【摘要】：精子冷凍保存是人工授精技術(shù)的必要手段之一,在生產(chǎn)進(jìn)程中,精子冷凍保護(hù)劑的成分是至關(guān)重要的。蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸化是判斷精子是否獲能的指標(biāo)之一。在精子獲能過程中產(chǎn)生的ROS,當(dāng)ROS積累一定水平時(shí)會(huì)產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)。為了防止氧化應(yīng)激,減少對(duì)精子的冷凍損傷或阻止過早精子成熟,在冷凍保護(hù)劑中添加抗氧化劑補(bǔ)充劑可以提供對(duì)潛在ROS聚集有著增強(qiáng)保護(hù)的作用。研究發(fā)現(xiàn),藏紅花素(crocin)是一種有效的抗氧化劑,具有降低脂質(zhì)過氧化,線粒體和溶酶體膜損傷的能力,類似于保護(hù)劑。本試驗(yàn)的目的是研究藏紅花素作為冷凍保護(hù)劑的成分對(duì)牛精子的獲能及質(zhì)量的影響以及相關(guān)抗氧化基因及凋亡基因表達(dá)量的影響。在精子冷凍保護(hù)劑中添加0、0.5、1、15、2mM的crocin,進(jìn)行冷凍兩周,在解凍后,進(jìn)行檢測(cè)精子CASA檢查、低滲腫脹實(shí)驗(yàn)、考馬斯染色試驗(yàn)來以及CASA輔助儀器測(cè)得的精子活力指標(biāo),濃度在0.5mM時(shí)精子形態(tài)質(zhì)量及運(yùn)動(dòng)質(zhì)量與對(duì)照組不明顯差別,但在處理組中效果最好(P0.05);評(píng)估冷凍-解凍后的精子獲能后蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸化水平,其蛋白量為35kDa,crocin(0.5mM)是酪氨酸磷酸化水平最高的(P0.05),但與對(duì)照組差異不明顯;在相關(guān)抗氧化基因中,crocin(0.5mM)MAD、CAT和GPX的mRNA表達(dá)量最高,在相關(guān)凋亡基因中,crocin(0.5mM)Caspase-3,TNF-amRNA表達(dá)量最低(P0.05),Caspase-8表達(dá)量與對(duì)照組差異不不顯著但著低于其他處理組。綜上所述,添加藏紅花素能夠提高精子的抗氧化性減少細(xì)胞凋,且對(duì)精子質(zhì)量沒有明顯的損傷,同時(shí)有助于精子獲能。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S823
【圖文】：

邐延邊大學(xué)碩士畢業(yè)論文邐逡逑第三章結(jié)果與分析逡逑３．邋１不同濃度ｃｒｏｃ邋ｉｎ處理凍融牛精子的質(zhì)量的影響逡逑在冷凍保護(hù)劑中添加不同濃度的ｃｒｏｃｉｎ邋（ＯｍＭ、０．５ｍＭ、ＩｍＭ、１．５ｍＭ、逡逑２邋ｒｎＭ邋）。如表３－１所示，０．５邋ｍＭ處理組的精子存活率、質(zhì)膜完整性和頂體膜完逡逑整性與對(duì)照組差異不顯著；數(shù)據(jù)表明，添加０．５邋ｍＭ的ｃｒｏｃｉｎ處理著ｒｔ邋丁其逡逑他三組（Ｐ＜０．０５）；隨之ｃｒｏｃｉｎ的濃度不斷升高，其精子活力、質(zhì)膜完整性、頂逡逑體完整性不斷下降（如圖３－１、３－２）。逡逑表３－１－１不同濃度藏紅花素凍融中精子屮物學(xué)性狀的影響逡逑Ｔａｂｌｅ邋３－１－１邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ邋ｃｒｏｃｉｎ邋ｉｎ邋ｆｒｅｅｚｅ－ｔｈａｗｅｄ邋ｂｏｖｉｎｅ邋ｓｐｅｍｉ邋ｔｒａｉｔｓ逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 平述煌;楊世華;;精子冷凍保存技術(shù)及研究進(jìn)展[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2011年03期

2 金花,許斌,姜曉東;種公牛精液冷凍保存技術(shù)和質(zhì)量評(píng)定[J];新疆農(nóng)業(yè)科學(xué);2003年S1期

本文編號(hào)：2714277