【摘要】：馬立克氏病(Marek’s Disease,MD)是一種由馬立克病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)引起的可導致腫瘤發(fā)生的疾病,在臨床上被分為四種型,分別為:神經(jīng)型、皮膚型、內(nèi)臟型和眼型。該病致死率極高,且傳播迅速,危害巨大。動物機體的新陳代謝、免疫及健康情況與腸道菌群的平橫關系密切。動物機體中最大的免疫器官是腸道,其腸道菌群與動物機體互利共生,動物腸道菌群保持平衡,可以維持動物的健康生長。本研究應用MDV對SPF雞進行感染,并通過HE染色法制作雞肝臟、脾臟、空腸和盲腸的組織切片,以觀察各組織的病理變化,通過高通量測序技術對MDV感染雞和正常對照組雞空腸內(nèi)容物微生物進行菌群多樣性組成分析,研究MDV感染對雞空腸菌群多樣性的影響;應用ELISA檢測法、比色法和微板法檢測血清和空腸內(nèi)容物中乳酸含量、透明質(zhì)酸含量、乳酸脫氫酶活性和乳糖酶活性,研究MDV感染對雞空腸內(nèi)容物及相關血液生化指標的影響,探討其變化與腸道菌群多樣性的關系。組織病理學檢測結果表明,MDV感染雞空腸、盲腸、脾臟、肝臟等組織均有出血、淤血及大面積的炎性浸潤等現(xiàn)象出現(xiàn)。高通量測序結果表明,MDV感染雞與對照組雞相比空腸菌群多樣性發(fā)生變化,在屬水平上具有顯著差異的菌群共有24種,其中差異極顯著的菌群有6種(P0.01),差異顯著的菌群有18種(P0.05),致病菌呈上調(diào)趨勢,有益菌(如乳酸菌)呈下調(diào)趨勢,且致病菌群(如葡萄球菌、放線菌等)的致病特征與MD關聯(lián)密切,說明MDV感染可改變空腸微生物多樣性,對其種類和數(shù)量均產(chǎn)生影響,這可能是導致MD發(fā)病過程中腸道、臟器出血點形成臨床癥狀的重要因素。對MDV感染雞血清和空腸內(nèi)容物中乳酸、乳酸脫氫酶、透明質(zhì)酸及乳糖酶的分析結果表明,與正常對照組雞相比,MDV感染雞血清及空腸內(nèi)容物乳酸含量和透明質(zhì)酸含量均呈上調(diào)趨勢,差異極顯著(P0.01);乳酸脫氫酶活性呈上調(diào)趨勢,差異顯著(P0.05);乳糖酶活性呈下調(diào)趨勢,差異極顯著(P0.01)。研究結果顯示MDV感染對雞血液及空腸乳酸含量、透明質(zhì)酸含量、乳糖酶活性、乳酸脫氫酶活性等均產(chǎn)生顯著或及顯著影響,可能是由于腸道菌群變化影響機體對該類物質(zhì)的代謝通路及相關的酶活性所致。本研究表明,MDV感染可通過影響雞腸道菌群多樣性和腸道代謝物組分,進而對血液生化指標產(chǎn)生影響,這可能是MDV致病的因素之一。本研究結果可為MD防控藥物開發(fā)及臨床診斷提供參考,為家禽的健康養(yǎng)殖奠定基礎。
【學位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.31
【圖文】：

圖 1-1 雞空腸內(nèi)容物 OTU 豐度曲線Figure 1-1 fowls jejunum contents OTU abundance curve表隨機抽取的 12 個樣品的序列總數(shù)；縱坐標代表在測定的深度下觀測到的 OTU 數(shù)，Ckc2、Ckc3、照組飼養(yǎng) 42 d 后的腸道內(nèi)容物樣品。 Mkc1、Mkc2、Mkc3、Mkc4、Mkc6 和 Mkc7 分別代表 MDws the total number of sequences of 12 samples randomly selected; the ordinate represents the number of O Ckc2, Ckc3, Ckc4, Ckc5, Ckc6 and Ckc10 represent the control group for 42 days. After the intestinal cont Mkc6 and Mkc7 represent the intestinal contents samples after 42 days of feeding in the MDV-infected gro樣品（組內(nèi)）菌群結構相似性結果與分析腸內(nèi)微生物群落結構相似性分析結果niFrac 距離對雞樣品 NMDS 非度量多維尺度分析結果表明，M腸內(nèi)容物樣品組內(nèi)的微生物群落結構相似性較高（藍色點和紅間微生物群落結構相似性較低，組間差異大于組內(nèi)差異，所圖 1-2）。

圖 1-2 雞空腸菌群相似性分析結果Figure 1-2 fowls jejunal flora similarity analysis results代表一個樣品，不同顏色的點屬于不同組（藍色為 MDV 感染組，紅色為對照組），兩個點之間的距離越近相似度越高，反之則越低。igure 1-2 represents a sample. The dots of different colors belong to different groups (blue is the MDV infhe distance between the two points indicates the flora between the two samples. Structural similarity, the cl and vice versa.腸內(nèi)微生物菌群組內(nèi)、組間差異分析結果iFrac 距離分析法對雞 MDV 感染組與正常對照組組間/組內(nèi)樣，兩組的組間差異明顯高于組內(nèi)差異（P<0.05），證明兩組間有統(tǒng)計學差異（見圖 1-3）。

圖 1-3 雞空腸菌群組間（內(nèi)）差異比較分析結果gure 1-3 Comparative analysis of the differences between fowls cochlear gro從左到右分別為所有樣品組內(nèi)比較、所有樣品組間比較、MDV 感染組樣品組內(nèi)比較、正常對照組樣品之間比較，縱坐標表示各比較組之間相應的距離值，箱線圖中間的紅色線代表中位值。he abscissa is from left to right for comparison within all sample groups, comparison between all sample grn group, normal control group, MDV infection group and normal control group. For comparison between snding distance value between each comparison group, and the red line in the middle of the box line diagram樣品組間菌群多樣性差異分析結果etastats 分析對雞空腸樣品組間菌群多樣性差異分析結果表明，上具有顯著差異的菌群共有 5 種；在屬水平上具有顯著差異的4）。在屬水平上，兩組差異極顯著的菌群共 6 種（P<0.01），（P<0.05）（見表 1-5）。各菌群分別在兩組腸道內(nèi)容物中所

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1 及明慧;MDV感染對雞空腸菌群多樣性及其相關血液生化指標的影響[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2019年

本文編號：2758838