牦牛是生活在青藏高原及毗鄰地區(qū)不可替代的畜種,為當(dāng)?shù)啬撩裉峁┲匾纳a(chǎn)和生活資料,但牦牛卵母細(xì)胞體外成熟（IVM）率和胚胎發(fā)育率低,很大程度上限制了牦牛胚胎移植的推廣應(yīng)用。血小板活化因子（PAF）在繁殖和發(fā)育過程中具有重要調(diào)控作用。因此,本研究擬探討PAF對牦牛卵母細(xì)胞IVM、早期胚胎發(fā)育的影響及其分子調(diào)控。試驗將牦牛1 025個卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體（COCs）分別在含不同PAF濃度(0、10^-8、10^-7、10^-6 moL/L)的IVM液中成熟后,與奶牛精子體外受精（IVF）和胚胎體外培養(yǎng)（IVC）,比較分析各組卵母細(xì)胞成熟率、卵裂率和囊胚率;采用qPCR檢測成熟卵母細(xì)胞及不同發(fā)育階段的胚胎中凋亡基因（BAX和BCL-2）、表皮生長因子（EGF）及其受體（EGFR）、發(fā)育相關(guān)基因（C-fos、OCT-4和NANOG）等基因的相對表達(dá)量。結(jié)果表明:（1）IVM液中PAF濃度為10^-77 moL/L組的卵母細(xì)胞成熟率（92.16±0.19%）、卵裂率（77.2±0.85%）和囊胚率（46.71±0.68... 

【文章來源】：西南民族大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PAF的化學(xué)分子結(jié)構(gòu)式（Ishiietal.,2000）

計分析SPSS軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，單因素方差分析牦牛卵母細(xì)胞Mean±SD”表示；牦牛成熟卵母細(xì)胞各個相關(guān)基因的表達(dá)差組的 Ct 值作為參考，采用比較閾值法（ 2-ΔΔCt法）進(jìn)行相對定SS 軟件用 LSD 進(jìn)行方差分析和顯著性檢驗，P＞0.05 表示差異與分析卵母細(xì)胞成熟卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng) 24 h 后如圖 2-1，藍(lán)色圓圈圈出部分為胞，未圈出的卵母細(xì)胞可見其卵丘細(xì)胞均擴(kuò)張明顯，屬于成熟

平（P<0.05）；OCT-4 基因的 mRNA 表達(dá)水平在 PAF 濃度為 0、10-8、10-7m微量表達(dá)，在 PAF 濃度為 10-6moL/L 時不表達(dá)；NANOG 基因的 mRNA 平在 PAF 濃度為 10-8、10-7、10-6moL/L 時微量表達(dá)，在 PAF 濃度為 0 時到表達(dá)。在牦牛成熟卵母細(xì)胞中表皮生長因子 EGF 及其受體 EGFR 的表均高于其他基因的表達(dá)水平。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]牦牛分布特點(diǎn)及其種群數(shù)量[J]. 孟慶輝,陳永杏,董紅敏,白加德,劉艷菊,郭青云,成振華.  家畜生態(tài)學(xué)報. 2017(03)
[2]體外受精生產(chǎn)犏牛胚胎與移植試驗研究[J]. 孫永剛,徐驚濤,才讓東智,馬志杰.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2013(05)
[3]轉(zhuǎn)錄因子0ct4、Sox2和Nanog在早期胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)調(diào)控[J]. 李東偉,李文雍.  生物學(xué)雜志. 2007(03)
[4]小鼠早期胚胎發(fā)育過程中細(xì)胞凋亡及凋亡基因表達(dá)的檢測[J]. 李威,王連卿,蘇靜艷,袁麗麗,嚴(yán)云勤.  細(xì)胞生物學(xué)雜志. 2006(04)
[5]小鼠早期胚胎發(fā)育過程中TGF-α和EGF-R mRNA的表達(dá)[J]. 嚴(yán)云勤,譚景和,張黎霞.  動物學(xué)報. 2002(04)

博士論文
[1]EGF、TGFα、EGFR在綿羊早期胚胎中的表達(dá)和作用研究[D]. 周平.內(nèi)蒙古大學(xué) 2007
[2]豬卵母細(xì)胞和早期胚胎中c-mos和Oct-4基因表達(dá)以及RNAi研究[D]. 劉麗清.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：2905522