【摘要】：隱孢子蟲(chóng)(Cryptosporidium)和藍(lán)氏賈第蟲(chóng)(Giardia lamblia)是兩種重要的機(jī)會(huì)性人獸共患的腸道原蟲(chóng),宿主范圍廣泛,可在全世界范圍內(nèi)流行,對(duì)人類健康造成威脅,也對(duì)動(dòng)物的生產(chǎn)性能產(chǎn)生了不良影響。牦牛是青海省的優(yōu)勢(shì)種家畜,掌握該省牦牛Cryptosporidium和G.lamblia的流行情況,明確這兩種原蟲(chóng)在牦牛的種群結(jié)構(gòu),可為牦牛隱孢子蟲(chóng)病和賈第蟲(chóng)病的防控提供參考數(shù)據(jù)。利用套式PCR技術(shù)對(duì)青海省牦牛Cryptosporidium和G.lamblia的流行情況進(jìn)行調(diào)查,并對(duì)其種群結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,獲得以下結(jié)果:1.對(duì)從青海省7個(gè)地區(qū)采集的1027份牦牛糞便樣品進(jìn)行Cryptosporidium 18S rRNA和HSP70基因的PCR擴(kuò)增分析發(fā)現(xiàn),牦牛Cryptosporidium總感染率為2.53%(26/1027),7個(gè)地區(qū)間及各季節(jié)間感染率總體差異均不顯著。6月齡及其以內(nèi)的犢牦牛和6月齡以上牦牛的Cryptosporidium感染率分別為6.25%和2.35%,兩者之間差異不顯著。種系發(fā)育分析結(jié)果表明,青海省存在瑞氏隱孢子蟲(chóng)(C.ryanae)和牛隱孢子蟲(chóng)(C.bovis)的感染,其中,C.ryanae是青海省感染牦牛的Cryptosporidium優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種。2.對(duì)從青海省7個(gè)地區(qū)采集的1027份牦牛糞便樣品基于TPI基因進(jìn)行藍(lán)氏賈第蟲(chóng)(G.lamblia)感染情況的檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)總感染率為2.04%(21/1207),7個(gè)地區(qū)間及各季節(jié)間感染率差異均不顯著,但6月齡及其以內(nèi)的犢牦牛和6月齡以上的牦牛G.lamblia感染率之間差異顯著,分別為8.33%和1.73%。序列比對(duì)結(jié)果發(fā)現(xiàn)有G.lamblia集聚體E(18/21)和集聚體A(3/21)存在。發(fā)現(xiàn)了1個(gè)G.lamblia集聚體A亞型A1和4個(gè)G.lamblia集聚體E亞型(E1~E4),其中E2~E4為首次鑒定的集聚體亞型�；赥PI、BG和GDH 3個(gè)基因的多位點(diǎn)序列分型結(jié)果顯示,共有3份G.lamblia分離株在3個(gè)位點(diǎn)均擴(kuò)增成功,構(gòu)成3個(gè)不同的MLGs。其中2個(gè)集聚體E的MLGs在玉樹(shù)州的牦牛發(fā)現(xiàn),1個(gè)集聚體A的MLG在西寧市的牦牛中發(fā)現(xiàn)。
【圖文】：

注： 為采樣地點(diǎn)Note： Sampling site圖 2-1 青海省牦牛糞便樣品來(lái)源的地理分布Fig. 2-1 Geographical origins of fecal samples from yaks in Qinghai province2.1.1.2 主要儀器設(shè)備電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）、微型水平電泳槽（北京六一生物科技有限公司）、DYY-12 型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀（北京市六一儀器廠）、全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)（北京賽智創(chuàng)業(yè)科技有限公司）、1-14 小型臺(tái)式離心機(jī)（SIGMA，德國(guó)）、FA135s 電子天平（上海�？惦娮觾x器廠）、手掌離心機(jī)（Scilogex，，美國(guó)）、高速離心機(jī)（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）、渦旋混合器（海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司）、電數(shù)顯恒溫水浴鍋（國(guó)華電器有限公司公司）、單道移液器（大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）、PCR 擴(kuò)增儀（杭州博日科技有限公司）、潔凈工作臺(tái)（蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司）、IMS 系列全自動(dòng)雪花制冰機(jī)（雪科電器有限公司）。2.1.1.3 主要試劑及溶液

視為差異顯著，當(dāng) P≥0.成功測(cè)序的陽(yáng)性樣本核苷酸序列進(jìn)行l(wèi) Alignment Search Tool（BLAST）在pson et al. 1997）。利用 MEGA 7.0.26bor-joining），自展值為 1000，Kimurayi 和 C. parvum 為參考序列，GenBankAB089290。 以努氏內(nèi)阿米巴（Enta外群。um PCR 擴(kuò)增結(jié)果樣品中，有 26 份樣品成功擴(kuò)增出A 基因目的片段（圖 2-2）。在 26 份陽(yáng)的目的片段（圖 2-3）。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S858.23

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2639396