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滸苔多糖對(duì)肉仔雞免疫及生長(zhǎng)性能影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-03-26 23:15

  本文關(guān)鍵詞:滸苔多糖對(duì)肉仔雞免疫及生長(zhǎng)性能影響的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:多糖是機(jī)體的供能物質(zhì)和組成材料,廣泛存在于動(dòng)物細(xì)胞膜和植物、微生物的細(xì)胞壁中。近年來(lái),隨著分離技術(shù)的進(jìn)步、檢測(cè)水平的提高,人們發(fā)現(xiàn)多糖及其復(fù)合物除了參與機(jī)體細(xì)胞的各種生命活動(dòng)外,還具有諸如抗凝血、降血糖、抗病毒、抑腫瘤、減緩機(jī)體衰老和增強(qiáng)動(dòng)物免疫力等一系列特異的生物活性,尤為可貴的是多糖對(duì)機(jī)體并沒(méi)有毒副作用,是理想的藥物來(lái)源之一,獲得了人們的廣泛關(guān)注。滸苔多糖(Enteromorpha polysaccharide,EP)是從滸苔中分離得到的生物活性物質(zhì),不僅具有降血脂、降血糖、抗氧化等活性,還具有較強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用,是藥物與食品研究開(kāi)發(fā)的良好原料。本研究以滸苔多糖為材料,在對(duì)其結(jié)構(gòu)和生物活性進(jìn)行初步研究之后,通過(guò)在飲水中添加小同劑量的EP,測(cè)定與肉仔雞的生長(zhǎng)及免疫相關(guān)的指標(biāo),研究了EP對(duì)肉仔雞免疫及生長(zhǎng)性能的影響,旨在為以滸苔為基礎(chǔ)進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新型綠色飼料添加劑提供理論依據(jù),主要研究結(jié)果如下:結(jié)構(gòu)分析及體外生物活性檢測(cè)結(jié)果表明,EP具有多糖的典型結(jié)構(gòu)和生物活性。其中,紅外光譜分析顯示EP具有多糖的典型特征性吸收峰,且富含硫酸基團(tuán);體外抗氧化能力測(cè)定表明EP具有一定的抗氧化活性,并表現(xiàn)為量效關(guān)系,即一定范圍內(nèi),其抗氧化效果隨著濃度的增加而加強(qiáng);MTT試驗(yàn)結(jié)果顯示EP能夠促進(jìn)雞外周血淋巴細(xì)胞的增殖,其最大安全濃度為125ug/m L,最大增殖率為28.643%,并與植物血凝素(PHA)具有協(xié)同作用。體內(nèi)試驗(yàn)選用1日齡AA肉雞200只,以正常飲水作為對(duì)照,EP設(shè)低(0.5‰)、中(1.0‰)、高(2.0‰)3個(gè)劑量組進(jìn)行雛雞飲飼試驗(yàn),通過(guò)免疫器官指數(shù)、腸絨毛形態(tài)、血清HI抗體滴度、黏膜抗體水平等方面研究了EP對(duì)肉仔雞免疫性能的影響;通過(guò)平均日采食量、平均日增重和料肉比等指標(biāo)研究了EP對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響,研究發(fā)現(xiàn):EP能夠促進(jìn)肉仔雞脾臟和法氏囊的發(fā)育,提高免疫器官指數(shù);EP能夠提高雞群血清HI抗體效價(jià),其中1.0‰EP組的效果最顯著(P0.05);EP能夠增強(qiáng)試驗(yàn)雞的黏膜免疫反應(yīng),提高膽汁、氣管洗液、十二指腸洗液中特異性SIg A抗體水平,其中1.0‰EP組的特異性SIg A抗體水平最高(P0.05);EP能夠提高試驗(yàn)雞平均日采食量和平均日增重,降低料肉比,對(duì)肉仔雞的生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用,其中1.0‰EP組效果最顯著(P0.05);EP顯著增加了試驗(yàn)雞十二指腸、空腸及回腸的絨毛長(zhǎng)度和寬度、肌肉厚度、黏膜厚度及絨腺比值,其中0.5‰和1.0‰的添加劑量效果較為顯著(P0.05)。綜上所述,EP具有較強(qiáng)的抗氧化活性和促進(jìn)雞外周血淋巴細(xì)胞增殖的能力,對(duì)肉仔雞免疫及生長(zhǎng)性能具有顯著的增強(qiáng)和促進(jìn)作用,1.0‰的飲水濃度為最佳添加劑量。
【關(guān)鍵詞】:滸苔多糖 肉仔雞 免疫性能 生長(zhǎng)性能 抗氧化活性 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S831.5
【目錄】:
  • 符號(hào)及縮略語(yǔ)4-9
  • 中文摘要9-11
  • ABSTRACT11-13
  • 1 引言13-18
  • 1.1 多糖免疫增強(qiáng)及促生長(zhǎng)作用研究概況13-14
  • 1.2 滸苔多糖的研究進(jìn)展14-17
  • 1.2.1 滸苔多糖的化學(xué)成分研究概況14-15
  • 1.2.2 滸苔多糖的生物活性研究進(jìn)展15-17
  • 1.2.2.1 抗氧化作用15
  • 1.2.2.2 免疫增強(qiáng)作用15-16
  • 1.2.2.3 降血脂、降血糖作用16
  • 1.2.2.4 抗菌、抗病毒作用16
  • 1.2.2.5 生長(zhǎng)促進(jìn)作用16-17
  • 1.3 本研究目的及意義17-18
  • 2 材料與方法18-29
  • 2.1 材料18-21
  • 2.1.1 試驗(yàn)藥物18
  • 2.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼料18
  • 2.1.3 疫苗及病毒18
  • 2.1.4 主要試劑及配制18-21
  • 2.1.4.1 粗糖純化所需試劑18
  • 2.1.4.2 多糖含量測(cè)定所需試劑18
  • 2.1.4.3 多糖抗氧化能力測(cè)定所需試劑及配制18-19
  • 2.1.4.4 細(xì)胞增殖所需試劑及配制19-20
  • 2.1.4.5 腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察所需試劑20
  • 2.1.4.6 ELISA所需試劑及配制20
  • 2.1.4.7 抗體效價(jià)所需材料20-21
  • 2.1.5 主要儀器21
  • 2.2 方法21-25
  • 2.2.1 滸苔粗多糖的精制21
  • 2.2.2 滸苔多糖含量的測(cè)定21-22
  • 2.2.2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作21-22
  • 2.2.2.2 樣品多糖含量的測(cè)定22
  • 2.2.3 滸苔多糖的紅外光譜分析22
  • 2.2.4 滸苔多糖體外抗氧化能力的測(cè)定22-24
  • 2.2.4.1 滸苔多糖對(duì)DPPH·清除能力的測(cè)定22
  • 2.2.4.2 滸苔多糖對(duì)羥基自由基清除力的測(cè)定22-23
  • 2.2.4.3 滸苔多糖對(duì)超氧陰離子自由基(O2-?)清除能力的測(cè)定23-24
  • 2.2.4.4 滸苔多糖對(duì)鐵離子還原能力的測(cè)定24
  • 2.2.5 滸苔多糖對(duì)雞外周血淋巴細(xì)胞最大安全濃度的測(cè)定24
  • 2.2.6 外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)24-25
  • 2.3 動(dòng)物分組及處理25
  • 2.4 樣品采集方法25-26
  • 2.5 生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定26
  • 2.6 免疫性能指標(biāo)測(cè)定26-28
  • 2.6.1 免疫器官指數(shù)測(cè)定26
  • 2.6.2 腸道組織形態(tài)測(cè)定26
  • 2.6.3 NDV特異性SIg A抗體水平的測(cè)定26-27
  • 2.6.3.1 抗原最佳包被濃度和樣品最適稀釋濃度的確定26-27
  • 2.6.3.2 間接ELISA程序27
  • 2.6.4 血清HI抗體效價(jià)的測(cè)定27-28
  • 2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析28-29
  • 3 結(jié)果與分析29-49
  • 3.1 滸苔多糖含量的測(cè)定29
  • 3.2 滸苔多糖的紅外光譜分析29
  • 3.3 多糖的抗氧化活性29-32
  • 3.3.1 滸苔多糖對(duì)DPPH·自由基的清除能力29-30
  • 3.3.2 滸苔多糖對(duì)羥基自由基的清除能力30-31
  • 3.3.3 滸苔多糖對(duì)超氧陰離子自由基(O_2~-·)的清除能力31
  • 3.3.4 滸苔多糖對(duì)鐵離子的還原能力31-32
  • 3.4 滸苔多糖對(duì)雞外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響32-33
  • 3.4.1 滸苔多糖最大安全濃度的確定32-33
  • 3.4.2 滸苔多糖對(duì)外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響33
  • 3.4.3 滸苔多糖協(xié)同PHA刺激對(duì)外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響33
  • 3.5 滸苔多糖對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響33-36
  • 3.5.1 滸苔多糖對(duì)平均日采食量的影響33-34
  • 3.5.2 滸苔多糖對(duì)平均日增重的影響34-35
  • 3.5.3 滸苔多糖對(duì)料肉比的影響35-36
  • 3.6 滸苔多糖對(duì)肉仔雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響36-44
  • 3.6.1 滸苔多糖對(duì)十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響36-39
  • 3.6.2 空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)變化39-41
  • 3.6.3 回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化41-44
  • 3.7 滸苔多糖對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響44-45
  • 3.7.1 滸苔多糖對(duì)脾臟指數(shù)的影響44-45
  • 3.7.2 滸苔多糖對(duì)法氏囊指數(shù)的影響45
  • 3.8 滸苔多糖對(duì)NDV特異性SIg A抗體水平的影響45-48
  • 3.8.1 間接ELISA方法最佳反應(yīng)條件確定結(jié)果45-46
  • 3.8.2 膽汁中NDV特異性SIg A抗體水平變化46
  • 3.8.3 十二指腸洗液中NDV特異性SIg A抗體水平變化46-47
  • 3.8.4 氣管洗液中NDV特異性SIg A抗體水平變化47-48
  • 3.9 滸苔多糖對(duì)血清HI抗體效價(jià)的影響48-49
  • 4 討論49-55
  • 4.1 多糖的提取、純化及結(jié)構(gòu)鑒定49-50
  • 4.1.1 多糖的提取及純化方法49
  • 4.1.2 多糖的含量測(cè)定方法49
  • 4.1.3 多糖的紅外光譜分析49-50
  • 4.2 多糖的抗氧化能力50
  • 4.3 滸苔多糖對(duì)雞外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響50-51
  • 4.3.1 滸苔多糖對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響50-51
  • 4.3.2 滸苔多糖對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的影響51
  • 4.4 滸苔多糖對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響51-52
  • 4.5 滸苔多糖對(duì)雞腸道發(fā)育的影響52-53
  • 4.6 滸苔多糖對(duì)肉仔雞新城疫疫苗免疫應(yīng)答的影響53-55
  • 4.6.1 滸苔多糖對(duì)雛雞免疫器官發(fā)育的影響53-54
  • 4.6.2 滸苔多糖對(duì)雛雞黏膜免疫的影響54
  • 4.6.3 滸苔多糖對(duì)雛雞體液免疫的影響54-55
  • 5 結(jié)論55-56
  • 參考文獻(xiàn)56-65
  • 致謝65-66
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況66

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7 丁月e

本文編號(hào):269532


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