牛乳房炎是乳腺組織受到化學(xué)、物理、微生物病原體刺激所產(chǎn)生的一種炎癥,主要有乳中體細(xì)胞增多、乳品質(zhì)異常、乳腺組織病理變化等特點。牛奶的成分也會發(fā)生相應(yīng)的變化。其中病原體是引起奶牛乳腺炎一個重要因素,對于微生物引起的乳腺炎,奶牛自身也會產(chǎn)生抗性物質(zhì),其中乳鐵蛋白的抗菌效果較為明顯。已有文獻(xiàn)報道在牛奶中牛乳鐵蛋白的濃度在乳腺炎期間顯著增加,其增加量與疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)。乳鐵蛋白通過與細(xì)菌細(xì)胞表面直接相互作用,抑制敏感的生物體。本研究對不同致病菌感染引起的乳腺炎進(jìn)行觀察研究,并對使用誘導(dǎo)的內(nèi)毒素乳腺炎和兩種不同的乳房病原體的體內(nèi)實驗,在實驗誘導(dǎo)的內(nèi)毒素乳腺炎中,在泌乳早期和晚期使用相同的母牛研究了牛奶中Lf(bLf)濃度和檸檬酸鹽的濃度。在BME細(xì)胞模型中研究了從牛乳腺炎中分離的凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)粘附,侵入并在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的能力以及bLf的相關(guān)作用。并對乳腺炎奶牛的牛奶蛋白成分進(jìn)行SDS-PAGE電泳研究,觀察分子量變化。本研究主要結(jié)論如下:(1)通過不同菌株感染乳腺細(xì)胞,根據(jù)臨床觀察及驗證狀態(tài),研究發(fā)現(xiàn):共有11個臨床乳房炎和12個亞臨床乳房;牛乳鐵蛋白(bLf)對微生物菌株在牛乳腺細(xì)胞內(nèi)差異性不大,所有(CNS)測試結(jié)果都具有與金黃色葡萄球菌(S.aureus)相同的粘附能力。(2)受內(nèi)毒素感染的乳腺炎分泌的乳汁中,乳鐵蛋白含量明顯高于對照組,其檸檬酸鹽濃度在內(nèi)毒素激發(fā)后首先增加;受大腸桿菌感染的轉(zhuǎn)基因組和對照組細(xì)菌數(shù),皮質(zhì)醇、Hp濃度變化無太大差異性,說明和牛本身無關(guān),不同菌感染的乳腺炎差別較大。(3)對乳腺炎奶牛和健康奶牛蛋白純化及電泳分析發(fā)現(xiàn),電泳能夠把兩者蛋白分離開來,患有乳腺炎的蛋白分子量較大,健康奶牛的蛋白分子量相對較低。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S858.23
【部分圖文】：

）SDS-PAGE 凝膠制備離膠：A 液 4ml，B 液 3ml，10%過硫酸銨 100ul，TEMED10μl縮膠：A 液 0.67ml，C 液 1ml，10%過硫酸銨 50ul，TEMED5μl）樣品處理，將濃縮的蛋白溶液與 5*SDS 電泳上樣緩沖液在 Eppendor比例混勻，煮沸 5min，冷卻后離心；）加樣，分別取上述各混合液 10μl 加入到孔槽內(nèi)，同時加入 5μl 即用型準(zhǔn)（寬）；）電泳條件：恒壓 40v 至藍(lán)色條帶進(jìn)入分離膠，將電壓調(diào)高到 120v，至底部；S-PAGE 電泳完成后，取下凝膠，置考馬斯亮藍(lán)染色液中染色 30s，再在。驗結(jié)果同來源的乳腺分泌物從健康奶牛和患有乳腺炎奶牛中提取 MGs，提取的位置如圖 4-1

炎奶牛乳中的乳鐵蛋白檢測結(jié)果如表 4-表 4-1 葡萄球菌 MGSs 測量結(jié)果ble 4-1 Staphylococcus MGSs Measurement Res葡萄球菌的 MGSs 含量（μncentration of bLfa)Concentration of lowCon A affinity bLfb)670.7 99.7 264.5 117.7 1181.5 410.7 747.8 314.2dd)P < 0.01。正常奶牛的 bLf 的濃度為 670.7μg/ml，明顯高于正常奶牛中乳鐵蛋白的含量，同微生物感染的乳腺炎，乳鐵蛋白的含on A) 為 264.5μg /ml，明顯低于患有乳腺，伴刀豆球蛋白 A 的含量也有所升高，定結(jié)果
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 趙紅宇;劉曉飛;周盛華;李學(xué)琳;朱洪艷;;牛初乳中乳鐵蛋白的分離純化[J];農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊);2013年10期

2 金晶;許無恨;李明謙;張鵬;馬強(qiáng);房希碧;官員;張英;于浩;郝琳琳;劉松財;;乳鐵蛋白基因啟動子元件調(diào)控效應(yīng)分析[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2012年04期

3 白倩;張焱;汪音爵;羅堅;李巖;黃永東;馬潤宇;蘇志國;;乳腺生物反應(yīng)器表達(dá)的重組人乳鐵蛋白的分離純化及生物活性鑒定[J];生物工程學(xué)報;2010年11期

4 楊建輝;秦建華;馮向輝;陳松;韓旭東;張愛民;李鐵拴;;衡水市某奶牛場臨床型乳房炎病原菌的分離鑒定及藥敏試驗[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年11期

5 王燕平;陸小冬;;牛乳鐵蛋白ELISA檢測方法的研究[J];江西食品工業(yè);2009年04期

6 文勝;田麟;肖天舒;冉啟迪;董德賢;李榮秀;;轉(zhuǎn)基因牛乳中重組人乳鐵蛋白的仿生親和純化[J];中國生化藥物雜志;2009年02期

7 羅紅霞;任發(fā)政;;牛乳鐵蛋白及其活性多肽的研究進(jìn)展[J];中國乳業(yè);2009年01期

8 趙長紅;何高明;王彥亮;張兆霞;;奶牛乳鐵蛋白基因PCR-RFLP與隱性乳房炎的相關(guān)性分析[J];畜禽業(yè);2008年12期

9 楊鵬華;倪鳳娥;李寧;;利用轉(zhuǎn)基因牛生產(chǎn)重組人乳鐵蛋白研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年35期

10 郭亮;周磊;李忠浩;楊媛媛;宋維龍;狄和雙;王根林;;奶牛乳鐵蛋白基因部分序列的SSCP分析及其與乳房炎的關(guān)系[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2007年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 袁崢嶸;金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)奶牛實驗性乳腺炎研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 程金波;牛奶中乳鐵蛋白含量變化及其影響因素的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

2 馮挺財;牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒的研制[D];吉林大學(xué);2008年

3 周磊;bLF基因部分序列的PCR-SSCP分析及其作為乳房炎抗性分子標(biāo)記的可行性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

本文編號：2874477