西北農林科技大學 2008
碩士論文
[1]利用FTIR技術評定玉米秸稈營養(yǎng)價值的研究[D]. 丁雪.東北農業(yè)大學 2016
[2]木聚糖酶產生菌的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及其酶學性質研究[D]. 馮波.湖南農業(yè)大學 2016
[3]提高木霉屬纖維素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究[D]. 李敏霞.齊魯工業(yè)大學 2014
[4]纖維素酶和半纖維素酶高產菌株的篩選[D]. 董桓.河北大學 2014
[5]一株產纖維素酶菌株的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 楊麗娜.西北農林科技大學 2013
[6]一株產纖維素酶真菌的篩選鑒定、酶學性質和發(fā)酵產酶條件的研究[D]. 潘樂毅.湖南農業(yè)大學 2012
[7]里氏木霉Rut-C30產纖維素酶條件優(yōu)化及酶解生物質的基礎研究[D]. 李勇昊.吉林大學 2012
[8]稻草纖維降解菌的選育及其應用[D]. 初世宇.湖南農業(yè)大學 2011
[9]秸稈纖維素高效降解菌株的篩選及對秸稈降解效果初步研究[D]. 殷中偉.中國農業(yè)科學院 2010
[10]產幾丁質酶木霉的誘變選育及對玉米紋枯病的生物防治[D]. 趙丹萍.四川農業(yè)大學 2010
本文編號:2930468
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