【摘要】：在獸醫(yī)臨床中,奶牛乳房炎是規(guī)模化奶牛養(yǎng)殖場中最常見的疾病。牛源性鏈球菌是引發(fā)該病的主要病原菌之一。目前,國內(nèi)外針對奶牛乳房炎還沒有較為理想的免疫疫苗,仍主要以抗菌類藥物進(jìn)行防治。然而,由于近些年抗菌藥物的廣泛應(yīng)用乃至于亂用,導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的普遍升高,并呈現(xiàn)出高程度、多重耐藥的發(fā)展趨勢,對人和動物健康及公共衛(wèi)生安全造成潛在威脅。本實驗收集2016-2017年我國部分地區(qū)規(guī)模化奶牛養(yǎng)殖場乳樣63份,經(jīng)分離培養(yǎng)、應(yīng)用鏈球菌超氧化物歧化酶(sodA基因)進(jìn)行PCR擴(kuò)增以獲得乳房鏈球菌35株,總體分離率達(dá)到55.56%。對臨床分離菌株的7種常見毒力基因進(jìn)行PCR檢測,結(jié)果顯示,scpB基因檢出率最高為68.57%,其次為cfb(57.14%)、cyl(48.57%)、glnA(31.43%)、hylB(22.86%)、lmb(8.57%),bac基因未檢測到。采用Kirby-Bauer(K-B)藥敏紙片擴(kuò)散法檢測35株乳房鏈球菌對30種抗菌藥物的敏感性和耐藥性,并且檢測10種常見耐藥基因的攜帶情況。結(jié)果顯示,臨床分離菌株對磺胺甲惡唑表現(xiàn)為高度耐藥,耐藥率高達(dá)85.72%;而對土霉素、多西環(huán)素、四環(huán)素表現(xiàn)相對敏感,耐藥率為31.43%、22.86%和20%。耐藥基因的檢測結(jié)果顯示,氨基糖苷類aacC2(57.14%)、aacC4(42.86%)的檢出率最高;β-內(nèi)酰胺類blaTEM(48.57%)和blaCTX-M(31.43%)及喹諾酮類GyrA(37.14%)和ParC(37.14%)檢出率大體相似;大環(huán)內(nèi)酯類ermB(20.00%)和mefA(17.14%)相對較低,氨基糖苷類的AphA3和大環(huán)內(nèi)酯類的ermA均未檢測到。采用微量肉湯稀釋法和棋盤法測定阿米卡星(AK)、頭孢噻呋(EFT)、紅霉素(E)以及馬波沙星(MBF)單用及聯(lián)用后對乳房鏈球菌的最小抑菌濃度(MIC),計算部分抑菌濃度指數(shù)(FIC),判斷藥物聯(lián)用后的相互作用;采用瓊脂二倍稀釋法測定藥物單用及聯(lián)用后對乳房鏈球菌的的防突變濃度(MPC),計算選擇指數(shù)SI(MPC/MIC),判定能否縮小耐藥突變選擇窗(MSW),篩選出最佳聯(lián)合用藥方案。結(jié)果表明:單用時,AK、EFT、E、MBF的MIC單范圍分別為8-64、0.5-8、0.125-16、1-16μg/mL;聯(lián)用后,AK與EFT、E、MBF的FIC指數(shù)分別為0.625-1、0.3125-0.75、0.3125-0.75,說明AK分別與其他三種藥物聯(lián)用后,對乳房鏈球菌病均具有協(xié)同或相加作用。藥物單獨應(yīng)用時,AK、EFT、E、MBF的MPC聯(lián)分為128-512、64-512、16-256、64-512μg/mL;AK與EFT、E、MBF聯(lián)合應(yīng)用后,SI分別縮小了1-2、1-2、2-4倍,說明AK分別與其他三種藥物聯(lián)用后均可以縮小MSW,且AK與MBF聯(lián)用后作用較為明顯。本實驗通過對我國部分地區(qū)規(guī)�；膛ｐB(yǎng)殖場乳房鏈球菌毒力基因和耐藥現(xiàn)狀的分析,為研制以其鏈球菌毒力基因為抗原的新型疫苗提供理論依據(jù),并且通過探討體外臨床上相對敏感的抗菌藥物聯(lián)用對其耐藥突變選擇窗的影響,為緩解其耐藥現(xiàn)狀、減少乳房鏈球菌耐藥突變菌株的產(chǎn)生提供了實驗數(shù)據(jù),對防治、指導(dǎo)臨床合理用藥以及新藥研發(fā)具有較大的積極指導(dǎo)意義。
【圖文】：

基糖苷類、以紅霉素為代表的大環(huán)內(nèi)以及以動物專用抗生素頭孢噻呋為代基糖苷類抗菌藥物的耐藥機(jī)制osides）抗生素是臨床上常用的可以抑抗菌藥物。具有抗菌譜廣、殺菌作用對許多致病菌有抗生素后效應(yīng)（PAE用的特點，，其隨之產(chǎn)生的耐藥問題日藥機(jī)制主要包括兩種[43]。一種是細(xì)氨基糖苷類藥物，使藥物與核糖體結(jié)藥的主要機(jī)制[44]。臨床上常見的氨基 AAC）、O-核苷轉(zhuǎn)移酶（五種 ANT）的靶位修飾作用，氨基糖苷類抗菌藥抗菌作用從而產(chǎn)生耐藥性。另外，藥積等方式來使氨基糖苷類藥物產(chǎn)生耐

床上革蘭陰性桿菌中對阿米卡星耐藥球菌屬中的甲氧西林敏感株有較好的大多數(shù)產(chǎn)生耐藥，且對厭氧菌無效�；蝾^孢菌素類藥物合用常�？梢垣@得內(nèi)酰胺類抗菌藥物的耐藥機(jī)制）抗生素是一種人和動物臨床常見的物作用機(jī)制相似，均能抑制胞壁粘肽菌體最后膨脹裂解。β-內(nèi)酰胺類藥物活性、毒性較低、用途廣泛、臨床治一類。除了對細(xì)菌細(xì)胞壁的影響，β-，缺乏自溶酶的突變菌株則表現(xiàn)出不結(jié)合蛋白（PBPs）的靶位突變和非 PB素結(jié)合蛋白耐藥基因[52]。β-內(nèi)酰胺酶菌耐藥[53]。國內(nèi)外目前在臨床分離的鏈內(nèi)酰胺酶介導(dǎo)產(chǎn)生，亞洲地區(qū)常見的主 等。鏈球菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物普遍
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S852.61

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2630547