發(fā)布時(shí)間：2020-11-16 12:15

　　 雞球蟲(chóng)病是由艾美耳屬一種或多種球蟲(chóng)寄生于雞腸道黏膜上皮細(xì)胞所引起的流行性寄生蟲(chóng)病。迄今為止,全球發(fā)現(xiàn)的球蟲(chóng)有14種,我國(guó)報(bào)道的只有9種,有7種球蟲(chóng)只感染雞,沒(méi)有中間宿主,其中以柔嫩艾美耳球蟲(chóng)(E.tenella)毒力最強(qiáng),主要寄生于雞盲腸內(nèi)。感染球蟲(chóng)的雛雞因生產(chǎn)效率降低以及昂貴的治療費(fèi)用,給養(yǎng)雞業(yè)帶來(lái)的損失始終居高不下�，F(xiàn)我國(guó)使用疫苗防治球蟲(chóng)病還有很多局限性,臨床廣泛使用抗生素及化學(xué)合成類(lèi)藥物來(lái)治療球蟲(chóng)病,但是其造成的藥物殘留和產(chǎn)生的抗藥性已經(jīng)不容忽視。而中藥治療球蟲(chóng)病能夠有效的解決藥物殘留和耐藥性等問(wèn)題,擁有良好的發(fā)展前景。為尋求更好的治療球蟲(chóng)病的中藥復(fù)方,本試驗(yàn)在總結(jié)國(guó)內(nèi)有關(guān)中藥防治球蟲(chóng)病研究資料的基礎(chǔ)上,首先依據(jù)雞球蟲(chóng)病的臨床癥狀,選擇28味以解毒驅(qū)蟲(chóng)、止血止痢、燥濕健脾為主治功能的單味中藥,通過(guò)單味體外抑制卵囊孢子化試驗(yàn)確定28味中藥抑制卵囊孢子化的最佳濃度以及對(duì)卵囊孢子化率影響的高低,選擇抗球蟲(chóng)效果好的單味中藥結(jié)合中藥配伍原則組成三組中藥復(fù)方,然后通過(guò)復(fù)方體外抑制卵囊孢子化試驗(yàn)和復(fù)方體內(nèi)抗球蟲(chóng)試驗(yàn),分析三組復(fù)方對(duì)卵囊孢子化的影響和抗球蟲(chóng)的效果,最后通過(guò)檢測(cè)IgG和SIgA含量,并制作盲腸病理切片來(lái)對(duì)三組復(fù)方的抗球蟲(chóng)效果進(jìn)行進(jìn)一步分析,獲取對(duì)E.tenella感染具有明顯治療效果的中藥復(fù)方制劑,為綜合防治雞球蟲(chóng)病提供依據(jù),為進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供參考。研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:首先,查找文獻(xiàn)結(jié)合E.tenella臨床癥狀及致病機(jī)理選擇抗蟲(chóng)類(lèi)、止血止痢類(lèi)和抗菌清熱解毒類(lèi)中藥,共28味。將所有單味中藥先制成1g/ml水提液,然后稀釋成0.2g/ml、0.15g/ml、0.1g/ml、0.05g/ml四個(gè)濃度與未孢子化E.tenella卵囊混合,并置于29℃恒溫水浴鍋中培養(yǎng),分別在培養(yǎng)至18h、24h、36h、42h、48h時(shí)測(cè)定卵囊孢子化率,選擇抗球蟲(chóng)效果較好的單味中藥結(jié)合中藥配伍原則組成三組復(fù)方。選擇16味抗球蟲(chóng)效果好的中藥添加輔藥后組成三組復(fù)方,分別為方劑一:常山20g、蛇床子20g、苦參10g、白茅根10g、石榴皮10g、柴胡12g、大黃10g、甘草8g;方劑二:蒼術(shù)20g、野菊花20g、白頭翁10g、白術(shù)20g、烏梅10g、仙鶴草10g、薏仁10g;方劑三:檳榔20g、常山20g、白頭翁10g、地榆10g、黨參20g、白術(shù)10g、當(dāng)歸10g。然后,將上述三組方劑按比例稱(chēng)量制成1g/ml復(fù)方水提液,再將三組復(fù)方均稀釋成1g/ml、0.7g/ml、0.5g/ml、0.3g/ml、0.1g/ml五個(gè)濃度與未孢子化E.tenella卵囊混合,并置于29℃恒溫水浴鍋中培養(yǎng),培養(yǎng)至18h、24h、36h、42h、48h時(shí)分別測(cè)定卵囊孢子化率,比較三組復(fù)方對(duì)卵囊孢子化率的影響。同時(shí),將飼養(yǎng)至10日齡的320只雛雞,挑選體重相近的雛雞分為復(fù)方一組、復(fù)方二組、復(fù)方三組、球凈組、地克珠利組、攻蟲(chóng)組(感染不給藥)和空白組(不感染不給藥),每組40只雛雞(剩余40只備用),除空白組外,其他組雛雞均灌服5×10~4E.tenella孢子化卵囊;感染球蟲(chóng)12h后,復(fù)方一組、復(fù)方二組、復(fù)方三組每只雛雞每日均灌喂相應(yīng)復(fù)方藥液0.3ml,球凈組和地克珠利組按照說(shuō)明書(shū)配為水溶液,讓雛雞自由飲用,攻蟲(chóng)組和空白組自由飲用高溫滅菌水。每天查看雛雞精神狀況,記錄雛雞死亡情況,感染后第7d將所有雛雞空腹稱(chēng)重后心臟采血并剖殺,統(tǒng)計(jì)盲腸病變計(jì)分、病變值、卵囊值、成活率、增重率,計(jì)算抗球蟲(chóng)指數(shù);檢測(cè)血清中的IgG含量和盲腸食糜中的SIgA含量;取各組盲腸制作病理組織切,觀察各組盲腸病理組織學(xué)變化。結(jié)果顯示,方劑一、二、三分別再在濃度為0.1g/ml、0.1g/ml、1g/ml時(shí)卵囊孢子化率最低,且0.1g/ml方劑二組卵囊孢子化率僅為33.38%,低于0.1g/ml方劑二組和1g/ml方劑三,說(shuō)明方劑二對(duì)卵囊孢子化的抑制作用高于方劑一和方劑三。方劑二相對(duì)增重率為83.15%,與攻蟲(chóng)組差異極顯著(P0.01),OPG為6.23×10~4,僅高于地克珠利組,說(shuō)明方劑二能改善感染球蟲(chóng)引起的增重下降情況,并能減少盲腸中的卵囊數(shù)量,方劑二抗球蟲(chóng)指數(shù)為139,高于方劑一、方劑三和球凈組,低于地克珠利組,表明方劑二抗球蟲(chóng)效果高于方劑一、方劑三和球凈組,但低于地克珠利組,為中等抗球蟲(chóng)藥物;進(jìn)一步研究表明方劑二能明顯提高病雞IgG和SIgA含量,并且能改善卵囊對(duì)盲腸的損傷,方劑一和方劑三組對(duì)病雞IgG、SIgA含量的影響和對(duì)盲腸損傷的改善均不明顯。
【學(xué)位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：S858.31
【部分圖文】：

圖 1.1 最佳濃度抗蟲(chóng)類(lèi)中藥在不同時(shí)間對(duì)卵囊孢子化率的影響re 1.1 Effect of the best concentrations of Chinese medicine agparasite on the spore rate of oocysts at different times止痢類(lèi)單味中藥體外篩選結(jié)果1-2 和圖 1.2 統(tǒng)計(jì)分析可知，地榆在濃度為 0.2g/ml 時(shí)組間孢子的地榆在 18h~24h 時(shí)卵囊未出現(xiàn)孢子化現(xiàn)象，24h~42h 之間卵快，42h~48h 之間孢子化率上升變緩；烏梅在濃度為 0.2g/ml 與其他中藥組之間差異顯著（P＜0.05），在培養(yǎng) 36h 后卵囊，48h 時(shí)卵囊孢子化率僅為 15.52%；五倍子對(duì)卵囊的孢子化的8h 時(shí)卵囊孢子化率僅低于 2.5%重鉻酸鉀組，且隨藥物濃度的降影響逐漸減弱；石榴皮對(duì)卵囊孢子化率的影響隨藥物濃度的降藥物濃度為 0.2g/ml 時(shí)，卵囊的孢子化率為 76.96%，而在 0孢子化率僅為 23.96%，與其他中藥組之間差異顯著（P＜0.05囊孢子化率上升緩慢；仙鶴草在不同濃度時(shí)對(duì)卵囊孢子化率的物濃度為 0.2g/ml 時(shí)，卵囊孢子化率為 33.33%，但濃度下降至 0

2 Effect of different concentrations of Chinese medicine for hesentery on the spore rate of oocysts at different times (sporate unit:%)濃度（g/ml）0.2 0.15 0.1 28.57b56.25b62.50c 15.52a33.33a38.33a 90.20g91.38g97.06h 76.96f66.60c52.46b 33.33c81.82f87.50g 40.50d68.97d73.91d 65.00e78.05e82.35e 76.19f83.33f85.71f

1.3 最佳濃度抗菌、清熱解毒類(lèi)中藥在不同時(shí)間對(duì)卵囊孢子化率的影3 Effect of best concentrations of Chinese medicine for antibaring and detoxifying on the spore rate of oocysts at differ(sporulation rate unit:%)體外抑制卵囊孢子化的試驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合中藥配伍“君臣佐使三組復(fù)方，其中方劑一以驅(qū)蟲(chóng)為主，輔佐清熱解毒，方劑脾燥濕，方劑三以驅(qū)蟲(chóng)為主，補(bǔ)益為輔佐。表 1-4 復(fù)方組成Table 1-4 Compound composition中藥組成及劑量（g）常山（20）、蛇床子（20）、苦參（10）、白茅根（10）、石榴皮（10）、柴胡（12）、大黃（10）、甘草（8）蒼術(shù)（20）、野菊花（20）、白頭翁（10）、白術(shù)（20）、
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2886216