發(fā)布時(shí)間：2020-11-22 02:19

　　 隨著我國養(yǎng)牛業(yè)集約化養(yǎng)殖不斷加快,犢牛腹瀉防控已成為亟待解決的重要問題。微小隱孢子蟲(Cryptosporidium parvum)是重要的人獸共患機(jī)會(huì)性致病原蟲,是目前公認(rèn)的引起犢牛腹瀉的四種主要病原之一,在世界范圍內(nèi)流行廣泛。牛被認(rèn)為是導(dǎo)致人類人畜共患微小隱孢子蟲病的主要宿主,且與許多人類介水隱孢子蟲病的爆發(fā)有關(guān),具有較大的人獸共患風(fēng)險(xiǎn)。本研究從奶牛業(yè)生產(chǎn)實(shí)際出發(fā),對新疆部分地區(qū)新生犢牛微小隱孢子蟲進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查,掌握新生犢牛微小隱孢子蟲的感染情況及流行特點(diǎn),可為了解微小隱孢子蟲在動(dòng)物和人之間傳播的潛在危害性、傳播動(dòng)態(tài),以及為我國新疆奶牛源微小隱孢子蟲流行病學(xué)研究及防治提供基礎(chǔ)資料。(1)于2017年9月至2018年7月期間,采用飽和蔗糖溶液漂浮法、改良抗酸染色法、巢式PCR、PCR-RFLP分析和隱孢子蟲SSU rRNA基因序列分析,對新疆烏什、阿拉爾、溫宿、石河子、呼圖壁、鐵門關(guān)和奎屯7個(gè)地區(qū)12個(gè)集約化奶牛養(yǎng)殖場232頭1月齡內(nèi)新生犢牛糞便進(jìn)行微小隱孢子蟲感染情況調(diào)查。顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲直徑4~6μm,具有藍(lán)紫色的折光性,呈卵球形或橢圓形,具有1個(gè)大的殘?bào)w和4個(gè)子孢子;經(jīng)改良抗酸染色法染色后,隱孢子蟲卵囊呈玫瑰紅色,周邊背景呈淡藍(lán)色�；赟SU rRNA基因?qū)?2個(gè)奶牛場的232頭1月齡內(nèi)新生犢牛糞便DNA樣品進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增,隱孢子蟲總體感染率38.4%,微小隱孢子蟲感染率為37.9%,研究發(fā)現(xiàn)腹瀉和未腹瀉犢牛之間微小隱孢子蟲感染率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在極顯著差異(P0.001)�；赟SU rRNA基因的RFLP分析和序列分析,共鑒定出3種隱孢子蟲蟲種:微小隱孢子蟲、牛隱孢子蟲和瑞氏隱孢子蟲,其中微小隱孢子蟲是優(yōu)勢感染蟲種,在研究區(qū)域新生犢牛中普遍存在,具有較大的人獸共患風(fēng)險(xiǎn)。(2)于2017年9月至2018月9月期間,對新疆南疆阿克蘇地區(qū)兩規(guī)�；鲞M(jìn)行了1年的跟蹤調(diào)查,采用方差齊性分析發(fā)現(xiàn)微小隱孢子蟲感染率季節(jié)性差異不明顯(P0.05),十團(tuán)牛場微小隱孢子蟲感染無季節(jié)差異(P0.05),五團(tuán)牛場夏季和冬季微小隱孢子蟲感染率存在差異(P=0.044)。
【學(xué)位單位】：塔里木大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S858.23
【部分圖文】：

圖 2-1 新疆部分地區(qū)新生犢牛糞便樣品地理分布phical origins of faecal samples from neonatal calves in part及溶液表 2-1 主要試劑Table 2-1 Main reagents試劑名稱es of Reagents生產(chǎn)廠Manufapotassium dichromate) 天津福晨化學(xué)試L2000Marker 大連 TaKabo II 限制性內(nèi)切酶 大連 TaKaiew I 型核酸染料 北京博奧拓達(dá)科PCR Super Mix (+dye) 北京全式金生物. Stool DNA Kit 美國 Omega B瓊脂糖 美國 Sigma-A

下隱孢子蟲的檢出率較低。采用飽和蔗糖溶液漂浮法，對232份新生犢牛糞便樣品進(jìn)行檢查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，最早可在4日齡犢牛糞便中檢測到隱孢子蟲卵囊。在飽和蔗糖溶液中，隱孢子卵囊呈近卵圓形，呈現(xiàn)淡藍(lán)紫色，周圍藍(lán)綠色折光帶明顯，見圖2-2；經(jīng)改良酸染色法染色后，隱孢子蟲卵囊呈玫瑰紅色，周邊背景呈淡藍(lán)色，對比明顯，見圖2-3。圖 2-2 飽和蔗糖溶液中隱孢子蟲 圖 2-3 經(jīng)改良抗酸染色的隱孢卵囊形態(tài)觀察(400 ×) 子蟲卵囊形態(tài)觀察(1000 ×)Figure2-2 Morphological observation Figure2-3 Morphological observation ofof Cryptosporidium oocysts in saturated Cryptosporidium oocysts stained bysucrose solution flotation(400 ×) improved acid-fast staining(1000 ×)

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，最早可在4日齡犢牛糞便中檢測到隱孢子蟲卵囊。在飽和蔗糖溶液中，隱孢子卵囊呈近卵圓形，呈現(xiàn)淡藍(lán)紫色，周圍藍(lán)綠色折光帶明顯，見圖2-2；經(jīng)改良酸染色法染色后，隱孢子蟲卵囊呈玫瑰紅色，周邊背景呈淡藍(lán)色，對比明顯，見圖2-3。圖 2-2 飽和蔗糖溶液中隱孢子蟲 圖 2-3 經(jīng)改良抗酸染色的隱孢卵囊形態(tài)觀察(400 ×) 子蟲卵囊形態(tài)觀察(1000 ×)Figure2-2 Morphological observation Figure2-3 Morphological observation ofof Cryptosporidium oocysts in saturated Cryptosporidium oocysts stained bysucrose solution flotation(400 ×) improved acid-fast staining(1000 ×)
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 王臣榮;齊萌;李俊強(qiáng);張振杰;劉鵬飛;余復(fù)昌;曹建科;寧長申;張龍現(xiàn);;規(guī)�；N場進(jìn)口奶牛隱孢子蟲種類、基因亞型鑒定及其生物安全評價(jià)[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2015年11期

2 方艷琴;杜帥之;郭雅旭;林青;趙光輝;;不同Ⅱd亞型微小隱孢子蟲對BALB/c小鼠的感染性[J];西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2014年12期

3 曹斌斌;趙勐;林濤;馬翀;曹杰;齊長明;;犢牛腹瀉病因及治療方法[J];中國奶牛;2012年05期

本文編號：2893952