【摘要】：牛傳染性鼻氣管炎由屬于I型皰疹病毒的牛傳染性鼻氣管炎引起,除導致發(fā)病牛高熱、流鼻液、呼吸困難外,亦可造成病牛增重緩慢、產(chǎn)奶量下降、流產(chǎn)等,嚴重危害養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。為進一步了解山東省部分牛場牛傳染性鼻氣管炎感染情況,本研究對山東省部分牛場進行牛傳染性鼻氣管炎的流行病學調(diào)查,在流行病學調(diào)查過程中成功分離到一株牛傳染性鼻氣管炎病毒并對其進行了初步研究,主要內(nèi)容如下:1、山東省部分牛場牛傳染性鼻氣管炎流行病學調(diào)查選取濟南、泰安、德州、東營、濰坊、臨沂等6地15個奶牛場開展流行病學調(diào)查,共計獲得血清樣品1981份,其中犢牛血清樣品489份,成年牛血清樣品1492份,分別采用ELISA與微量血清中和法測定血清樣品中的中和抗體,結(jié)果顯示,使用ELISA法檢測,14/15的牛場為IBRV gB抗體陽性,場陽性率為93.3%,說明山東省的牛場普遍感染IBRV。進一步分析可知,不同地區(qū)、不同牛場、犢牛與成年牛的抗體陽性率差異很大,并無明顯相關(guān)性。隨機選出部分ELISA檢測為陰性、陽性的樣品進行微量血清中和法檢測,結(jié)果顯示,中和抗體檢測SN值小于5.66可作為IBRV抗體陰性的標準,微量血清中和法的陽性檢出率略低于ELISA法。2、一株牛傳染性鼻氣管炎病毒的分離鑒定在進行流行病學調(diào)查的過程中分離到一株病毒,樣品經(jīng)PCR鑒定、序列分析、接種MDBK細胞、動物回歸等試驗驗證,證明分離獲得的毒株為牛傳染性鼻氣管炎病毒,將其命名為IBRV-TA株。
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.23;S852.653
【圖文】：

用 5%的甲醛溶液滅活僅需 1min。1.1.3主要的功能基因病毒基因組全長約 135Kb，被兩個重復序列單位（分別為 IR、TR）分割成 1 個長獨特區(qū)（UL）和 1個短獨特區(qū)（US），其中 IR、TR 和夾在中間的 US可沿軸旋轉(zhuǎn)180 度，從而使病毒的 DNA 分子具有兩種異構(gòu)體（Mayfield 等，1983）。盡管 IBRV的基因組分子量大，且 G+C 含量高，但隨著測序技術(shù)的發(fā)展，于 1995 年通過國際合作完成第 1株 IBRV 的測序（Genbank 編號為 AJ004801），AJ004801 由不同毒株（Cooper、P8-2、34、Jura 株）的測序數(shù)據(jù)綜合而得，測序結(jié)果顯示病毒共有 73 個開放閱讀框（ORF），IBRV 大部分基因都由 ORF 組成。病毒基因組包含 10 個編碼糖蛋白的基因，其中 6 個基因位于 UL，分別為 gK (UL53)、gC (UL44)、gB (UL27)、gH(UL22)、gM (UL10)和 gL(UL1)，其余 4 個基因位于 US，分別為 gG (UL4)、gD (UL6)、gI (US7)和 gE (US8)，如圖 1。

DZ5 14.1%（14/99）東營DY1 32.6%（47/144）DY2 15.3%（27/176）濰坊 WF1 13.9%（11/79）臨沂LY1 4.2%（2/47）LY2 9.9%（12/121）表 9 不同地區(qū)ELISA法檢測抗體平均陽性率匯總（2016~2018年）Table 9 Summary of detection of antibody average positive rate by ELISA in different areas (2016~2018)地區(qū) 不同地區(qū)ELISA法檢測抗體平均陽性率濟南 10.2%泰安 58.0%德州 12.4%東營 20.3%濰坊 18.5%臨沂 5.0%

鑒定與蝕斑純化.45μm濾器過濾除菌后接種MD，每天觀察出現(xiàn)CPE情況。如為細胞圓縮，收獲后為F0 代；CPE。將 2 號樣品F0 與其他樣種MDBK細胞，2 號樣品F0 接葡萄串狀，收獲后為F1 代。其CPE，說明鼻拭子樣品中不包圖 3 臨床樣品 PCR 結(jié)果Fig.3 PCR result of clinical samplesrker； 1~4：1~4號臨床樣品；5：陽性對

【參考文獻】

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本文編號：2777716