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家畜布魯菌病試管凝集試驗(yàn)分光光度測(cè)量判定法的研究與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2020-07-19 03:08
【摘要】:布魯菌病是引起感染機(jī)體繁殖障礙的人畜共患病,該病的流行給畜牧業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,對(duì)養(yǎng)殖及其相關(guān)行業(yè)人群的人身安全造成巨大威脅;⒓t平板凝集試驗(yàn)初篩,試管凝集試驗(yàn)確診是我國(guó)基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)運(yùn)用最廣泛的布魯菌病檢測(cè)法定方法,比濁法作為試管凝集試驗(yàn)結(jié)果判定方法,依靠試驗(yàn)人員的肉眼觀測(cè),試驗(yàn)結(jié)果會(huì)受到經(jīng)驗(yàn)水平和主觀偏差的影響。(1)為了更加客觀地、準(zhǔn)確地判定試管凝集試驗(yàn)結(jié)果,本研究首先運(yùn)用酶標(biāo)儀405nm、450nm、490nm、630nm四個(gè)光譜對(duì)試管凝集試驗(yàn)比濁管懸液進(jìn)行掃描,對(duì)比分析比濁管在四個(gè)光譜掃描得出的OD值,確定最優(yōu)光譜作為后續(xù)研究的統(tǒng)一掃描光譜。進(jìn)而國(guó)標(biāo)試管凝集試驗(yàn)方法,檢測(cè)72份已知凝集效價(jià)血清,比較分光光度測(cè)量法和比濁法判定結(jié)果差異。結(jié)果顯示,掃描OD值最大的光譜是405nm,且差異顯著(P0.05),線性關(guān)系決定系數(shù)R~2=0.9992,可靠性最高,確定405nm光譜為后續(xù)研究的統(tǒng)一掃描光譜。分光光度測(cè)量法和比濁法判定72份血清效價(jià)與已知效價(jià)符合率分別為83.33%(60/72)、88.89%(64/72)(P0.05),判定結(jié)果一致率94.44%,Kappa值0.770.75,表明兩種方法判定結(jié)果一致性良好。分光光度測(cè)量法判定的72份樣品、54份陽(yáng)性樣品、18份可疑樣品的效價(jià)符合率比比濁法分別高出5.6%、3.7%、11.1%,并且分光光度測(cè)量法比比濁法檢出可疑樣品陽(yáng)性數(shù)量低33.33%,表明分光光度測(cè)量法判定試管凝集試驗(yàn)結(jié)果能夠提升待檢樣品效價(jià)準(zhǔn)確性。(2)2017年--2018年,在漢臺(tái)區(qū)布魯氏菌病檢測(cè)工作中運(yùn)用該方法,判定虎紅陽(yáng)性試管凝集試驗(yàn)結(jié)果,保留了原始檢測(cè)數(shù)據(jù),結(jié)果客觀、唯一。結(jié)果顯示,2017年陜西陜西省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力對(duì)比活動(dòng)中5份盲樣檢測(cè)結(jié)果與陜西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心給出的參考結(jié)果完全一致,2018年檢測(cè)田間陽(yáng)性樣品,比濁法能明顯定性的樣品,經(jīng)分光光度測(cè)量法判定與比濁法判定結(jié)果一致,對(duì)于比濁法判定出現(xiàn)多種可能性結(jié)果的樣品,經(jīng)分光光度法判定能得到唯一的結(jié)果。本研究從分光光度測(cè)量法判定試管凝集試驗(yàn)結(jié)果方法建立到在布魯氏菌病檢測(cè)工作中的運(yùn)用,為分光光度測(cè)量法判定試管凝集試驗(yàn)結(jié)果在布魯菌病監(jiān)測(cè)工作中推廣應(yīng)用提供了有力的數(shù)據(jù)支持。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S855.12
【圖文】:

線性關(guān)系,血清,樣品掃描


圖 2-1 比濁管 OD 值線性關(guān)系Chart 2-1 linear relation of turbid tube OD value 樣品掃描結(jié)果2 份已知凝集效價(jià)血清和陰陽(yáng)血清 OD 值隨樣品稀釋度增大呈現(xiàn)遞增的規(guī) 2-3),比濁管的凝集度越高 OD 值越小,凝集度++的 OD 值為 0.193。(表 2-2 72 份已知凝集效價(jià)血清掃描結(jié)果Table 2-2 Scan results for 72 samples of known agglutination titer serum樣品稀釋度Sampledilution已知凝集效價(jià)Known agglutination potency1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:101:50 0.081 0.073 0.075 0.081 0.081 0.085 0.077 0.101 0.076 0.069 0.061:100 0.082 0.076 0.084 0.231 0.073 0.080 0.138 0.261 0.068 0.150 0.081:200 0.087 0.114 0.324 0.318 0.074 0.097 0.248 0.357 0.068 0.071 0.28

效價(jià),符合率,判定方法,比濁法


價(jià)符合率高于比濁法。(圖 2-2)表 2-6 兩種判定方法檢測(cè)效價(jià)與已知效價(jià)符合數(shù)量統(tǒng)計(jì)表ble 2-6 Accordance quantitative statistics of two determination methods tested titer and known 已知凝集效價(jià)Knownglutinationpotency檢測(cè)數(shù)Detectionnumber效價(jià)符合數(shù)Agglutination potency compliancenumber符合率Accordance rate比濁法Turbidimetry分光光度測(cè)量法Spectrophotometry比濁法Turbidimetry分光光度測(cè)量Spectrophotom1:400 18 18 18 100% 100%1:200 18 17 18 94.44% 100%1:100 18 13 14 72.22% 77.78%1:50 18 12 14 66.67% 77.78%合 計(jì) 72 60 64 83.33% 88.89%

【相似文獻(xiàn)】

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2 方元超;飲料乳濁液及其濁度的分光光度法測(cè)量[J];中國(guó)食品添加劑;2003年04期

3 肖韶榮,王奎雄;可見光譜區(qū)聲光快速分光光度術(shù)的實(shí)驗(yàn)研究[J];光學(xué)精密工程;1996年04期

4 張梓華;;分光光度測(cè)量中的狹縫寬度誤差及其修正[J];計(jì)量學(xué)報(bào);1981年01期

5 邢德林;劉俊清;張國(guó)峰;孫敏;;用于透射比標(biāo)定的高精度分光光度測(cè)量裝置[J];化學(xué)計(jì)量;1992年01期

6 趙新華;孫永莉;;基于后分光測(cè)量技術(shù)的分光光度計(jì)設(shè)計(jì)探討[J];計(jì)量與測(cè)試技術(shù);2017年03期

7 陳朝方,李忠,郭建,羅玉瑋;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定苯乙烯中的阻聚劑對(duì)叔丁基鄰苯二酚[J];色譜;2002年03期

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10 羅中吉;羅樂;;羅紅霉素與1,2,5,8-四羥基蒽醌的荷移反應(yīng)研究[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2012年36期

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1 趙s

本文編號(hào):2761814


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