【摘要】：目的:確定豬圓環(huán)病毒2型衣殼蛋白(PCV2)感染引起未折疊蛋白反應(yīng)的關(guān)鍵病毒蛋白,以及探究PCV2感染中未折疊蛋白反應(yīng)與凋亡之間的聯(lián)系。創(chuàng)新點(diǎn):本文首次鑒定出PCV2感染引起未折疊蛋白反應(yīng)的關(guān)鍵病毒蛋白。方法:構(gòu)建表達(dá)病毒蛋白的真核表達(dá)載體,通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PK-15細(xì)胞,采用免疫印跡檢測(cè)未折疊蛋白反應(yīng)通路的關(guān)鍵分子;利用RNA干擾抑制perk基因的表達(dá)來驗(yàn)證激活的通路;通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上游分子PERK并利用免疫印跡和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡,研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與凋亡之間的聯(lián)系。結(jié)論:PCV2 Rep和Cap蛋白能激活PERK-e IF2α-ATF4-CHOP通路,PERK通路在Cap誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中起重要作用。

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