發(fā)布時(shí)間：2020-04-08 13:14

【摘要】：牛精子冷凍保存技術(shù)已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用,但是綿羊與山羊精子解凍后活力和受精率與牛凍精相比明顯低下。為了探索綿羊與山羊精子解凍后活力以及受精率下降的原因,為提高綿羊與山羊精子解凍后活力以及受精率提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了以下三個方面的研究:1.檢測比較了牛、綿羊、山羊精子冷凍處理前后精子頂體完整率及精子頭部超微結(jié)構(gòu);2.檢測比較了牛、綿羊、山羊精子冷凍處理前后精子活力、透明質(zhì)酸酶活性、頂體蛋白酶活性;3.對比分析了牛、綿羊、山羊精子體外受精能力。本研究三部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,(1)經(jīng)吉姆薩染色后精子頂體共分為5種類型,(1)頂體完整、(2)頂體輕微膨脹、(3)頂體膨脹、(4)頂體部分脫落、(5)頂體全部脫落;其中牛、綿羊、山羊精子冷凍處理前后、以及牛、綿羊、山羊不同物種之間頂體完整率均顯著下降。(2)冷凍處理前后精子頭部超微結(jié)構(gòu)共分為4種類型,(1)頂體與質(zhì)膜完整、(2)頂體完整、質(zhì)膜膨脹、(3)頂體膨脹、(4)頂體與質(zhì)膜囊泡化;牛冷凍精子的前3種類型占的比例山羊綿羊;牛、綿羊、山羊精子冷凍保存處理后精子頂體完整率與超微結(jié)構(gòu)顯示了物種差異。第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,(1)牛、綿羊、山羊精子在冷凍處理后活力均顯著下降;冷凍處理導(dǎo)致各物種活力均有下降,牛冷凍精子活力綿羊山羊,物種之間存在顯著差異;(2)牛、綿羊、山羊精子在冷凍處理后透明質(zhì)酸酶活性、頂體蛋白酶活性均顯著下降,并且牛冷凍精子透明質(zhì)酸酶活性、頂體蛋白酶活性綿羊山羊,物種之間存在顯著差異。第三部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,(1)牛、綿羊、山羊精子在冷凍處理前后受精卵裂率均是牛綿羊山羊,但各組之間沒有顯著差異;(2)冷凍處理導(dǎo)致各物種受精卵裂率均有下降且存在顯著差異。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明冷凍保存處理對牛、綿羊、山羊精子的頂體、細(xì)胞膜具有損傷作用,并且在冷凍耐受性方面存在比較明顯的物種差異;另一方面,冷凍保存處理也造成牛、綿羊、山羊與受精相關(guān)的活力下降、透明質(zhì)酸酶與頂體蛋白酶的部分流失,從而導(dǎo)致受精能力下降。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測,冷凍處理影響了牛、綿羊、山羊與受精相關(guān)的結(jié)構(gòu)、功能變化,但是不同物種之間存在的差異,其原理或機(jī)制需要從生殖生物學(xué)與生物化學(xué)角度進(jìn)一步研究。
【圖文】：

（12）修塊：用刀片將包埋聚合好的樣品修成四邊光滑的梯形體；（13）超薄切片：用 Hitachi H-7650 型超薄切片機(jī)制備獲得 70-90 nm 的超薄片。（14）觀察與取照。1.3 統(tǒng)計(jì)分析運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué) SPSS 17.0 軟件對所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)程序?yàn)椋簡我蛩胤讲钗觯╫ne-way ANOVA）。數(shù)據(jù)表示分別以：平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，即：x±SD。每組數(shù)據(jù)影響重3 次。檢驗(yàn)結(jié)果表示：p＜0.05 時(shí)為差異顯著，，p＞0.05 時(shí)為差異不顯著。1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.4.1 冷凍保存處理對精子頂體完整率的影響

圖 2.2 牛、綿羊以及山羊精子冷凍前后精子頂體完整率的比較mparison of sperm acrosome integrity rate before and after cryopreservation among cattle, shgoat字、相同字母表示同一物種的新鮮精子與冷凍精子之間有差異，相同數(shù)字、不同字母表精子或者冷凍精子之間有差異。圖 2.2 所示，分析牛、綿羊以及山羊冷凍前后精子的頂體完整率，結(jié)果表明牛冷凍精子頂體完整率（36.45±5.33）與牛新鮮精子頂體完整率（64.10 ±4.理后牛精子頂體完整率下降，且有顯著差異（P＜0.05）。綿羊冷凍精子頂體完整率（23.27±4.15）與綿羊新鮮精子頂體完整率 （51.7處理后綿羊精子頂體完整率下降，且有顯著差異（P＜0.05）。山羊冷凍精子頂體完整率（41.01±2.37）與山羊新鮮精子頂體完整率 （59.3處理后山羊精子頂體完整率下降，且有顯著差異（P＜0.05）。牛冷凍精子頂體完整率（36.45±5.33）與綿羊冷凍精子頂體完整率（23.27±4
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S823;S826;S827

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本文編號：2619386