【摘要】：產蛋性狀是鵝重要的經濟性狀,而鵝產蛋性能低下嚴重制約鵝產業(yè)的發(fā)展。禽類的生殖功能是由下丘腦-垂體-性腺軸系統(tǒng)的各類激素之間復雜的相互調控作用所決定。GnRH與GnIH已被證明是下丘腦-垂體-性腺軸(hypothalamus-pituitary-gonadal axis,HPG)的關鍵信號分子。下丘腦釋放的促性腺激素釋放激素與抑制激素作用于垂體,調節(jié)垂體促性腺激素的分泌,促性腺激素通過外周血液循環(huán)影響性腺的內分泌和外分泌,從而控制動物的個體發(fā)育以及生殖過程。有研究表明,GnRH與GnIH基因可作為影響豬、牛、羊等動物繁殖性能的候選基因。目前,有關鵝GnRH與GnIH基因的研究很少見報道。本研究選用四川白鵝為試驗動物,開展了鵝GnRH和GnIH基因組序列克隆、基因結構分析與SNP檢測;采用PCR-RFLP、PCR-SSCP的方法檢測鵝GnRH、GnIH的基因型并分析其與產蛋量的關聯性。獲得的主要研究結果如下:四川白鵝GnRH基因DNA序列長3520bp,包括4個外顯子和3個內含子;mRNA序列比對發(fā)現鵝與雁GnRH基因的相似性最高,達到92%;共檢測到鵝GnRH基因28個SNPs位點,包括外顯子上的1個SNP位點(g.3447AC)和內含子上的27個SNPs位點;對內含子1的突變位點(g.490AG)采用BclⅠ限制性內切酶進行酶切分型,共產生3種基因型,分別定義為AA、AB、BB,三種基因型鵝的產蛋量無顯著差異(P0.05);對外顯子的突變位點(g.3447TG)用PCR-SSCP進行分析,得到三種基因型(TT、TG、GG),三種基因型鵝的產蛋量差異不顯著(P0.05)。四川白鵝GnIH基因DNA序列長7621bp,包括4個外顯子和3個內含子;mRNA序列比對發(fā)現鵝GnIH基因與灰雁、原雞、鵪鶉的相似性分別高達99%、91%、90%。檢測到鵝GnIH基因內含子上有18個SNPs,外顯子上有15個SNPs,其中外顯子230bp處的堿基GAA缺失、2164bp處的CG突變、2228bp處的TA突變均導致氨基酸發(fā)生改變,分別為p.38Glu In Del、p.100ProArg、p.123TryAsn。采用PCR-SSCP方法對外顯子1的230bp處堿基GAA缺失與內含子2的3262bp處堿基TTTTG缺失進行基因型分析,均產生兩種基因型,分別定義為AA、Aa型與HH、Hh型;AA、Aa基因型及HH、Hh基因型鵝產蛋量差異均不顯著(P0.05)。采用SmaⅠ與EcoR V酶切的方法分別對內含子1(g.1320GA)與外顯子3(g.3553TC)的突變位點進行基因型分析,結果顯示:1320bp處酶切產生的CC基因型鵝產蛋量顯著高于CD與DD基因型(P0.05);3553bp酶切產生的EE、EF、FF三種基因型鵝產蛋量差異不顯著(P0.05)。本研究首次獲得了四川白鵝GnRH、GnIH基因DNA序列與SNP位點;GnIH基因g.1320GA突變所產生的CC基因型產蛋量顯著高于其他兩種基因型產蛋量。該研究結果為鵝GnRH、GnIH基因功能的進一步研究奠定基礎,為鵝產蛋調控機制的研究提供了參考。
【學位授予單位】：西南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S835
【圖文】：

綜述RH 基因研究進展腺激素釋放激素（gonadotropin-releasing hormone，Gn釋放激素（luteinizing hormone-releasing hormone，LHly[1]和 Guillenmin[2]于 1971 年，從 16 萬頭豬的下丘腦nRH并首次分離提純獲得的一類由單拷貝基因GnRH表種不同氨基酸殘基組成的直鏈十肽促激素，其氨基酸u-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2。GnRH 最重為生殖系統(tǒng)的一種關鍵性神經調節(jié)物質，刺激垂體分泌素（luteinizing hormone, LH）和卵泡刺激素（follicle-se, FSH）。隨著分子生物學的迅速發(fā)展，GnRH 已被證明是腺軸（hypothalamus-pituitary-gonadal axis, HPG）的關鍵信過程的重要激素。

圖 2 GnIH 前體蛋白結構Fig.2 Precursor protein structure of GnIH將鵪鶉腦中的 GnIH 分離出來，此后在鳥類一種能編碼mRNA 也被克隆出來[58]。Tobari Y[59]利用 5’和 3’Race 獲2bp的全基因序列，其基因結構為2個內含子和3個外顯腦組織并成功獲得了 GnIH 前體肽的 cDNA。Ikemoto 隆技術獲得 971bp 雞 GnIH 基因的 cDNA 序列，該序列組成的 5’-調控區(qū)、519 個核苷酸組成的開放閱讀框和 3’-調控區(qū)。其中開放閱讀框可以編碼含有 173 個氨基酸基因結構與斑胸草雀基因結構一致也由 2 個內含子和 3 后克隆獲得鴨子 GnIH 前體 1389bp 的完整序列，開放氨基酸。董霞[61]通過測序獲得了鵝 GnIH 基因 CDS 區(qū)1bp 長度的序列，與禽類的 GnIH 相似性達到 87%以k 登錄號：KC_514473。李洵[62]將豬的 24 個組織混合樣GnIH基因442bp編碼146個氨基酸殘基的基因序列。Ts

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 胡彥競科;張克山;鐘航;王啟貴;劉安芳;;鵝GnIH基因多態(tài)性及其與產蛋量的關聯性研究[J];中國畜牧雜志;2016年21期

2 張克山;胡彥競科;韓笑哲;高廣亮;鐘航;王啟貴;;鵝不同繁殖時期GnRH和GnIH基因表達和激素濃度變化分析[J];畜牧獸醫(yī)學報;2016年08期

3 王曉曄;霍孔林;肖凱;郭庚霖;李s

本文編號：2729002