本文關(guān)鍵詞：滸苔多糖對肉仔雞免疫及生長性能影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：多糖是機體的供能物質(zhì)和組成材料,廣泛存在于動物細胞膜和植物、微生物的細胞壁中。近年來,隨著分離技術(shù)的進步、檢測水平的提高,人們發(fā)現(xiàn)多糖及其復合物除了參與機體細胞的各種生命活動外,還具有諸如抗凝血、降血糖、抗病毒、抑腫瘤、減緩機體衰老和增強動物免疫力等一系列特異的生物活性,尤為可貴的是多糖對機體并沒有毒副作用,是理想的藥物來源之一,獲得了人們的廣泛關(guān)注。滸苔多糖(Enteromorpha polysaccharide,EP)是從滸苔中分離得到的生物活性物質(zhì),不僅具有降血脂、降血糖、抗氧化等活性,還具有較強的免疫調(diào)節(jié)作用,是藥物與食品研究開發(fā)的良好原料。本研究以滸苔多糖為材料,在對其結(jié)構(gòu)和生物活性進行初步研究之后,通過在飲水中添加小同劑量的EP,測定與肉仔雞的生長及免疫相關(guān)的指標,研究了EP對肉仔雞免疫及生長性能的影響,旨在為以滸苔為基礎(chǔ)進一步開發(fā)新型綠色飼料添加劑提供理論依據(jù),主要研究結(jié)果如下:結(jié)構(gòu)分析及體外生物活性檢測結(jié)果表明,EP具有多糖的典型結(jié)構(gòu)和生物活性。其中,紅外光譜分析顯示EP具有多糖的典型特征性吸收峰,且富含硫酸基團;體外抗氧化能力測定表明EP具有一定的抗氧化活性,并表現(xiàn)為量效關(guān)系,即一定范圍內(nèi),其抗氧化效果隨著濃度的增加而加強;MTT試驗結(jié)果顯示EP能夠促進雞外周血淋巴細胞的增殖,其最大安全濃度為125ug/m L,最大增殖率為28.643%,并與植物血凝素(PHA)具有協(xié)同作用。體內(nèi)試驗選用1日齡AA肉雞200只,以正常飲水作為對照,EP設(shè)低(0.5‰)、中(1.0‰)、高(2.0‰)3個劑量組進行雛雞飲飼試驗,通過免疫器官指數(shù)、腸絨毛形態(tài)、血清HI抗體滴度、黏膜抗體水平等方面研究了EP對肉仔雞免疫性能的影響;通過平均日采食量、平均日增重和料肉比等指標研究了EP對肉仔雞生長性能的影響,研究發(fā)現(xiàn):EP能夠促進肉仔雞脾臟和法氏囊的發(fā)育,提高免疫器官指數(shù);EP能夠提高雞群血清HI抗體效價,其中1.0‰EP組的效果最顯著(P0.05);EP能夠增強試驗雞的黏膜免疫反應,提高膽汁、氣管洗液、十二指腸洗液中特異性SIg A抗體水平,其中1.0‰EP組的特異性SIg A抗體水平最高(P0.05);EP能夠提高試驗雞平均日采食量和平均日增重,降低料肉比,對肉仔雞的生長有明顯的促進作用,其中1.0‰EP組效果最顯著(P0.05);EP顯著增加了試驗雞十二指腸、空腸及回腸的絨毛長度和寬度、肌肉厚度、黏膜厚度及絨腺比值,其中0.5‰和1.0‰的添加劑量效果較為顯著(P0.05)。綜上所述,EP具有較強的抗氧化活性和促進雞外周血淋巴細胞增殖的能力,對肉仔雞免疫及生長性能具有顯著的增強和促進作用,1.0‰的飲水濃度為最佳添加劑量。
【關(guān)鍵詞】：滸苔多糖 肉仔雞 免疫性能 生長性能 抗氧化活性 細胞增殖
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S831.5
【目錄】：

• 符號及縮略語4-9
• 中文摘要9-11
• ABSTRACT11-13
• 1 引言13-18
• 1.1 多糖免疫增強及促生長作用研究概況13-14
• 1.2 滸苔多糖的研究進展14-17
• 1.2.1 滸苔多糖的化學成分研究概況14-15
• 1.2.2 滸苔多糖的生物活性研究進展15-17
• 1.2.2.1 抗氧化作用15
• 1.2.2.2 免疫增強作用15-16
• 1.2.2.3 降血脂、降血糖作用16
• 1.2.2.4 抗菌、抗病毒作用16
• 1.2.2.5 生長促進作用16-17
• 1.3 本研究目的及意義17-18
• 2 材料與方法18-29
• 2.1 材料18-21
• 2.1.1 試驗藥物18
• 2.1.2 試驗動物及飼料18
• 2.1.3 疫苗及病毒18
• 2.1.4 主要試劑及配制18-21
• 2.1.4.1 粗糖純化所需試劑18
• 2.1.4.2 多糖含量測定所需試劑18
• 2.1.4.3 多糖抗氧化能力測定所需試劑及配制18-19
• 2.1.4.4 細胞增殖所需試劑及配制19-20
• 2.1.4.5 腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察所需試劑20
• 2.1.4.6 ELISA所需試劑及配制20
• 2.1.4.7 抗體效價所需材料20-21
• 2.1.5 主要儀器21
• 2.2 方法21-25
• 2.2.1 滸苔粗多糖的精制21
• 2.2.2 滸苔多糖含量的測定21-22
• 2.2.2.1 葡萄糖標準曲線的制作21-22
• 2.2.2.2 樣品多糖含量的測定22
• 2.2.3 滸苔多糖的紅外光譜分析22
• 2.2.4 滸苔多糖體外抗氧化能力的測定22-24
• 2.2.4.1 滸苔多糖對DPPH·清除能力的測定22
• 2.2.4.2 滸苔多糖對羥基自由基清除力的測定22-23
• 2.2.4.3 滸苔多糖對超氧陰離子自由基（O2-?）清除能力的測定23-24
• 2.2.4.4 滸苔多糖對鐵離子還原能力的測定24
• 2.2.5 滸苔多糖對雞外周血淋巴細胞最大安全濃度的測定24
• 2.2.6 外周血淋巴細胞增殖試驗24-25
• 2.3 動物分組及處理25
• 2.4 樣品采集方法25-26
• 2.5 生長性能指標測定26
• 2.6 免疫性能指標測定26-28
• 2.6.1 免疫器官指數(shù)測定26
• 2.6.2 腸道組織形態(tài)測定26
• 2.6.3 NDV特異性SIg A抗體水平的測定26-27
• 2.6.3.1 抗原最佳包被濃度和樣品最適稀釋濃度的確定26-27
• 2.6.3.2 間接ELISA程序27
• 2.6.4 血清HI抗體效價的測定27-28
• 2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析28-29
• 3 結(jié)果與分析29-49
• 3.1 滸苔多糖含量的測定29
• 3.2 滸苔多糖的紅外光譜分析29
• 3.3 多糖的抗氧化活性29-32
• 3.3.1 滸苔多糖對DPPH·自由基的清除能力29-30
• 3.3.2 滸苔多糖對羥基自由基的清除能力30-31
• 3.3.3 滸苔多糖對超氧陰離子自由基（O_2~-·）的清除能力31
• 3.3.4 滸苔多糖對鐵離子的還原能力31-32
• 3.4 滸苔多糖對雞外周血淋巴細胞增殖的影響32-33
• 3.4.1 滸苔多糖最大安全濃度的確定32-33
• 3.4.2 滸苔多糖對外周血淋巴細胞增殖的影響33
• 3.4.3 滸苔多糖協(xié)同PHA刺激對外周血淋巴細胞增殖的影響33
• 3.5 滸苔多糖對肉仔雞生長性能的影響33-36
• 3.5.1 滸苔多糖對平均日采食量的影響33-34
• 3.5.2 滸苔多糖對平均日增重的影響34-35
• 3.5.3 滸苔多糖對料肉比的影響35-36
• 3.6 滸苔多糖對肉仔雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響36-44
• 3.6.1 滸苔多糖對十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響36-39
• 3.6.2 空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)變化39-41
• 3.6.3 回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化41-44
• 3.7 滸苔多糖對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響44-45
• 3.7.1 滸苔多糖對脾臟指數(shù)的影響44-45
• 3.7.2 滸苔多糖對法氏囊指數(shù)的影響45
• 3.8 滸苔多糖對NDV特異性SIg A抗體水平的影響45-48
• 3.8.1 間接ELISA方法最佳反應條件確定結(jié)果45-46
• 3.8.2 膽汁中NDV特異性SIg A抗體水平變化46
• 3.8.3 十二指腸洗液中NDV特異性SIg A抗體水平變化46-47
• 3.8.4 氣管洗液中NDV特異性SIg A抗體水平變化47-48
• 3.9 滸苔多糖對血清HI抗體效價的影響48-49
• 4 討論49-55
• 4.1 多糖的提取、純化及結(jié)構(gòu)鑒定49-50
• 4.1.1 多糖的提取及純化方法49
• 4.1.2 多糖的含量測定方法49
• 4.1.3 多糖的紅外光譜分析49-50
• 4.2 多糖的抗氧化能力50
• 4.3 滸苔多糖對雞外周血淋巴細胞增殖的影響50-51
• 4.3.1 滸苔多糖對細胞生長的影響50-51
• 4.3.2 滸苔多糖對淋巴細胞增殖的影響51
• 4.4 滸苔多糖對肉仔雞生長性能的影響51-52
• 4.5 滸苔多糖對雞腸道發(fā)育的影響52-53
• 4.6 滸苔多糖對肉仔雞新城疫疫苗免疫應答的影響53-55
• 4.6.1 滸苔多糖對雛雞免疫器官發(fā)育的影響53-54
• 4.6.2 滸苔多糖對雛雞黏膜免疫的影響54
• 4.6.3 滸苔多糖對雛雞體液免疫的影響54-55
• 5 結(jié)論55-56
• 參考文獻56-65
• 致謝65-66
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況66

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7 丁月e

本文編號：269532