【摘要】：第一部分:汶上蘆花雞的遺傳多樣性分析汶上蘆花雞分布于山東省汶上縣及附近地區(qū),該雞種因全身羽毛均為黑白相間、寬窄一致的斑紋,俗稱“蘆花雞”。汶上蘆花雞的形成歷史悠久,是山東省優(yōu)良地方品種之一,因其耐粗飼、肉質(zhì)好、抗病力強(qiáng)、產(chǎn)蛋較多,深受群眾喜愛,2002年10月被列入山東省地方良種家禽重點(diǎn)保護(hù)名錄。微衛(wèi)星又稱短序列串連重復(fù)(short tandem repeats,STR)或簡(jiǎn)單串連重復(fù)(simple sequence repeats,SSR),是繼RFLPs之后出現(xiàn)的第二代分子遺傳標(biāo)記。因具有在基因組中數(shù)量多、分布廣且均勻、多態(tài)性豐富等顯性遺傳以及檢測(cè)簡(jiǎn)便、快捷等特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于家養(yǎng)動(dòng)物群體的遺傳多樣性檢測(cè)、群體遺傳距離分析、起源與進(jìn)化關(guān)系和基因組掃描等研究。本研究采用聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)和國(guó)際動(dòng)物遺傳學(xué)會(huì)(ISAG)聯(lián)合推薦的27對(duì)微衛(wèi)星引物,對(duì)濟(jì)寧汶上蘆花雞的100個(gè)個(gè)體(60只母雞,40只公雞)進(jìn)行了遺傳多樣性檢測(cè),分析了該群體在DNA水平上的遺傳多樣性,并提出了可行的保種措施。研究結(jié)果如下:1.在27個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)中,共檢測(cè)到86個(gè)等位基因,每個(gè)微衛(wèi)星座位的等位基因數(shù)2到6個(gè)不等,平均等位基因數(shù)為3.185,平均期望雜合度和多態(tài)信息含量分別為0.4655和0.4023。2.對(duì)分布在不同地方的三個(gè)群體的遺傳距離分析表明,群體間的遺傳距離在0.05-0.10之間。綜上所述,汶上蘆花雞群體的遺傳多樣性偏低,且群體間存在一定程度的近交和雜合度缺失。因此建議采取保種與開發(fā)相結(jié)合的方法來保存這一地方品種資源,以通過雜交利用獲得的收益促保種,通過擴(kuò)大保種群、品種選育為開發(fā)利用提供保障。第二部分:雞CCT6A基因過表達(dá)的相關(guān)研究CCT是真核生物胞漿中的一種分子伴侶,而且在肌動(dòng)蛋白、微管蛋白的組裝和折疊中發(fā)揮著重要的作用。雞CCT6A基因位于19號(hào)染色體,包括14個(gè)外顯子,CDS區(qū)1593bp,編碼530個(gè)氨基酸。本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)濟(jì)寧百日雞的研究發(fā)現(xiàn),從70日齡到300日齡,CCT6A的表達(dá)量顯著升高,從300日齡到500日齡,CCT6A的表達(dá)量顯著降低,揭示CCT6A可能在性成熟過程中有重要作用。本研究旨在通過構(gòu)建雞體外卵泡膜細(xì)胞模型,并利用過表達(dá)技術(shù)增加CCT6A基因的表達(dá),探究CCT6A基因?qū)β雅菽ぜ?xì)胞的影響,為進(jìn)一步探究CCT6A基因?qū)﹄u卵泡發(fā)育的影響提供理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:1.熒光定量和Western Blotting結(jié)果顯示,與對(duì)照組(pcDNA3.1)相比,轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒(pcDNA3.1-CCT6A)后,CCT6A基因m RNA的表達(dá)量和蛋白質(zhì)表達(dá)量均顯著上升(P0.05);2.熒光定量結(jié)果顯示,與對(duì)照組(pcDNA3.1)相比,轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒(pcDNA3.1-CCT6A)后,BCL-2基因和Caspase-3基因的表達(dá)量分別上升和下降,但差異不顯著(P0.05)。綜上所述,與對(duì)照組(pcDNA3.1)相比,轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒(pcDNA3.1-CCT6A)后,CCT6A基因mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)量顯著上升(p0.05),表明過表達(dá)載體成功轉(zhuǎn)染到雞卵泡膜細(xì)胞中。過表達(dá)CCT6A基因后,雞卵泡膜細(xì)胞中抑制凋亡基因BCL-2的表達(dá)升高,Caspase-3基因的表達(dá)降低,表明細(xì)胞處于抑制凋亡狀態(tài),增強(qiáng)了細(xì)胞增殖的能力。由此可以得出,在雞卵泡發(fā)育過程中,CCT6A基因可能通過影響了BCL-2基因和Caspase-3基因的表達(dá)而間接影響雞卵泡膜細(xì)胞的增殖或凋亡,進(jìn)而影響雞卵泡發(fā)育過程,具體的調(diào)控機(jī)制還有待研究。
【學(xué)位授予單位】：曲阜師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S831

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 楊春紅;杜胭脂;姜運(yùn)良;;Cct6a對(duì)雞卵泡膜細(xì)胞Bcl-2和Caspase-3表達(dá)的影響[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2015年07期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 楊春紅;雞CCT6A基因的功能及啟動(dòng)子區(qū)的多態(tài)性研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：2587304