發(fā)布時間：2020-07-19 03:08

【摘要】：布魯菌病是引起感染機體繁殖障礙的人畜共患病,該病的流行給畜牧業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失,對養(yǎng)殖及其相關行業(yè)人群的人身安全造成巨大威脅�；⒓t平板凝集試驗初篩,試管凝集試驗確診是我國基層檢測機構運用最廣泛的布魯菌病檢測法定方法,比濁法作為試管凝集試驗結果判定方法,依靠試驗人員的肉眼觀測,試驗結果會受到經(jīng)驗水平和主觀偏差的影響。(1)為了更加客觀地、準確地判定試管凝集試驗結果,本研究首先運用酶標儀405nm、450nm、490nm、630nm四個光譜對試管凝集試驗比濁管懸液進行掃描,對比分析比濁管在四個光譜掃描得出的OD值,確定最優(yōu)光譜作為后續(xù)研究的統(tǒng)一掃描光譜。進而國標試管凝集試驗方法,檢測72份已知凝集效價血清,比較分光光度測量法和比濁法判定結果差異。結果顯示,掃描OD值最大的光譜是405nm,且差異顯著(P0.05),線性關系決定系數(shù)R~2=0.9992,可靠性最高,確定405nm光譜為后續(xù)研究的統(tǒng)一掃描光譜。分光光度測量法和比濁法判定72份血清效價與已知效價符合率分別為83.33%(60/72)、88.89%(64/72)(P0.05),判定結果一致率94.44%,Kappa值0.770.75,表明兩種方法判定結果一致性良好。分光光度測量法判定的72份樣品、54份陽性樣品、18份可疑樣品的效價符合率比比濁法分別高出5.6%、3.7%、11.1%,并且分光光度測量法比比濁法檢出可疑樣品陽性數(shù)量低33.33%,表明分光光度測量法判定試管凝集試驗結果能夠提升待檢樣品效價準確性。(2)2017年--2018年,在漢臺區(qū)布魯氏菌病檢測工作中運用該方法,判定虎紅陽性試管凝集試驗結果,保留了原始檢測數(shù)據(jù),結果客觀、唯一。結果顯示,2017年陜西陜西省獸醫(yī)實驗室檢測能力對比活動中5份盲樣檢測結果與陜西省動物疫病預防控制中心給出的參考結果完全一致,2018年檢測田間陽性樣品,比濁法能明顯定性的樣品,經(jīng)分光光度測量法判定與比濁法判定結果一致,對于比濁法判定出現(xiàn)多種可能性結果的樣品,經(jīng)分光光度法判定能得到唯一的結果。本研究從分光光度測量法判定試管凝集試驗結果方法建立到在布魯氏菌病檢測工作中的運用,為分光光度測量法判定試管凝集試驗結果在布魯菌病監(jiān)測工作中推廣應用提供了有力的數(shù)據(jù)支持。
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S855.12
【圖文】：

圖 2-1 比濁管 OD 值線性關系Chart 2-1 linear relation of turbid tube OD value 樣品掃描結果2 份已知凝集效價血清和陰陽血清 OD 值隨樣品稀釋度增大呈現(xiàn)遞增的規(guī) 2-3），比濁管的凝集度越高 OD 值越小，凝集度++的 OD 值為 0.193。（表 2-2 72 份已知凝集效價血清掃描結果Table 2-2 Scan results for 72 samples of known agglutination titer serum樣品稀釋度Sampledilution已知凝集效價Known agglutination potency1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:101:50 0.081 0.073 0.075 0.081 0.081 0.085 0.077 0.101 0.076 0.069 0.061:100 0.082 0.076 0.084 0.231 0.073 0.080 0.138 0.261 0.068 0.150 0.081:200 0.087 0.114 0.324 0.318 0.074 0.097 0.248 0.357 0.068 0.071 0.28

價符合率高于比濁法。（圖 2-2）表 2-6 兩種判定方法檢測效價與已知效價符合數(shù)量統(tǒng)計表ble 2-6 Accordance quantitative statistics of two determination methods tested titer and known 已知凝集效價Knownglutinationpotency檢測數(shù)Detectionnumber效價符合數(shù)Agglutination potency compliancenumber符合率Accordance rate比濁法Turbidimetry分光光度測量法Spectrophotometry比濁法Turbidimetry分光光度測量Spectrophotom1:400 18 18 18 100% 100%1:200 18 17 18 94.44% 100%1:100 18 13 14 72.22% 77.78%1:50 18 12 14 66.67% 77.78%合 計 72 60 64 83.33% 88.89%

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本文編號：2761814