仔豬腹瀉是生豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展中經(jīng)常發(fā)生而又難以徹底解決的問題,每年因仔豬腹瀉對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)造成的經(jīng)濟(jì)損失非常巨大。引起仔豬腹瀉的病因復(fù)雜,病原種類多樣,主要有傳染性和非傳染性因素,其中傳染性因素中以病毒和細(xì)菌感染較為常見。2016-2017年北疆部分地區(qū)規(guī)�;B(yǎng)殖場(chǎng)中陸續(xù)有仔豬腹瀉現(xiàn)象的發(fā)生,主要癥狀為水樣稀便、消瘦以及脫水,使用抗生素治療和疫苗防控效果均不理想,給養(yǎng)殖戶造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了查明導(dǎo)致北疆部分地區(qū)規(guī)�;B(yǎng)殖場(chǎng)仔豬腹瀉的主要原因,本研究選擇石河子、克拉瑪依、伊犁和博樂地區(qū)7個(gè)近兩年常發(fā)生仔豬腹瀉的規(guī)�;B(yǎng)殖場(chǎng)為研究對(duì)象,首先進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查,查明可能的傳染來源、傳播途徑和發(fā)病誘因,觀察其主要臨床癥狀及病理變化,同時(shí)對(duì)豬群的免疫抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè);采集腹瀉仔豬的小腸及其內(nèi)容物等病樣共計(jì)111份,采用RT-PCR方法檢測(cè)PEDV、Po RV和TGEV這三種主要導(dǎo)致病毒性腹瀉的病原,與商品化疫苗株和流行株進(jìn)行同源性分析;同時(shí)采用常規(guī)微生物學(xué)方法及16S rRNA的序列分析,對(duì)細(xì)菌性病原(大腸桿菌)進(jìn)行分離、鑒定、藥物敏感性以及對(duì)小白鼠的感染試驗(yàn)。最終明確引起北疆地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)仔豬腹瀉的主要病原及其特性,為北疆地區(qū)仔豬腹瀉的臨床治療及防控提供科學(xué)依據(jù)。結(jié)果如下:(1)仔豬腹瀉的現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果試驗(yàn)區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)的仔豬腹瀉主要發(fā)生在冬春兩季,傳播速度快,傳播途徑包括同窩之間的水平傳播和母子之間的垂直傳播兩種方式;發(fā)病日齡以2月齡左右的哺乳仔豬為主,其中7日齡以內(nèi)的仔豬所占比例最高,發(fā)病率及死亡率可達(dá)80%-90%;發(fā)病仔豬以水樣腹瀉為主并伴有嘔吐、脫水、消瘦等癥狀;病理剖檢可見腸壁菲薄、呈半透明狀、腸內(nèi)充滿稀黃色液體并有部分出現(xiàn)臌氣、胃部充滿未消化的乳凝塊;病理切片觀察可見腸絨毛斷裂、粗短、脫落,肝臟腫脹,肝小葉不明顯,脾臟可見淋巴細(xì)胞空泡變性,淋巴結(jié)有嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn);同時(shí)豬場(chǎng)內(nèi)豬舍環(huán)境差、通風(fēng)不良、圈舍濕度大是導(dǎo)致仔豬腹瀉發(fā)病率高的主要誘因,另外,發(fā)病豬場(chǎng)內(nèi)豬群偽狂犬、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征的的免疫抗體水平不穩(wěn)定也是導(dǎo)致仔豬腹瀉發(fā)病率高的誘因之一。(2)仔豬病毒性腹瀉主要病原的RT-PCR檢測(cè)及序列分析結(jié)果7個(gè)規(guī)�;i場(chǎng)的111份病樣中,PEDV的陽性率占67.5%(75/111),PoRV的陽性率占10.8%(19/111),沒有檢測(cè)到TGEV;同源性分析及系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系顯示,7株代表株P(guān)EDV ORF 3基因序列與3株疫苗株JX188454.1 AJ1102、GU372744.1 Cv777和JX002703.1 ZJ08的同源性較高,均在94%-99%之間,其中與疫苗株JX188454.1 AJ1102的進(jìn)化關(guān)系較近,與疫苗株GU372744.1 Cv777和疫苗株JX002703.1 ZJ08的關(guān)系較遠(yuǎn);7株代表株P(guān)EDV S基因序列與參考株的同源性為94-99%,其中與疫苗株JN599150.1 CV777(S)的遺傳距離較大,親緣關(guān)系較遠(yuǎn),而與流行毒株KY496315.1CH hubei 2016和MG334003.1YnP2的距離差異稍小,親緣關(guān)系較近;7株代表株P(guān)oRV VP-6基因序列與2株參考株的同源性為92-98%,與參考株L29186.1 4S(豬源)的同源性為92%左右,處于一個(gè)較大的進(jìn)化分支中,親緣關(guān)系較遠(yuǎn),與參考株JN034041.12010/WH-a(野豬源)的同源性為96%左右,處于一個(gè)較小的進(jìn)化分支中,親緣關(guān)系較近。(3)致仔豬腹瀉大腸桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究從111份病樣中分離出89株大腸桿菌,其生理生化特性均符合大腸桿菌的生物學(xué)特性;分離株在麥康凱培養(yǎng)基上呈光滑的紅色單個(gè)菌落,伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上為泛有綠光帶有金屬光澤的黑色菌落;10株代表株的PCR擴(kuò)增及序列分析結(jié)果表明,與MG270576.1同源性均在95%-99%之間,系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系表明當(dāng)?shù)亓餍兄昱c大腸桿菌參考株在同一個(gè)大的分支上;不同來源分離株的藥物敏感性有所不同,但對(duì)阿莫西林、復(fù)方新諾明、四環(huán)素、卡那霉素等藥物耐受率均超過50%;代表菌株的動(dòng)物感染試驗(yàn)結(jié)果顯示,腹腔注射小白鼠后在18h死亡數(shù)大于50%,在36h小白鼠全部死亡。綜上,北疆地區(qū)部分規(guī)�;B(yǎng)殖場(chǎng)導(dǎo)致仔豬腹瀉的主要病原為流行性腹瀉病毒繼發(fā)大腸桿菌感染,主要發(fā)病誘因包括環(huán)境、溫度、季節(jié)、豬群的免疫抗體水平等;根據(jù)PEDV流行毒株的序列分析結(jié)果,結(jié)合商品化疫苗的毒株種類,優(yōu)先選擇與流行毒株親緣關(guān)系略近的JX188454.1 AJ1102疫苗株進(jìn)行免疫;針對(duì)大腸桿菌導(dǎo)致的腹瀉,選擇耐藥性較低的抗生素,例如頭孢喹肟、阿奇霉素、洛夫沙星類等藥物進(jìn)行防治;同時(shí),需注意仔豬保暖、母豬臨產(chǎn)時(shí)的消毒,加強(qiáng)通風(fēng)及減少各種應(yīng)激因素等�,F(xiàn)場(chǎng)回訪結(jié)果表明,本研究建立的集免疫防控(根據(jù)流行毒株篩選疫苗)、藥物防治(根據(jù)藥敏試驗(yàn)篩選藥物)及消除各種發(fā)病誘因三位一體的綜合防控措施,基本控制了試驗(yàn)區(qū)豬場(chǎng)仔豬腹瀉的大面積暴發(fā),降低了豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失。
【學(xué)位單位】:石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S858.28
【部分圖文】:
繁殖場(chǎng)所可在豬體內(nèi),也可以細(xì)胞系上。目前發(fā)現(xiàn):豬甲狀腺細(xì)胞、唾液腺細(xì)胞、豬睪丸細(xì)胞、胎豬 TGEV 細(xì)胞系為 ST 與 PK15這兩種。近期研究發(fā)現(xiàn)圖 1 TGEV 模型圖Fig 1 TGEV model diagram

場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查并與場(chǎng)內(nèi)飼養(yǎng)人員、獸醫(yī)等詳細(xì)交流發(fā)病圖 1-1 北疆地區(qū)仔豬腹瀉采樣分布圖Fig. 1-1 diarrhea sampling distribution of piglets in northern xinjian

剖檢的觀察及分析臨死亡的仔豬進(jìn)行剖檢,發(fā)現(xiàn)小腸有鼓氣,且腸壁菲薄,半透明,且胃、腸道中充滿未消化的乳凝塊(圖 2-3、圖 2-4、圖 2-5);腸圖 2-2 仔豬腹瀉物Fig 2-2 diarrhoea in piglets圖 2-1 死亡的仔豬Fig 2-1 piglets died
【參考文獻(xiàn)】
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2880811
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