高產(chǎn)纖維分解酶木霉和黑曲霉誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2020-12-21 20:38
我國(guó)能量飼料存在較大缺口,2016年玉米全年進(jìn)口量達(dá)到了330萬(wàn)t。秸稈產(chǎn)量豐富,蘊(yùn)含大量潛在能值。但秸稈纖維含量高,不易被動(dòng)物消化利用,若經(jīng)科學(xué)處理可作為能量資源的補(bǔ)充。1.通過(guò)對(duì)7株木霉菌株,利用DNS酶活測(cè)定和玉米秸稈剛果紅培養(yǎng)基法,篩選出高產(chǎn)纖維分解酶的菌株,為其高效篩選提供參考。2.對(duì)篩選出的木霉菌株和黑曲霉(實(shí)驗(yàn)室保藏菌)進(jìn)行誘變選育,(紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯復(fù)合誘變)獲得產(chǎn)纖維分解酶高的突變菌,并對(duì)其產(chǎn)酶發(fā)酵條件和水解秸稈能力進(jìn)行研究。(1)木霉和黑曲霉經(jīng)紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯復(fù)合誘變篩選出了一株突變菌康氏木霉UH-1和黑曲霉X1U4-1。與原菌相比,康氏木霉UH-1木聚糖酶提高了42.7%,纖維素酶提高了78.5%。黑曲霉X1U4-1濾紙酶提高了66.7%。(2)康氏木霉UH-1最適的固態(tài)發(fā)酵條件為硫酸銨添加量2%、接種量1.1 ml、含水量67%、發(fā)酵時(shí)間84 h,在此條件下濾紙酶活達(dá)到0.86 U/g、纖維素酶活99.81 U/g、木聚糖酶活1150.32 U/g。黑曲霉X1U4-1最適固態(tài)發(fā)酵條件為發(fā)酵時(shí)間72 h、玉米芯:麩皮=3:7、接...
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
木霉菌產(chǎn)透明圈情況
產(chǎn)纖維分解酶菌株初篩和復(fù)篩:在最佳致死率條件下,經(jīng)多輪紫外突變菌株長(zhǎng)得快,菌絲短、產(chǎn)孢子晚、透明圈大的菌落用 0.9%的后涂到傳代培養(yǎng)基上,培養(yǎng) 4-6 天長(zhǎng)出單菌落后收集保藏并稀釋成體發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)酵測(cè)定其纖維素酶活、木聚糖酶活和濾紙酶小確定高產(chǎn)纖維分解菌株。變菌紫外、化學(xué)交叉復(fù)合誘變菌紫外、化學(xué)交叉復(fù)合誘變步驟同上述一致,挑選出最優(yōu)突變菌與分析子適宜萌發(fā)時(shí)間
圖 4 木霉不同化學(xué)反應(yīng)時(shí)間下的致死率Fig. 4 Mortality of trichoderma under different chemical reaction tim霉在化學(xué)誘變不同反應(yīng)時(shí)間孢子致死率,從圖 4 中看出康氏度為 20%時(shí)反應(yīng) 30 min 致死率達(dá)到了 85%以上,綠色木霉 13%時(shí)反應(yīng) 30 min 致死率達(dá)到了 85%以上。因此康氏木霉 13006 佳化學(xué)誘變反應(yīng)時(shí)間為 30 min。菌初篩與復(fù)篩霉 13006 和綠色木霉 13010 經(jīng)多輪紫外誘變和化學(xué)誘變處理,養(yǎng)基上培養(yǎng) 7d 后透明圈直徑較大的突變株,紫外誘變和化學(xué)見(jiàn)圖 1-5,初篩突變菌株在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中各個(gè)酶活,見(jiàn)表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]溶解性多糖單加氧酶的研究進(jìn)展[J]. 孫小寶,萬(wàn)嘉欣,曹佳雯,斯越秀,王謙. 生物工程學(xué)報(bào). 2018(02)
[2]固態(tài)生物發(fā)酵研究進(jìn)展與未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)[J]. 張鐵鷹. 飼料與畜牧. 2017(17)
[3]微生物降解玉米秸稈的研究進(jìn)展[J]. 張斯童,蘭雪,李哲,陳光. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(05)
[4]綠色木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的研究[J]. 姜伯玲,王曙陽(yáng),李文建,董妙音,陳積紅,劉敬,胡偉. 中國(guó)釀造. 2015(07)
[5]中國(guó)飼料工業(yè)發(fā)展若干重大問(wèn)題探討[J]. 蔡輝益. 飼料工業(yè). 2012(10)
[6]里氏木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶及其水解特性[J]. 宋娜娜,宋向陽(yáng),歐陽(yáng)嘉,勇強(qiáng). 生物加工過(guò)程. 2010(05)
[7]固態(tài)發(fā)酵麩皮和玉米芯生產(chǎn)擬康氏木霉孢子的研究[J]. 孫斐,陳靠山,張鵬英. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(06)
[8]微生物降解纖維素的研究概況[J]. 文少白,李勤奮,侯憲文,李光義,鄧曉. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(01)
[9]纖維素酶在反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中的研究進(jìn)展[J]. 邱定杰,劉慶華. 福建畜牧獸醫(yī). 2008(S1)
[10]玉米秸桿發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的研究[J]. 李海紅,同幟,仝攀瑞. 西北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2003(06)
博士論文
[1]復(fù)合酶處理玉米秸稈對(duì)肉羊生產(chǎn)性能及破解纖維結(jié)構(gòu)機(jī)制的研究[D]. 王紅梅.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[2]玉米深加工企業(yè)成長(zhǎng)動(dòng)力的作用機(jī)理研究[D]. 李銳.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]木霉菌株產(chǎn)酶培養(yǎng)及其特定底物酶解過(guò)程研究[D]. 馮月.北京林業(yè)大學(xué) 2012
[4]康氏木霉AS3.2774纖維素酶系的誘導(dǎo)、阻遏、純化及鑒定研究[D]. 林元山.廣西大學(xué) 2011
[5]飼用酶制劑生物學(xué)價(jià)值評(píng)價(jià)技術(shù)研究[D]. 王寧娟.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[6]固態(tài)發(fā)酵植酸酶、溶菌酶對(duì)肉仔雞及仔豬的應(yīng)用研究[D]. 朱忠珂.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008
碩士論文
[1]利用FTIR技術(shù)評(píng)定玉米秸稈營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的研究[D]. 丁雪.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]木聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及其酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 馮波.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]提高木霉屬纖維素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究[D]. 李敏霞.齊魯工業(yè)大學(xué) 2014
[4]纖維素酶和半纖維素酶高產(chǎn)菌株的篩選[D]. 董桓.河北大學(xué) 2014
[5]一株產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 楊麗娜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[6]一株產(chǎn)纖維素酶真菌的篩選鑒定、酶學(xué)性質(zhì)和發(fā)酵產(chǎn)酶條件的研究[D]. 潘樂(lè)毅.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]里氏木霉Rut-C30產(chǎn)纖維素酶條件優(yōu)化及酶解生物質(zhì)的基礎(chǔ)研究[D]. 李勇昊.吉林大學(xué) 2012
[8]稻草纖維降解菌的選育及其應(yīng)用[D]. 初世宇.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[9]秸稈纖維素高效降解菌株的篩選及對(duì)秸稈降解效果初步研究[D]. 殷中偉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[10]產(chǎn)幾丁質(zhì)酶木霉的誘變選育及對(duì)玉米紋枯病的生物防治[D]. 趙丹萍.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
本文編號(hào):2930468
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
木霉菌產(chǎn)透明圈情況
產(chǎn)纖維分解酶菌株初篩和復(fù)篩:在最佳致死率條件下,經(jīng)多輪紫外突變菌株長(zhǎng)得快,菌絲短、產(chǎn)孢子晚、透明圈大的菌落用 0.9%的后涂到傳代培養(yǎng)基上,培養(yǎng) 4-6 天長(zhǎng)出單菌落后收集保藏并稀釋成體發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)酵測(cè)定其纖維素酶活、木聚糖酶活和濾紙酶小確定高產(chǎn)纖維分解菌株。變菌紫外、化學(xué)交叉復(fù)合誘變菌紫外、化學(xué)交叉復(fù)合誘變步驟同上述一致,挑選出最優(yōu)突變菌與分析子適宜萌發(fā)時(shí)間
圖 4 木霉不同化學(xué)反應(yīng)時(shí)間下的致死率Fig. 4 Mortality of trichoderma under different chemical reaction tim霉在化學(xué)誘變不同反應(yīng)時(shí)間孢子致死率,從圖 4 中看出康氏度為 20%時(shí)反應(yīng) 30 min 致死率達(dá)到了 85%以上,綠色木霉 13%時(shí)反應(yīng) 30 min 致死率達(dá)到了 85%以上。因此康氏木霉 13006 佳化學(xué)誘變反應(yīng)時(shí)間為 30 min。菌初篩與復(fù)篩霉 13006 和綠色木霉 13010 經(jīng)多輪紫外誘變和化學(xué)誘變處理,養(yǎng)基上培養(yǎng) 7d 后透明圈直徑較大的突變株,紫外誘變和化學(xué)見(jiàn)圖 1-5,初篩突變菌株在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中各個(gè)酶活,見(jiàn)表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]溶解性多糖單加氧酶的研究進(jìn)展[J]. 孫小寶,萬(wàn)嘉欣,曹佳雯,斯越秀,王謙. 生物工程學(xué)報(bào). 2018(02)
[2]固態(tài)生物發(fā)酵研究進(jìn)展與未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)[J]. 張鐵鷹. 飼料與畜牧. 2017(17)
[3]微生物降解玉米秸稈的研究進(jìn)展[J]. 張斯童,蘭雪,李哲,陳光. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(05)
[4]綠色木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的研究[J]. 姜伯玲,王曙陽(yáng),李文建,董妙音,陳積紅,劉敬,胡偉. 中國(guó)釀造. 2015(07)
[5]中國(guó)飼料工業(yè)發(fā)展若干重大問(wèn)題探討[J]. 蔡輝益. 飼料工業(yè). 2012(10)
[6]里氏木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶及其水解特性[J]. 宋娜娜,宋向陽(yáng),歐陽(yáng)嘉,勇強(qiáng). 生物加工過(guò)程. 2010(05)
[7]固態(tài)發(fā)酵麩皮和玉米芯生產(chǎn)擬康氏木霉孢子的研究[J]. 孫斐,陳靠山,張鵬英. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(06)
[8]微生物降解纖維素的研究概況[J]. 文少白,李勤奮,侯憲文,李光義,鄧曉. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(01)
[9]纖維素酶在反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中的研究進(jìn)展[J]. 邱定杰,劉慶華. 福建畜牧獸醫(yī). 2008(S1)
[10]玉米秸桿發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的研究[J]. 李海紅,同幟,仝攀瑞. 西北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2003(06)
博士論文
[1]復(fù)合酶處理玉米秸稈對(duì)肉羊生產(chǎn)性能及破解纖維結(jié)構(gòu)機(jī)制的研究[D]. 王紅梅.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[2]玉米深加工企業(yè)成長(zhǎng)動(dòng)力的作用機(jī)理研究[D]. 李銳.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]木霉菌株產(chǎn)酶培養(yǎng)及其特定底物酶解過(guò)程研究[D]. 馮月.北京林業(yè)大學(xué) 2012
[4]康氏木霉AS3.2774纖維素酶系的誘導(dǎo)、阻遏、純化及鑒定研究[D]. 林元山.廣西大學(xué) 2011
[5]飼用酶制劑生物學(xué)價(jià)值評(píng)價(jià)技術(shù)研究[D]. 王寧娟.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[6]固態(tài)發(fā)酵植酸酶、溶菌酶對(duì)肉仔雞及仔豬的應(yīng)用研究[D]. 朱忠珂.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008
碩士論文
[1]利用FTIR技術(shù)評(píng)定玉米秸稈營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的研究[D]. 丁雪.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]木聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及其酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 馮波.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]提高木霉屬纖維素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究[D]. 李敏霞.齊魯工業(yè)大學(xué) 2014
[4]纖維素酶和半纖維素酶高產(chǎn)菌株的篩選[D]. 董桓.河北大學(xué) 2014
[5]一株產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選、鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 楊麗娜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[6]一株產(chǎn)纖維素酶真菌的篩選鑒定、酶學(xué)性質(zhì)和發(fā)酵產(chǎn)酶條件的研究[D]. 潘樂(lè)毅.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]里氏木霉Rut-C30產(chǎn)纖維素酶條件優(yōu)化及酶解生物質(zhì)的基礎(chǔ)研究[D]. 李勇昊.吉林大學(xué) 2012
[8]稻草纖維降解菌的選育及其應(yīng)用[D]. 初世宇.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[9]秸稈纖維素高效降解菌株的篩選及對(duì)秸稈降解效果初步研究[D]. 殷中偉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[10]產(chǎn)幾丁質(zhì)酶木霉的誘變選育及對(duì)玉米紋枯病的生物防治[D]. 趙丹萍.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
本文編號(hào):2930468
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