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硒對DON染毒豬脾臟淋巴細(xì)胞部分細(xì)胞因子和免疫球蛋白的影響

發(fā)布時間:2020-09-11 12:33
   脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是飼料中檢出率最高的霉菌毒素。DON可通過氧化損傷促進(jìn)淋巴細(xì)胞凋亡,降低動物機(jī)體免疫力。硒具有抗氧化,提高動物機(jī)體免疫力等生物學(xué)特性。本研究以體外培養(yǎng)的原代豬脾臟淋巴細(xì)胞為模型,探究亞硒酸鈉(Na_2SeO_3)對DON染毒豬脾臟淋巴細(xì)胞部分細(xì)胞因子和免疫球蛋白的影響。試驗(yàn)分為空白對照組(C組),硒單獨(dú)作用組(S組,Na_2SeO_3的濃度為2μmol/L),DON單獨(dú)作用組(分為D1、D2、D3、D4組,DON濃度分別為100 ng/mL、200 ng/mL、400ng/mL、800 ng/mL),硒和DON共同作用組(分為SD1、SD2、SD3、SD4組,Na_2SeO_3和DON的濃度分別為2μmol/L和100 ng/mL、2μmol/L和200 ng/mL、2μmol/L和400ng/mL、2μmol/L和800 ng/mL)。培養(yǎng)12 h、24 h和48 h后,采用ELISA和qRT-PCR分別檢測體外培養(yǎng)豬脾臟淋巴培養(yǎng)上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量及細(xì)胞內(nèi)mRNA表達(dá)水平的變化。研究結(jié)果如下:(1)在12 h、24 h和48 h時,與空白對照組相比,除D1組個別指標(biāo)外,DON單獨(dú)作用組中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量和mRNA表達(dá)水平顯著降低(P0.05)。表明DON可降低部分豬脾臟淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子和免疫球蛋白蛋白含量和基因的表達(dá)水平。(2)在12 h、24 h和48 h時,與空白對照組相比,硒單獨(dú)作用組IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量和mRNA表達(dá)水平顯著升高(P0.05)。表明硒可提高豬脾臟淋巴細(xì)胞中部分細(xì)胞因子和免疫球蛋白含量和基因的表達(dá)水平。(3)在12 h、24 h和48 h時,硒和DON共同作用組中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量和基因表達(dá)量高于其相對應(yīng)DON單獨(dú)作用組,但低于空白對照組。表明硒能緩解DON所致的豬脾臟淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子和免疫球蛋白的降低。結(jié)論:硒在一定程度上可拮抗DON致脾臟淋巴細(xì)胞的細(xì)胞免疫和體液免疫的損傷作用。
【學(xué)位單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S816;S859.8
【部分圖文】:

化學(xué)結(jié)構(gòu),脫毒方法,衛(wèi)生組織,國際研究


織和世界衛(wèi)生組織等列入了國際研究的首要問題,呼吁全球要對其高具有耐酸耐堿耐高溫等特性,很難降解,動物食入 DON 后,會引起不良癥狀,還可影響動物的免疫功能[35]。下文主要圍繞 DON 的理化DON 對免疫器官的毒性、DON 誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的凋亡、對細(xì)胞因子和以及 DON 的脫毒方法展開論述。ON 的理化性質(zhì)

豬脾臟,脾臟淋巴細(xì)胞,細(xì)胞懸液,離心管


采用 SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,并用 Duncan果采用x ± SD表示,采用 P < 0.05 分析其顯著性差異,試驗(yàn)m 5 作圖。淋巴細(xì)胞的分離結(jié)果 可見,圖 A 為離心前脾臟組織細(xì)胞懸液和分離液,由于脾臟淋巴液小,所以脾臟組織細(xì)胞懸液在離心管的上層,分離液在離心管液包括脾臟淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板、粒細(xì)胞等,平離心后分層,從而得到我們所需的脾臟淋巴細(xì)胞。圖 B 表示脾后,從上到下依次是稀釋液層、環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層、透明的分

形態(tài)圖,豬脾臟,倒置顯微鏡,形態(tài)


13圖 2-3 倒置顯微鏡下豬脾臟淋巴細(xì)胞的形態(tài)(400×)Figure 2-3 The morphology of porcine splenic lymphocytes under inverted microscope圖 2-2 為瑞氏姬姆薩復(fù)合染液染色的細(xì)胞涂片,放大倍數(shù)為 400×,視野中幾有細(xì)胞的細(xì)胞核呈紫紅色,漿呈淡藍(lán)色,可斷定分離細(xì)胞為豬脾臟淋巴細(xì)胞,且分純度較高,無其他雜細(xì)胞。圖 2-3 左圖為 6 孔板培養(yǎng) 0 h 的豬脾臟淋巴細(xì)胞,放大倍數(shù)為 400×,細(xì)胞均散,輪廓清晰,折光性好。圖 2-3 右圖為 6 孔板培養(yǎng) 48h 后的豬脾臟淋巴細(xì)胞,放數(shù)為 400×,細(xì)胞輪廓清晰,折光度良好,說明細(xì)胞培養(yǎng)良好。由于豬脾臟淋巴細(xì)懸浮細(xì)胞,所以在培養(yǎng)液中增殖后為葡萄狀,如箭頭所示。

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本文編號:2816681

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